專利名稱：：T-2毒素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及T-2毒素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：目前，關(guān)于腫瘤的研究已取得較大進展，.己發(fā)展了多種治療腫瘤的各種放療、化療等方法，但各種藥物及療法均存在局限性，很難達到根治的效果，且易出現(xiàn)耐藥性和副作用。腫瘤死亡率仍居于各種疾病之首。據(jù)數(shù)據(jù)顯示，2006年我國有300萬人死于癌癥，而且腫瘤發(fā)病率仍處于上升趨勢，并有年輕化趨勢。據(jù)資料統(tǒng)計在不到20年的時間里，我國腫瘤發(fā)病率上升了69%，死亡率上升了29.4%。因此，研究新的有效的腫瘤治療藥物仍是目前腫瘤治療的主要方向。T-2毒素，分子量為466.122，分子式為C24H3409，結(jié)構(gòu)式為4P，15-二乙酰氧基-8a-(3-甲氧基酰氧基)-3a-羥基-12，13-環(huán)氧單端孢霉-9-烯，其中的氧環(huán)和雙鍵是其活性部位，氧環(huán)打開或雙鍵還原均可使其毒性下降。T-2毒素為白色針狀結(jié)晶，熔點為151°C-152'C，難溶于水，易溶于極性有機溶劑，它在室溫條件下相當穩(wěn)定，放置6-7年或加熱至100-12(TC1小時毒性不減。T-2毒素帶有酯基，用堿處理后水解成相應(yīng)的醇。T-2毒素是鐮刀菌所產(chǎn)生的單端胞霉烯族毒素中毒性最強的一種，主要作用于細胞分裂旺盛的組織器官，如胸腺、骨髓、肝、脾、淋巴結(jié)、生殖腺及胃腸粘膜等，抑制這些器官細胞蛋白質(zhì)和DNA合成。此外，還發(fā)現(xiàn)該毒素可引起淋巴細胞中DNA單鏈的斷裂。T-2毒素還可作用于氧化磷酸化的多個部位而引起線粒體呼吸抑制。而腫瘤組織即具有細胞過度分裂的特點，因此，對腫瘤組織存在廣泛的毒性作用。目前對T-2毒素的研究主要集中于其對動物的毒性研究和致病性研究，對T-2毒素用于抗腫瘤的研究尚未發(fā)現(xiàn)有報道。
發(fā)明內(nèi)容針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了T-2毒素的一種新用途。本發(fā)明實質(zhì)上是T-2毒素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述T-2毒素的有效治療量為0.120mg/Kg體重。使用時，將T-2毒素制成口服制劑，口服給藥，口服制劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.5mg/kg。還可以將T-2毒素制成植入劑，通過植入給藥，植入劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。還可以將T-2毒素制成靜脈注射劑，靜脈注射給藥，靜脈注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。還可以將T-2毒素制成皮下注射劑，皮下注射給藥，皮下注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。還可以將T-2毒素制成肌肉注射劑，肌肉注射給藥，肌肉注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。本發(fā)明通過給腫瘤模型動物植入給藥、口服給藥、靜脈注射給藥、皮下注射給藥、肌肉注射給藥，觀察了其抗腫瘤效果，確定了T-2毒素的有效性及劑量，可以達到T-2毒素的安全性和有效性要求。試驗證明，T-2毒素可用于腫瘤治療。'具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明實施例l:T-2毒素植入給藥的抗腫瘤作用研究1.1小鼠S，瘤細胞懸液制備選取接種Sw。實體瘤7-8d后生長良好的小鼠，急性處死；抽取腹水瘤細胞，用生理鹽水洗滌離心2次，換用RPMI-1640培養(yǎng)液再洗1次；將腫瘤細胞懸液放人含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中，稀釋成1X104mr'X107mr單細胞懸液，臺盼藍染色檢査活細胞數(shù)，成活率95%以上即可接種。1.2腫瘤接種昆明小鼠40只，每只于左前肢腋窩皮下接種0.2mlS咖瘤細胞懸液，整個操作過程30rain內(nèi)完成;24h后隨機分為4組，每組10只，雌雄各半，分籠喂養(yǎng)。1.3樣品制備取10mg_20mg分子量15000-25000的聚乳酸，加一定量的有機溶劑溶解。加入T-2毒素搖勻，真空干燥除去有機溶劑，將干燥后的固體物立即成型，制成T-2毒素植入劑，射線滅菌?？瞻讓φ账幬飪H使用10mg分子量15000-25000的聚乳酸制備。1.4藥物治療'實驗組，瘤內(nèi)注射植入T-2毒素植入劑；對照組，瘤內(nèi)注射植入空白藥物，每天稱體重，觀察小鼠生長情況.小鼠停藥48h后斷頸處死，剝?nèi)×鰤K稱量，并按下列公式計算抑瘤率抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重X100%。統(tǒng)計學處理計數(shù)資料采用非配對t檢驗，結(jié)果見表l。表1T-2毒素植入對小鼠移植瘤S18。生長的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>★*P<0.01由實驗結(jié)果可見，T-2毒素植入給藥劑量為1.5mg/kg、2.5mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例2:T-2毒素靜脈注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S咖瘤細胞懸液制備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶于10%乙醇生理鹽水，對照組尾靜脈注射0.9%生理鹽水0.2ml，實驗組尾靜脈注射T-2毒素劑量為1.5mg/kg、2.5mg/kg。停藥24h后斷頸處死，剝?nèi)×鰤K稱量，并按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重X100L統(tǒng)計學處理計數(shù)資料采用非配對t檢驗，結(jié)果見表2。<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由實驗結(jié)果可見，T-2毒素靜脈注射給藥劑量1.5mg/kg、2.5mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例3:T-2毒素經(jīng)口給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S自瘤細胞懸液制備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶于10%乙醇生理鹽水，對照組灌胃0.9%生理鹽水2ml，實驗組灌胃T-2毒素，劑量分別為1.5mg/kg、2.0呢/kg。停藥48h后斷頸處死，剝?nèi)×鰤K稱量，并按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重乂10()%。統(tǒng)計學處理計數(shù)資料采用非配對t檢驗，結(jié)果見表3。表3T-2毒素經(jīng)口給藥對小鼠移植瘤S18。生長的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*好<0.01由實驗結(jié)果可見，T-2毒素經(jīng)口給藥劑量為即1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例4:T-2毒素皮下注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S⑧瘤細胞懸液制備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶于10%乙醇生理鹽水，對照組灌胃O.將生理鹽水2ml，實驗組分別灌胃T-2毒素L5mg/kg、2.0mg/kg。停藥48h后斷頸處死，剝?nèi)×鰤K稱量，并按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重〉/對照組平均瘤重X10(m。統(tǒng)計學處理計數(shù)資料采用非配對t檢驗，結(jié)果見表4。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由實驗結(jié)果可見，T-2毒素皮下注射給藥劑量為1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例5:T-2毒素肌肉注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S則瘤細胞懸液制備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶于10%乙醇生理鹽水，對照組肌肉注射0.9%生理鹽水0.lml'實驗組分別肌肉注射T-2毒素1.5mg/kg、2.0mgAg。停藥48h后斷頸處死，剝?nèi)×鰤K稱量，并按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重xiocm。統(tǒng)計學處理計數(shù)資料采用非配對t檢驗，結(jié)果見表5。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由實驗結(jié)果可見，T-2毒素肌肉注射給藥劑量為1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。，權(quán)利要求1.T-2毒素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述T-2毒素的有效治療量為0.120mg/Kg體重。3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于是將T-2毒素制成口服制劑，口服制劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.5mg/kg。4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于是將T-2毒素制成植入劑，植入劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于是將T-2毒素制成靜脈注射劑，靜脈注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。6.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于是將T-2毒素制成皮下注射劑，皮下注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。7.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于是將T-2毒素制成肌肉注射劑，肌肉注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0tng/kg。全文摘要本發(fā)明公開了T-2毒素的一種新用途，即T-2毒素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其有效治療量為0.1～20mg/Kg體重，使用時，可以制成口服制劑、植入劑、注射劑等。本發(fā)明通過給腫瘤模型動物植入給藥、口服給藥、靜脈注射給藥、皮下注射給藥、肌肉注射給藥，觀察了其抗腫瘤效果，確定了T-2毒素的有效性及劑量，可以達到T-2毒素的安全性和有效性要求。試驗證明，T-2毒素可用于腫瘤治療。文檔編號A61K31/35GK101491517SQ20091001462公開日2009年7月29日申請日期2009年3月3日優(yōu)先權(quán)日2009年3月3日發(fā)明者厲保秋申請人:山東大學