本發(fā)明屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新的防治刺參腐皮綜合征及其它細菌性疾病的特異性卵黃飼料添加劑及制備方法。

背景技術(shù)：

刺參(Apostichopus japonicas)又稱仿刺參，屬于棘皮動物門(Echinodermate)、海參綱(Holothrioider)，刺參科(Stichopodidae)，仿刺參屬(Apostichopus)。在我國主要產(chǎn)于遼寧省、山東省等北方沿海。因其較高的營養(yǎng)價值和藥用價值，目前已成為北方地區(qū)最重要的名貴養(yǎng)殖品種之一，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，刺參病害問題日趨嚴重，目前常見的疾病主要包括腐皮綜合征、口圍腫脹癥、爛邊癥、爛胃病和化板癥等。其中腐皮綜合征已成為刺參養(yǎng)殖業(yè)最常見也是危害最嚴重的疾病，嚴重制約著刺參養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

目前刺參養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素和化學藥物情況普遍，抗生素和化學藥物反復使用容易產(chǎn)生耐藥性，存在藥物殘留，在倡導綠色農(nóng)業(yè)的今天必將退出歷史舞臺。卵黃抗體具有無毒、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點，發(fā)展前景備受矚目。此外卵黃抗體產(chǎn)出率高，并具有耐熱、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，已經(jīng)被廣泛地制成產(chǎn)品來進行動物疾病的預防和治療。

當前卵黃抗體產(chǎn)品大都為卵黃粉和全蛋粉，但是傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝中中需經(jīng)過冷凍干燥或噴霧干燥，成本較高?；谝陨峡紤]我們嘗試選擇以冰凍脹剝技術(shù)處理后的稻殼粉作為高效載體包裹卵黃制備飼料添加劑，省去卵黃經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥脫水這一過程，僅需置于室溫陰涼處干燥3-5天即可得到成品，使生產(chǎn)工藝大為簡化，成本大為降低。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

稻殼粉具有獨特的物理構(gòu)造，其橫截面為板層結(jié)構(gòu)，具有較大的比表面積。本發(fā)明利用稻殼粉這一結(jié)構(gòu)特點，采用冰凍脹剝技術(shù)，在稻殼粉中加入蒸餾水直接冰凍，板層間隙吸水后冰凍形成冰晶，體積增大使其結(jié)構(gòu)出現(xiàn)裂縫，多次凍融后，致使裂縫不斷向?qū)挾群蜕疃确较蜓诱共⑿纬筛罅芽p，最終使板層結(jié)構(gòu)解體，比表面積進一步增大，吸附性進一步增強。又由于稻殼粉主要成分為纖維素，對刺參無毒副作用，輔以刺參病原菌相應卵黃抗體，使卵黃抗體在刺參健康養(yǎng)殖和快速增產(chǎn)方面發(fā)揮獨特作用。

本發(fā)明又從卵黃抗體制備工藝簡化的目的出發(fā)，改變了制備卵黃抗體產(chǎn)品的傳統(tǒng)方法，不再使用冷凍干燥或噴霧干燥技術(shù)，而是直接將高吸附性稻殼粉包裹蛋黃液進行加工，自然晾干后粉碎，制成刺參飼料添加劑。這樣不但減少了凍干過程中對卵黃抗體的損失，而且還簡化了生產(chǎn)工藝，同時雞蛋里其它的營養(yǎng)成分也得到了很有效的利用，很大程度上的降低了產(chǎn)品的成本。

本發(fā)明的技術(shù)方案由載體和特異性卵黃液組成。載體為經(jīng)冰凍脹剝技術(shù)處理后獲得的高吸附性稻殼粉，特異性卵黃液由刺參細菌性疾病相應病原菌免疫蛋雞獲得。高吸附性稻殼粉與特異性卵黃液的質(zhì)量比為3/7-3/2。

該刺參用特異性卵黃添加劑中不同組分質(zhì)量百分比如下：含特異性卵黃抗體的卵黃液40％-70％，高吸附性稻殼粉30％-60％，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100％，所采用的特異性卵黃液不含有卵清液。優(yōu)選方式下，組分中還包括山梨酸鉀，山梨酸鉀加入量為上述兩種組分質(zhì)量和的0.05％-0.1％。

刺參專用特異性卵黃液添加劑的低成本制備方法為：

(1)將30-60目干燥稻殼粉放入超微粉碎機中粉碎10-15min，粉碎后過200目篩網(wǎng)；

(2)在步驟(1)粉碎后得到的稻殼粉中添加2-3倍質(zhì)量蒸餾水，并于-20℃冰凍1-2天，冰凍后再于室溫解凍；

(3)重復步驟(2)1-3次，將所得稻殼粉均勻平鋪并置于室溫干燥3-5天，即得高吸附性稻殼粉；

(4)將高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(5)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(6)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(7)將混合均勻的蛋黃液與高吸附性稻殼粉混合物置于飼料顆粒機中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(8)將陰干后的顆粒置于粉碎機中二次粉碎，粉碎的顆粒過60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

本發(fā)明的刺參飼料添加劑的使用方法為：刺參飼料添加劑與飼料的質(zhì)量比為(1-5)％∶(95-99)％，將添加劑加到飼料中混合均勻，往育苗池中施用。

本發(fā)明具有如下優(yōu)點：(1)稻殼粉來源廣泛，價格低廉；(2)特異性卵黃液中的特異性IgY可以防止刺參相應細菌性疾病；(3)特異性卵黃中的其他營養(yǎng)成分可有效促進刺參生長，并明顯增強海刺參的機體免疫力和抗病力；(4)減少抗生素和化學藥物使用量；(5)安全無毒，使用方便；(6)天然的稻殼粉載體解決了以往卵黃抗體生產(chǎn)提純過程中需要大量消耗能源的難題,極大的降低了成本。

表1 各種方法生產(chǎn)IgY制劑綜合比較

從表1可以看出，在不考慮人工成本及設(shè)備折舊等因素的情況下，本方法前期投入的設(shè)備成本最低，單位能耗降到了原來的1/5甚至更多，節(jié)能效果顯著，而且生產(chǎn)過程簡單，生產(chǎn)方式靈活，制約因素較少，具有很大的商業(yè)價值。

附圖說明

圖1為普通稻殼粉橫截面；

圖2為冰凍脹剝技術(shù)處理后稻殼粉橫截面；

圖3為刺參專用特異性卵黃液添加劑中IgY含量測定圖。

具體實施方式

以下結(jié)合技術(shù)方案詳細敘述本發(fā)明的實施例

實施例1

刺參專用抗黃海希瓦氏菌特異性卵黃液添加劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將抗黃海希瓦氏菌高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(2)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(3)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(4)將混合均勻的蛋黃液與稻殼粉混合物置于飼料顆粒機中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)將陰干后的顆粒置于粉碎機中二次粉碎，粉碎的顆粒過60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

實施例2

刺參專用抗燦爛弧菌特異性卵黃液添加劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將抗燦爛弧菌高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(2)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(3)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(4)將混合均勻的蛋黃液與稻殼粉混合物置于飼料顆粒機中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)將陰干后的顆粒置于粉碎機中二次粉碎，粉碎的顆粒過60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

實施例3

刺參專用特異性卵黃液添加劑中IgY含量測定

將標準IgY包被液倍比稀釋成一定梯度(1-0.015625ug/ml),將特異性添加劑樣品也稀釋成一定梯度,每孔加100ul包被96孔酶標板,4℃過夜。用洗滌液洗滌酶標板3次,每孔加100ul封閉液,37℃溫育后甩干、洗滌3次,再向各孔加兔抗雞IgG-HRP 100ul,37℃反應1h；洗滌液洗滌各孔5次,每孔加100ulTMB底物溶液,室溫下顯色20min,每孔加50ul終止液終止反應,用酶標儀測OD_450/630。以標準IgY的OD值對IgY濃度作標準曲線,從標準曲線中查得待測樣品的濃度。