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一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的制作方法

文檔序號:261043閱讀:576來源:國知局
專利名稱:一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技木,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,更具體的說是ー種在現(xiàn)有辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)上,増加一道無菌水震蕩浸種的エ序,排毒充氧,促進(jìn)芽苗生長,提高無菌苗培養(yǎng)效率的方法。
背景技術(shù)
無菌外植體的獲得是植物組織培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié),可用于原生質(zhì)體融合、細(xì)胞培養(yǎng)、 離體快繁及植物轉(zhuǎn)基因等方面。雙子葉植物無菌外植體的獲取多采用的是將種子滅菌后轉(zhuǎn)變?yōu)闊o菌苗后,取其葉片、下胚軸進(jìn)行離體快繁或轉(zhuǎn)基因研究,因而,無菌苗的培養(yǎng)周期及群體的整齊程度成為制約后續(xù)試驗環(huán)節(jié)的瓶頸。目前,辣椒無菌苗獲得一般都采用自來水清洗一こ醇消毒一氯化汞消毒一無菌水清洗一培養(yǎng)基接種的傳統(tǒng)程序。這種方法的缺點(diǎn)在于無菌苗生長慢,成苗時間長,效率低。經(jīng)分析,我們認(rèn)為,上述方法無菌苗生長不良的原因ー是在經(jīng)過氯化汞消毒后,種子表面或內(nèi)部殘留的氯化汞,對種子產(chǎn)生毒害,影響種子的生活力;ニ是將種子接種在瓊脂培養(yǎng)基上,由于接種深淺不同、體位不同等原因,使得種子吸水緩慢且不夠均勻,導(dǎo)致出苗緩慢且大小不一,工作效率低下。

發(fā)明內(nèi)容
一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)明目的是,針對現(xiàn)有辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的不足,提供一種高效率的辣椒無菌苗培養(yǎng)新技木。本發(fā)明的特點(diǎn)是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上,在辣椒種子接種之前増加一道無菌水震蕩浸種的操作,提高辣椒無菌苗的成苗速度、出苗率及整齊度。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的
一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)包括自來水清洗、超凈臺消毒、こ醇消毒、氯化汞消毒、無菌水清洗、培養(yǎng)基接種エ序,其特點(diǎn)在于,在培養(yǎng)基接種之前加入了一道無菌水振蕩浸種的エ作,其整個操作的程序變成自來水清洗一超凈臺消毒一こ醇消毒一氯化汞消毒一無菌水清洗一無菌水震蕩浸種一培養(yǎng)基接種共七道エ序,具體步驟如下
①自來水清洗將種子裝在尼龍種子袋中,置于自來水下沖洗3-5分鐘。②超凈臺消毒將種子袋置于超凈臺內(nèi)的組培空瓶內(nèi),噴灑75%酒精進(jìn)行臺面及空間消毒,開啟紫外燈、打開無菌風(fēng)開關(guān),滅菌30min。③こ醇消毒用75%酒精浸沒組培瓶內(nèi)種子袋,消毒lmin。④氯化汞消毒將種子轉(zhuǎn)入0. 1%氯化汞溶液中,消毒15min。⑤無菌水清洗將種子轉(zhuǎn)入無菌水中搖晃清洗30s。⑥無菌水浸種將種子轉(zhuǎn)入無菌水中,30°C振蕩浸種24hr。⑦接種將種子接種于僅含瓊脂粉的培養(yǎng)基表面,25°C催芽。
一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的有益效果本發(fā)明在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上,增加無菌水震蕩浸種環(huán)節(jié),可以產(chǎn)生如下的作用ー是24hr的浸種使種子消毒時殘留在種子上的氯化汞得以充分釋出,起到排除毒素的作用;ニ是通過浸種使辣椒種子在接種前均勻地吸足水分,滿足了種子萌動對水分的需求;三是震蕩浸種還可以增加無菌水內(nèi)的溶氧量,也有利于激發(fā)種子的萌動。由于上述原因,本發(fā)明產(chǎn)生了如下的有益效果第一,芽苗生長快,傳統(tǒng)的方法接種到成苗需30-45天甚至更長,而采用本方法僅需20天左右。第二,發(fā)芽整齊。現(xiàn)有技術(shù)培養(yǎng)的辣椒無菌苗,大小不一,而本發(fā)明的方法培養(yǎng)出的辣椒苗大小整齊一致;第三,本方法簡單易行,操作方便,便于推廣。簡言之,本發(fā)明的有益效果是排毒充氧,促進(jìn)種子萌動,促進(jìn)芽苗生長,簡單易行。
具體實(shí)施例方式 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一歩的描述。 實(shí)施例1 :用一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)9050辣椒無菌苗1.自來水清洗將100粒9050辣椒種子裝在尼龍種子袋中,置于自來水下沖洗3-5分鐘。2.超凈臺消毒將種子袋置于超凈臺內(nèi)的組培空瓶內(nèi),噴灑75%酒精進(jìn)行臺面及空間消毒,開啟紫外燈、打開無菌風(fēng)開關(guān),滅菌30min。3.こ醇消毒用75%酒精浸沒組培瓶內(nèi)種子袋,消毒lmin。4.氯化汞消毒將種子轉(zhuǎn)入0. 1%氯化汞溶液中,消毒15min。5.無菌水清洗將種子轉(zhuǎn)入無菌水中搖晃清洗30s。6.無菌水浸種將種子轉(zhuǎn)入無菌水中,30°C振蕩浸種24hr。7.接種將種子接種于僅含瓊脂粉的培養(yǎng)基表面,25°C催芽。通過以上步驟在25瓶中獲得脫殼的無菌幼苗92株,出苗率達(dá)92% ;培養(yǎng)歷時20天,比現(xiàn)有的技術(shù)減少10-25天左右,且無菌苗生長整齊茁壯。實(shí)施例2 :用一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)7036辣椒無菌苗1.自來水清洗將120粒7036辣椒種子裝在尼龍種子袋中,置于自來水下沖洗3-5分鐘。2.超凈臺消毒將種子袋置于超凈臺內(nèi)的組培空瓶內(nèi),噴灑75%酒精進(jìn)行臺面及空間消毒,開啟紫外燈、打開無菌風(fēng)開關(guān),滅菌30min。3.こ醇消毒用75%酒精浸沒組培瓶內(nèi)種子袋,消毒lmin。4.氯化汞消毒將種子轉(zhuǎn)入0. 1%氯化汞溶液中,消毒15min。5.無菌水清洗將種子轉(zhuǎn)入無菌水中搖晃清洗30s。6.無囷水浸種將種子轉(zhuǎn)入無囷水中,30 C振湯浸種24hr。7.接種將種子接種于僅含瓊脂粉的培養(yǎng)基表面,25°C催芽。通過以上步驟在30瓶中獲得脫殼的無菌幼苗104株,出苗率達(dá)86. 7% ;培養(yǎng)歷時20天,比現(xiàn)有的技術(shù)減少10-25天左右,且無菌苗生長整齊茁壯。
權(quán)利要求
1.一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)包括自來水清洗、超凈臺消毒、乙醇消毒、氯化汞消毒、無菌水清洗、培養(yǎng)基接種工序,其特點(diǎn)在于,在培養(yǎng)基接種之前加入了一道無菌水振蕩浸種的工作,其整個操作的程序變成自來水清洗一乙醇消毒一氯化汞消毒一無菌水清洗一無菌水震蕩浸種一培養(yǎng)基接種共七道工序,具體步驟如下①自來水清洗將種子裝在尼龍種子袋中,置于自來水下沖洗3-5分鐘;②超凈臺消毒將種子袋置于超凈臺內(nèi)的組培空瓶內(nèi),噴灑75%酒精進(jìn)行臺面及空間消毒,開啟紫外燈、打開無菌風(fēng)開關(guān),滅菌30min ;③乙醇消毒用75%酒精浸沒組培瓶內(nèi)種子袋,消毒Imin;④氯化汞消毒將種子轉(zhuǎn)入O.1%氯化汞溶液中,消毒15min ;⑤無菌水清洗將種子轉(zhuǎn)入無菌水中搖晃清洗30s;⑥無菌水浸種將種子轉(zhuǎn)入無菌水中,30°C振蕩浸種24hr;⑦接種將種子接種于僅含瓊脂粉的培養(yǎng)基表面,25°C催芽。
全文摘要
一種辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù),屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域。其主要做法是將現(xiàn)有辣椒無菌苗培養(yǎng)技術(shù)的工序(自來水清洗→超凈臺消毒→乙醇消毒→氯化汞消毒→無菌水清洗→培養(yǎng)基接種)中培養(yǎng)基接種之前加入一道無菌水震蕩浸種環(huán)節(jié),使這個工序由六道變成七道,成為自來水清洗→超凈臺消毒→乙醇消毒→氯化汞消毒→無菌水清洗→無菌水震蕩浸種→培養(yǎng)基接種。本技術(shù)可以對辣椒種子排毒充氧、促進(jìn)萌動、促進(jìn)生長,且具有操作簡便,芽苗生長快、成苗率高,苗體整齊茁壯的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A01H4/00GK103004605SQ20121058821
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月29日
發(fā)明者胡能兵, 隋益虎, 舒英杰, 周玉麗, 何克勤, 張子學(xué), 崔廣榮 申請人:安徽科技學(xué)院
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