一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提高藏紅花素含量的藏紅花培 養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002] 藏紅花是一種名貴的中草藥，由于其只是柱頭入藥，產(chǎn)量極低，同時(shí)又因?yàn)槠滟Y源 極其有限，但用途廣泛，致使其價(jià)格昂貴，一直被譽(yù)為"植物黃金"，所以對(duì)藏紅花的快速繁 殖研究極其重要。
[0003] 藏紅花的主要活性成分是藏紅花素，但是活體藏紅花植株僅能在柱頭中提煉到少 量藏紅花素，難以滿足市場(chǎng)的需求，為此需要提供一種可以從藏紅花愈傷組織中提取藏紅 花素的技術(shù)，然而目前的組織培養(yǎng)技術(shù)中愈傷組織中藏紅花素含量極低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 基于現(xiàn)有技術(shù)存在上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng) 基，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙 酸）、硝酸鑭和蔗糖，本發(fā)明提供是培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，并添加了稀土元素，利用稀土元素 對(duì)植物的調(diào)節(jié)特性，提高了藏紅花愈傷組織中的藏紅花含量。
[0005] -種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有 6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖。
[0006] 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.5-211^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為 0.5-4mg/L、硝酸鑭的濃度為200-500mg/L、瓊脂粉的濃度為8-12g/L、蔗糖的濃度為40-80g/ L〇
[0007] 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.75-1.25mg/L、2,4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）的濃度 為l-3mg/L、硝酸鑭的濃度為350-450mg/L、瓊脂粉的濃度為9-llg/L、蔗糖的濃度為50-70g/ L〇
[0008] 所述的硝酸鑭還可以是氯化鑭和氧化鑭。
[0009] 所述的快速誘導(dǎo)人參愈傷組織培養(yǎng)基的pH值為5.5-6.5。
[0010] 所述的快速誘導(dǎo)人參愈傷組織培養(yǎng)基的pH值為6.0。
[0011] 本發(fā)明的有益效果是:將一般組織培養(yǎng)使用的固體培養(yǎng)基改為液體培養(yǎng)基，液體 環(huán)境更適合合成藏紅花素;在培養(yǎng)基中添加了稀土元素鑭，鑭可以調(diào)節(jié)藏紅花的生理狀態(tài)， 提高藏紅花愈傷組織的酶的活性，促進(jìn)藏紅花素的合成，提高藏紅花素的含量。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
[0013] 實(shí)施例一:配制提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基。
[0014]根據(jù)表1所示的MS培養(yǎng)基成分和用量以及表2所示的提高藏紅花素含量的藏紅花 培養(yǎng)基成分和用量，配制本發(fā)明所述的提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基。
[0015] 用天平稱取MS培養(yǎng)基中的各成分以及6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2,4-D(2,4-二氯苯氧 乙酸）、硝酸鑭和蔗糖，置于三角瓶中，加入適量蒸餾水，攪拌溶解，并用HCL和Κ0Η調(diào)節(jié)pH值 至6.0,定容至1000mL。將三角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121°C滅菌20min，然后置于超 凈工作臺(tái)中自然冷卻，備用。
[0016] 將冷卻到50_60°C時(shí)將培養(yǎng)基分裝至組織培養(yǎng)瓶中，晾涼，將組織培養(yǎng)瓶封口，備 用。
[0017]表1 MS培養(yǎng)基的成分和用量。
[0018]表2提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基成分及用量
實(shí)施例二:提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基的測(cè)試。
[0019] 按實(shí)施例一所述的方法配制提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，備用。
[0020] 在超凈工作臺(tái)中，從增值培養(yǎng)基中取出生長(zhǎng)正常健康、無(wú)褐化、無(wú)玻璃化的藏紅花 愈傷組織，并將藏紅花愈傷組織用無(wú)菌手術(shù)刀〇. 5-1厘米的小塊，并接種于配制好的提高藏 紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基中，接種生物量為6g\L，并放于人工氣候箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán) 境條件是，光照/黑暗時(shí)間：14/10小時(shí)，培養(yǎng)溫度是23°C。
[0021 ]培養(yǎng)到30天的后取出愈傷組織，并提取愈傷組織中的藏紅花素的含量，達(dá)到1.02 g\L，比對(duì)照組的愈傷組織含量0.72 g\L提高了0.3 g\L，提高了超過(guò)了 30%，使用本發(fā)明的 提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基可以提高藏紅花愈傷組織中的藏紅花素含量。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征在于，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 并添加有6-BA(6-芐基腺嘌呤）、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征在于，6-BA (6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.5-21^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為0.5-411^/1、硝酸 鑭的濃度為200_500mg/L、瓊脂粉的濃度為8-12g/L、蔗糖的濃度為40-80g/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征在于，6-BA (6-芐基腺嘌呤）的濃度為0.75-1.251^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為1-311^/1、硝 酸鑭的濃度為350-450mg/L、瓊脂粉的濃度為9-llg/L、蔗糖的濃度為50-70g/L。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征 在于，所述的硝酸鑭還可以是氯化鑭和氧化鑭。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征 在于，所述的快速誘導(dǎo)人參愈傷組織培養(yǎng)基的pH值為5.5-6.5。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，其特征 在于，所述的快速誘導(dǎo)人參愈傷組織培養(yǎng)基的pH值為6.0。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種提高藏紅花素含量的藏紅花培養(yǎng)基，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，其以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有6-BA（6-芐基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、硝酸鑭和蔗糖，本發(fā)明提供是培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，并添加了稀土元素，利用稀土元素對(duì)植物的調(diào)節(jié)特性，提高了藏紅花愈傷組織中的藏紅花含量。
【IPC分類】A01H4/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105532461
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610010908
【發(fā)明人】何志鏗
【申請(qǐng)人】佛山市金藍(lán)領(lǐng)教育科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2016年1月9日