本發(fā)明涉及動(dòng)物模型，具體涉及一種子癇前期小鼠模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、子癇前期(pe)動(dòng)物模型是研究該疾病發(fā)病機(jī)制和開(kāi)發(fā)治療手段的重要工具。以下是一些現(xiàn)有的子癇前期動(dòng)物模型技術(shù)及其缺點(diǎn)：

2、1、轉(zhuǎn)基因子癇前期動(dòng)物模型：提供了一個(gè)更好的平臺(tái)來(lái)研究子癇前期的發(fā)病機(jī)制，尤其是相關(guān)致病基因功能的研究。但目前尚無(wú)一個(gè)理想的轉(zhuǎn)基因子癇前期動(dòng)物模型能夠完全復(fù)制人類子癇前期的所有特征。

3、2、血管生長(zhǎng)因子抑制劑模型：在妊娠第8或第9天大鼠尾靜脈注射載有sflt-1的腺病毒，導(dǎo)致妊娠末期出現(xiàn)血壓升高、蛋白尿及腎臟病變等子癇前期樣改變，但沒(méi)有展示滋養(yǎng)層細(xì)胞的浸潤(rùn)情況，且某些誘導(dǎo)劑在非孕期應(yīng)用也會(huì)出現(xiàn)高血壓、蛋白尿等，缺乏妊娠特異性。

4、3、氧化應(yīng)激模型：多種缺氧誘導(dǎo)因子1α(hif-1α)過(guò)表達(dá)模型被應(yīng)用于子癇前期氧化應(yīng)激的發(fā)病機(jī)制研究。在此模型中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)的異常，無(wú)法全面反映子癇前期的病理變化與病程進(jìn)展。

5、4、炎癥免疫過(guò)度激活模型：通過(guò)注射lps或炎癥因子tnf-α、il-6等來(lái)構(gòu)建子癇前期模型。每種模型都只能模擬子癇前期的部分特征，由于子癇前期病理生理學(xué)和臨床表現(xiàn)的多樣性，目前尚沒(méi)有單一動(dòng)物模型可有效模擬子癇前期的所有特征。

6、5、減子宮灌注壓(rupp)模型：通過(guò)手術(shù)減少子宮的血流，模擬子癇前期的某些特征。該模型沒(méi)有出現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)不足的情況。另外，外科手術(shù)阻塞動(dòng)脈并非子癇前期真正的原因。

7、綜上所述，盡管已有多種子癇前期動(dòng)物模型被建立，但每種模型都有其局限性，且沒(méi)有一種模型能夠完全模擬人類子癇前期的所有特征。這些局限性是子癇前期病因不明和缺乏有效治療手段的重要原因之一。

8、因此，我們開(kāi)發(fā)了一種更理想、更簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的子癇前期動(dòng)物模型，能夠模擬子癇前期患者妊娠期出現(xiàn)高血壓、蛋白尿、胎兒生長(zhǎng)受限為主的臨床表現(xiàn)，以及胎盤功能障礙、滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)程度下降的表型。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種子癇前期小鼠模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，以解決現(xiàn)有技術(shù)的不足。

2、本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

3、本發(fā)明第一方面提供了一種子癇前期小鼠模型，所述子癇前期小鼠模型通過(guò)如下方法構(gòu)建得到：

4、(1)將雌性小鼠與雄性小鼠合籠，次日檢栓，見(jiàn)栓確定該雌性小鼠懷孕，并定為妊娠0.5天；

5、(2)于孕中期開(kāi)始對(duì)孕鼠進(jìn)行經(jīng)口灌胃次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽一段時(shí)間，得到所述子癇前期小鼠模型。

6、進(jìn)一步地，步驟(2)孕中期為妊娠7.5天，次黃嘌呤用量為600mg/kg小鼠/d，氧嗪酸鉀鹽用量為600mg/kg小鼠/d，連續(xù)灌胃至妊娠16.5天。

7、更進(jìn)一步地，步驟(2)次黃嘌呤的濃度為24mg/ml，氧嗪酸鉀鹽的濃度為24mg/ml。

8、進(jìn)一步地，步驟(1)所述雌性小鼠為6-10周的雌性小鼠，所述雄性小鼠為6-10周的雄性小鼠。

9、本發(fā)明第二方面提供了一種子癇前期小鼠模型的構(gòu)建方法，包括如下步驟：

10、(1)將雌性小鼠與雄性小鼠合籠，次日檢栓，見(jiàn)栓確定該雌性小鼠懷孕，并定為妊娠0.5天；

11、(2)于孕中期開(kāi)始對(duì)孕鼠進(jìn)行經(jīng)口灌胃次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽一段時(shí)間，得到所述子癇前期小鼠模型。

12、進(jìn)一步地，步驟(2)孕中期為妊娠7.5天，次黃嘌呤用量為600mg/kg小鼠/d，氧嗪酸鉀鹽用量為600mg/kg小鼠/d，連續(xù)灌胃至妊娠16.5天。

13、更進(jìn)一步地，步驟(2)次黃嘌呤的濃度為24mg/ml，氧嗪酸鉀鹽的濃度為24mg/ml。

14、進(jìn)一步地，步驟(1)所述雌性小鼠為6-10周的雌性小鼠，所述雄性小鼠為6-10周的雄性小鼠。

15、本發(fā)明第三方面提供了上述子癇前期小鼠模型在研究子癇前期發(fā)病機(jī)制中的應(yīng)用。

16、本發(fā)明第四方面提供了上述子癇前期小鼠模型在防治子癇前期藥物篩選和藥效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用。

17、本發(fā)明的有益效果：

18、本發(fā)明提供了一種新型的子癇前期造模方式，通過(guò)次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽聯(lián)用，并控制次黃嘌呤+氧嗪酸鉀鹽的給藥劑量和給藥方式，以使模型小鼠血清尿酸水平穩(wěn)定升高，模型小鼠出現(xiàn)子癇前期改變，模型的穩(wěn)定性、特異性和病理生理學(xué)特征與人類子癇前期相似得以確保，從而成功構(gòu)建尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型。本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型具有以下優(yōu)勢(shì)：

19、1、模擬人類子癇前期病理特征：本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型不僅具有妊娠期特有的高血壓、蛋白尿、胎兒生長(zhǎng)受限等不良妊娠結(jié)局的子癇前期臨床表現(xiàn)，還能模擬子癇前期中胎盤功能障礙、胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)程度下降的表型。本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型相較于其他子癇前期模型，能夠全面的模擬子癇前期的臨床特征，可用于子癇前期相關(guān)研究。

20、2、操作簡(jiǎn)便、成本低：本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型的構(gòu)建中次黃嘌呤+氧嗪酸鉀鹽的給藥方式為經(jīng)口灌胃，構(gòu)建方法操作簡(jiǎn)便、成本低，易于重復(fù)實(shí)驗(yàn)和大規(guī)模應(yīng)用。

21、3、提供了穩(wěn)定的模型：次黃嘌呤在生物體內(nèi)是嘌呤代謝的產(chǎn)物，會(huì)在黃嘌呤氧化酶的作用下轉(zhuǎn)換為尿酸。氧嗪酸鉀鹽是一種常用的尿酸酶抑制劑，通過(guò)抑制尿酸酶的活性來(lái)阻斷尿酸的降解，從而導(dǎo)致血清尿酸水平升高。本發(fā)明通過(guò)兩者聯(lián)用，增加尿酸生成的同時(shí)減少尿酸的排泄，從而營(yíng)造體內(nèi)高尿酸水平，此類多重因素影響下的造模方式，比單一給藥造模方式更穩(wěn)定，尿酸水平升高更顯著。

22、4、更好的理解子癇前期的發(fā)病機(jī)制：本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型在探究子癇前期的發(fā)生發(fā)展機(jī)制方面具有重要價(jià)值，特別是在針對(duì)高尿酸水平相關(guān)的子癇前期研究中，其優(yōu)勢(shì)尤為顯著。

23、綜上，本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型為研究子癇前期的發(fā)病機(jī)制、評(píng)估新的治療方法以及理解血清高尿酸在子癇前期中的作用提供了一個(gè)有價(jià)值的工具。

技術(shù)特征：

1.一種子癇前期小鼠模型，其特征在于，所述子癇前期小鼠模型通過(guò)如下方法構(gòu)建得到：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種子癇前期小鼠模型，其特征在于，步驟(2)孕中期為妊娠7.5天，次黃嘌呤用量為600mg/kg小鼠/d，氧嗪酸鉀鹽用量為600mg/kg小鼠/d，連續(xù)灌胃至妊娠16.5天。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種子癇前期小鼠模型，其特征在于，步驟(2)次黃嘌呤的濃度為24mg/ml，氧嗪酸鉀鹽的濃度為24mg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種子癇前期小鼠模型，其特征在于，步驟(1)所述雌性小鼠為6-10周的雌性小鼠，所述雄性小鼠為6-10周的雄性小鼠。

5.一種子癇前期小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括如下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種子癇前期小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)孕中期為妊娠7.5天，次黃嘌呤用量為600mg/kg小鼠/d，氧嗪酸鉀鹽用量為600mg/kg小鼠/d，連續(xù)灌胃至妊娠16.5天。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種子癇前期小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)次黃嘌呤的濃度為24mg/ml，氧嗪酸鉀鹽的濃度為24mg/ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求5或6或7所述的一種子癇前期小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(1)所述雌性小鼠為6-10周的雌性小鼠，所述雄性小鼠為6-10周的雄性小鼠。

9.權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的子癇前期小鼠模型在研究子癇前期發(fā)病機(jī)制中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的子癇前期小鼠模型在防治子癇前期藥物篩選和藥效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)一種子癇前期小鼠模型，其通過(guò)如下方法構(gòu)建得到：(1)將雌性小鼠與雄性小鼠合籠；(2)于孕中期開(kāi)始對(duì)孕鼠進(jìn)行經(jīng)口灌胃次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽一段時(shí)間。本發(fā)明還公開(kāi)其構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種新型的子癇前期造模方式，通過(guò)次黃嘌呤和氧嗪酸鉀鹽聯(lián)用，并控制次黃嘌呤+氧嗪酸鉀鹽的給藥劑量和給藥方式，以使模型小鼠血清尿酸水平穩(wěn)定升高，模型小鼠出現(xiàn)子癇前期改變，模型的穩(wěn)定性、特異性和病理生理學(xué)特征與人類子癇前期相似得以確保，從而成功構(gòu)建尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型。本發(fā)明尿酸誘導(dǎo)的子癇前期小鼠模型為研究子癇前期的發(fā)病機(jī)制、評(píng)估新的治療方法以及理解血清高尿酸在子癇前期中的作用提供了一個(gè)有價(jià)值的工具。

技術(shù)研發(fā)人員：岳朝艷,龐雅靜,仇帥,張新艷,李瓊
受保護(hù)的技術(shù)使用者：復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15