本發(fā)明屬于香蕉組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種香蕉組培苗壯苗環(huán)境條件篩選方法。
背景技術(shù)：
香蕉（學(xué)名：Musa nana Lour.）芭蕉科芭蕉屬植物，又指其果實(shí)。熱帶地區(qū)廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養(yǎng)，終年可收獲，在溫帶地區(qū)也很受重視。植株為大型草本，從根狀莖發(fā)出，由葉鞘下部形成高3～6公尺(10～20尺)的假桿；葉長圓形至橢圓形，有的長達(dá)3～3.5公尺(10～11.5尺)，寬65公分(26寸)，10～20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂[1]，由假桿頂端抽出，花多數(shù)，淡黃色；果序彎垂，結(jié)果10～20串，約50～150個(gè)。植株結(jié)果后枯死，由根狀莖長出的吸根繼續(xù)繁殖，每一根株可活多年。原產(chǎn)亞洲東南部：臺(tái)灣、海南、廣東、廣西等地區(qū)均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果，也是部分地區(qū)的主要糧食，擁有極大市場需求量，對(duì)香蕉進(jìn)行快速繁殖的研究具有一定的必要性，不僅能解決龐大的市場需求量，也能在一定程度上保存優(yōu)良的香蕉品種，組織培養(yǎng)是香蕉快速繁殖的方法之一，然而現(xiàn)有的香蕉培養(yǎng)基中極少有通過增強(qiáng)光源調(diào)節(jié)香蕉生長的技術(shù)。
鈰是周期系第ΙΙΙ族副族鑭系元素，一種稀土元素。原子序數(shù)58。穩(wěn)定同位素：136、138、140、142?；疑饘?，有展性。密度：正方晶體6.9，立方晶體6.7。熔點(diǎn)799℃，沸點(diǎn)3426℃。鈰是一種銀灰色的活潑金屬，粉末在空氣中易自燃，易溶于酸。鈰的名稱來源于小行星谷神星的英文名。鈰在地殼中的含量約0.0046%，是稀土元素中豐度最高的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
基于現(xiàn)有技術(shù)存在上述問題，本發(fā)明提供一種香蕉組培苗壯苗環(huán)境條件篩選方法，通過使用單一變量法調(diào)整測(cè)試增強(qiáng)光源的波長對(duì)香蕉組織培養(yǎng)苗的生理影響，確定最適增強(qiáng)光源波長，并根據(jù)不同波長光源對(duì)香蕉組培苗的影響，確定不同波長光源出組合，并通過保持增強(qiáng)光源不變反向確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基，同時(shí)引入組培苗的葉片葉綠素含量和植株平均重量作為篩選標(biāo)準(zhǔn)，更加適合商業(yè)工廠化生產(chǎn)。
一種香蕉組培苗壯苗環(huán)境條件篩選方法，其包括以下步驟：
步驟S10確定初步篩選范圍，檢索查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，對(duì)比其他植物物種組培壯苗過程中添加增強(qiáng)光源種類并確定光源波長的初步篩選范圍；
步驟S20選擇外植體，選擇健康、生長環(huán)境一致并且生長狀態(tài)相似的香蕉組培苗幼苗；
步驟S30對(duì)照培養(yǎng)，以B5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加香豆素的濃度是為50mg/L、NAA（萘乙酸）的濃度為1mg/L、硝酸鑭的濃度為3g/L，瓊脂粉的濃度為10g/L、白砂糖的濃度為30g/L，配制成測(cè)試用培養(yǎng)基，分別接種相同量的香蕉組培苗幼苗，并進(jìn)行常規(guī)壯苗組織培養(yǎng)作為對(duì)照組，在常規(guī)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上條件不同波段增強(qiáng)增強(qiáng)光源作為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組都設(shè)置多個(gè)平行組；
步驟S40記錄檢測(cè)參數(shù)，培養(yǎng)20天后統(tǒng)計(jì)每個(gè)稀土元素和香豆素濃度梯度中幼苗的葉片葉綠素含量；
步驟S50生長量計(jì)算，分別將相同濃度梯度的每個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組中的香蕉組培苗取出，用清水沖洗干凈，對(duì)同一試驗(yàn)組的平行樣本分別進(jìn)行稱重，計(jì)算出植株平均重量；
步驟S60計(jì)算評(píng)估因數(shù)，將葉綠素含量數(shù)值加上植株平均重量數(shù)值的十分之一得出評(píng)估因數(shù)，對(duì)比不同實(shí)驗(yàn)組的評(píng)估因數(shù)，選出評(píng)估因數(shù)最大的實(shí)驗(yàn)組，確定最適光源波長范；
步驟S70縮小篩選范圍，使用步驟S60中挑選出的增強(qiáng)光源波長范圍重復(fù)進(jìn)行步驟S10-S60縮小篩選范圍或者確定最適波長范圍；
步驟S80反向篩選基礎(chǔ)培養(yǎng)基，使用步驟S70確定的最適波長范圍搭配不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基，重復(fù)步驟S40和步驟S50，并使用步驟S60的計(jì)算方法計(jì)算評(píng)估因數(shù)，確定最適基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
步驟S90不同波長組合篩選，通過單一因數(shù)確定不同波長對(duì)香蕉組培苗增殖的生理參數(shù)影響，調(diào)整最適合波長組合。
優(yōu)選地，所述的步驟S30中每個(gè)實(shí)驗(yàn)組或者對(duì)照組設(shè)置5-15個(gè)平行組。
優(yōu)選地，所述的步驟S70中重復(fù)的次數(shù)是2-3次。
優(yōu)選地，所述的步驟S80中不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括1/2MS培養(yǎng)基、MS培養(yǎng)基、N6培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基、Nitsh培養(yǎng)基、White培養(yǎng)基和Miller培養(yǎng)基。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
一種香蕉組培苗壯苗環(huán)境條件篩選方法，其包括以下步驟：
步驟S10確定初步篩選范圍，檢索查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，對(duì)比其他植物物種組培壯苗過程中添加增強(qiáng)光源種類并確定光源波長的初步篩選范圍；
步驟S20選擇外植體，選擇健康、生長環(huán)境一致并且生長狀態(tài)相似的香蕉組培苗幼苗；
步驟S30對(duì)照培養(yǎng)，以B5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加香豆素的濃度是為50mg/L、NAA（萘乙酸）的濃度為1mg/L、硝酸鑭的濃度為3g/L，瓊脂粉的濃度為10g/L、白砂糖的濃度為30g/L，配制成測(cè)試用培養(yǎng)基，分別接種相同量的香蕉組培苗幼苗，并進(jìn)行常規(guī)壯苗組織培養(yǎng)作為對(duì)照組，在常規(guī)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上條件不同波段增強(qiáng)增強(qiáng)光源作為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組都設(shè)置多個(gè)平行組；
步驟S40記錄檢測(cè)參數(shù)，培養(yǎng)20天后統(tǒng)計(jì)每個(gè)稀土元素和香豆素濃度梯度中幼苗的葉片葉綠素含量；
步驟S50生長量計(jì)算，分別將相同濃度梯度的每個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組中的香蕉組培苗取出，用清水沖洗干凈，對(duì)同一試驗(yàn)組的平行樣本分別進(jìn)行稱重，計(jì)算出植株平均重量；
步驟S60計(jì)算評(píng)估因數(shù)，將葉綠素含量數(shù)值加上植株平均重量數(shù)值的十分之一得出評(píng)估因數(shù)，對(duì)比不同實(shí)驗(yàn)組的評(píng)估因數(shù)，選出評(píng)估因數(shù)最大的實(shí)驗(yàn)組，確定最適光源波長范；
步驟S70縮小篩選范圍，使用步驟S60中挑選出的增強(qiáng)光源波長范圍重復(fù)進(jìn)行步驟S10-S60縮小篩選范圍或者確定最適波長范圍；
步驟S80反向篩選基礎(chǔ)培養(yǎng)基，使用步驟S70確定的最適波長范圍搭配不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基，重復(fù)步驟S40和步驟S50，并使用步驟S60的計(jì)算方法計(jì)算評(píng)估因數(shù)，確定最適基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
步驟S90不同波長組合篩選，通過單一因數(shù)確定不同波長對(duì)香蕉組培苗增殖的生理參數(shù)影響，調(diào)整最適合波長組合。
作為優(yōu)選實(shí)施例，所述的步驟S30中每個(gè)實(shí)驗(yàn)組或者對(duì)照組設(shè)置10個(gè)平行組。
作為優(yōu)選實(shí)施例，所述的步驟S70中重復(fù)的次數(shù)是3次。
作為優(yōu)選實(shí)施例，所述的步驟S80中不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括1/2MS培養(yǎng)基、MS培養(yǎng)基、N6培養(yǎng)基、B5培養(yǎng)基、Nitsh培養(yǎng)基、White培養(yǎng)基和Miller培養(yǎng)基。
經(jīng)過篩選確定如下增強(qiáng)光源具有更高的葉綠素含量和植株平均重量：使用自然光、藍(lán)光增強(qiáng)光源和紅光增強(qiáng)光源照射組培苗幼苗，紅色光源是波段為650nm的紅光，藍(lán)色光源是波段為460nm的藍(lán)光，光照時(shí)間為光照16小時(shí)/黑暗8小時(shí)。