專利名稱：一種檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于檢測(cè)試劑盒領(lǐng)域，尤其是一種檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒。
背景技術(shù)：
鉀是人體所必需的微量元素，約占人體重的0. 2%。鉀元素在維持人體正常生理功能上起非常重要的作用。鉀是調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡的重要元素；也是維持人體神經(jīng)系統(tǒng)功能必不可少的元素；鉀離子通過進(jìn)出鉀離子通道，對(duì)細(xì)胞膜的電位平衡，神經(jīng)信號(hào)的傳導(dǎo)和肌肉控制，起到很重要的作用。作為氫離子的取代，鉀離子在細(xì)胞內(nèi)外的酸堿平衡中也起到關(guān)鍵的作用。另外，鉀離子參與了人體內(nèi)重要的生物化學(xué)過程，例如三磷酸腺苷 (ATP)的合成，糖原的合成，某些鹽皮質(zhì)激素如醛固酮的分泌等。鉀離子還能通過對(duì)端粒 (telomere)結(jié)構(gòu)的調(diào)控從而對(duì)細(xì)胞凋亡和癌癥形成產(chǎn)生重大影響。人體內(nèi)的鉀元素以離子形式存在；絕大部分鉀離子存在于細(xì)胞液和血液中。在血液中鉀的正常濃度范圍在3. 5至5mEq/L ；而在細(xì)胞液中鉀的濃度約為140mEq/L。如果血液中的鉀離子濃度(血鉀)低于正常范圍，就會(huì)產(chǎn)生一系列諸如腹瀉、嘔吐、肌肉無力及其心律失常等癥狀，長(zhǎng)期以往則會(huì)對(duì)腎功能產(chǎn)生極大損害。如果血鉀高于正常范圍，則有疲勞、 心律不齊和房顫等癥狀。血鉀水平異常的癥狀沒有特異性，所以臨床診斷血鉀異常必須測(cè)定血鉀水平。目前血鉀的測(cè)量屬于常規(guī)檢測(cè)，檢測(cè)手段主要有原子吸收法、離子選擇電極法、酶法、熒光比色法等。檢測(cè)方法的比較見表1。表1現(xiàn)有血鉀檢測(cè)方法的比較
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑，其特征在于包括核酸分子、血紅素和魯米諾試劑，所述核酸分子為可形成四鏈體結(jié)構(gòu)的富于鳥苷的寡核苷酸，序列公式為 R-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-R ‘，其中 m、η 為整數(shù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑，其特征在于所述核酸分子和血紅素以及魯米諾試劑的摩爾比是1 10 1000。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑，其特征在于所述核酸分子如下
4.一種如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑的制備方法，其特征在于 包括如下步驟(1)將聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶膠、核酸分子、血紅素、魯米諾試劑混合均勻后成溶膠狀態(tài)；(2)將步驟(1)的混合物被紫外照射，苯基乙烯吡啶產(chǎn)生交聯(lián)，使混合物固化，核酸分子、血紅素、魯米諾試劑被物理固定在凝膠中，形成檢測(cè)層；所述聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶膠、核酸分子、血紅素、魯米諾試劑的摩爾比是 1 10 1000。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑的制備方法，其特征在于在檢測(cè)層的下層還有制有水凝膠支持層，成分是聚乙二醇和聚酰胺酯的線性聚合物，在檢測(cè)層的上層制有炭黑保護(hù)層。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑的制備方法，其特征在于具體的制備步驟如下(1)在50mM的HEPES緩沖溶液pH7. 0中溶解核酸分子以及血紅素，將溶液用水浴加熱至80°C并在常溫下冷卻至室溫以使核酸的分子結(jié)構(gòu)均一化，在溶液中加入魯米諾試劑；(2)在塑料薄膜上，用刮刀涂膜機(jī)涂上一層D4水凝膠的薄膜并使之自然風(fēng)干，厚度為 90-110ym ；(3)在10wt%PVA-Sbq溶液中加入步驟(1)制備的溶液并攪拌均勻，(4)在步驟O)的D4水凝膠的薄膜上涂上一層步驟C3)獲得溶液，將紫外燈置于膜層的上方25-35分鐘，使苯基吡啶乙烯交聯(lián)并使膜層變干；(5)最后最上層用刮刀涂膜機(jī)涂上一層含有10wt%炭黑的D6水凝膠并使膜層自然風(fēng)干。
7. 一種含有如權(quán)利要求1所述檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑的試劑盒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)血液中鉀離子含量的試劑及制備方法及含有該試劑的試劑盒，包括核酸分子、血紅素和魯米諾試劑，所述核酸分子為可形成四鏈體結(jié)構(gòu)的富于鳥苷的寡核苷酸，序列公式為R-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-R′，步驟為(1)將聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶膠、核酸分子、血紅素、魯米諾試劑混合均勻后成溶膠狀態(tài)；(2)將步驟(1)的混合物被紫外照射，苯基乙烯吡啶產(chǎn)生交聯(lián)，使混合物固化，核酸分子、血紅素、魯米諾試劑被物理固定在凝膠中，形成檢測(cè)層。本申請(qǐng)所發(fā)明的方法將集成各現(xiàn)有血鉀檢測(cè)方法的優(yōu)點(diǎn)，具有高靈敏度和高選擇性以及操作簡(jiǎn)單、使用方便和價(jià)格低廉的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12Q1/34GK102417925SQ20111026329
公開日2012年4月18日 申請(qǐng)日期2011年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月7日
發(fā)明者徐維琛, 朱進(jìn)清, 程志敬, 高玉蘭 申請(qǐng)人:天津希恩思生化科技有限公司