專利名稱：治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，特別是含有羅格列酮 或吡格列酮或它們藥學(xué)上可接受的鹽與(3aS，5s,6aR) _5_ (2- ((2S，4S) -2-氰基-4-氟-吡 咯烷-1-基)_2_氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (1H)-氨甲酰或其藥學(xué) 上可接受的鹽的固定劑量組合的藥物組合物，制備所述藥物組合物的方法和所述藥物組合 物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的用途。
背景技術(shù)：
人2型糖尿病是由涉及胰島素抵抗和消弱胰島素分泌的雙重內(nèi)分泌缺陷的復(fù)雜 病理生理學(xué)導(dǎo)致的慢性和漸進(jìn)性疾病。人2型糖尿病的治療一般從飲食和鍛煉開始，隨后 進(jìn)行口服抗糖尿病藥物單一療法。對(duì)于許多患者，這一方案并不能在長(zhǎng)期治療期間充分控 制血糖，這就導(dǎo)致在診斷之后的數(shù)年內(nèi)需要進(jìn)行聯(lián)合療法。然而兩種或者更多種口服抗糖 尿病藥物的共_處方對(duì)于使用的許多患者而言會(huì)導(dǎo)致復(fù)雜和困難的治療方案。將兩種或者 更多種抗糖尿病試劑合并成單個(gè)制劑提供了不會(huì)增加患者每日治療制度復(fù)雜性的遞送聯(lián) 合療法的可能方式。二肽基肽酶-IV(DPP-IV)抑制劑表示一類開發(fā)用于治療或者改進(jìn)患有2型糖 尿病患者中的血糖生成控制的新試劑。在當(dāng)前臨床試驗(yàn)中用于治療人2型糖尿病的 藥物有 MK-0431、維達(dá)列汀(LAF-237)、saxagliptin (BMS-47718)、P93/01 (Pro si don)、 SYR322(Takeda)、 GSK823093、 Roche0730699、 TS021(Taisho)、 E3024(Eisai)禾口 PHX-1149 (Phenomix)。比如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，將維達(dá)列汀口服給藥至人類2型糖尿病患者可以 降低與顯著降低的HbAIC水平相關(guān)的空腹葡糖和飯后葡糖偏差。關(guān)于應(yīng)用DDP-IV治療2 型糖尿病的綜述可以參見(jiàn)以下公開物(1)H. -U. Demuth等人，“Type 2diabetes-Theraphy with dipeptidylpeptidase IV inhibitors，，，Biochim. Biophvs. Acta. 1751 :33_44 (2005) 禾口(2)K. Augustyns 等人，“Inhibitors of proline-specific dipeptidylpeptidases DPP4 inhibitors as a novel approach for the treatment of Type 2diabetesExpert Opin. Ther. Patants, 15 :1387-1407(2005)。目前一些 DPP-IV 抑制劑已被公開(US5462928、US5543396、W09515309、 W02003004498、W02003082817、W02004032836、W02004085661)，其中 Novartis 公司生成的 DPP-IV抑制劑HAF-237顯示了良好的DPP-IV抑制活性及選擇性，并已于2007年上市。
為了將PPAR抗糖尿病劑，特別是格列酮施用于成年糖尿病患者(體重50kg)，例如，每日劑量通常為0. 01到lOOOmg，優(yōu)選0. 1到500mg。該劑量每天施用一次到幾次。特 別地，當(dāng)鹽酸吡格列酮用作胰島素致敏劑時(shí)，每天鹽酸吡格列酮的劑量通常是7. 5到60mg， 優(yōu)選15到45mg。當(dāng)羅格列酮(或者馬來(lái)酸鹽)用作胰島素致敏劑時(shí)，每天羅格列酮的劑量 通常是1到12mg，優(yōu)選2到12mg。格列酮優(yōu)選為吡格列酮、鹽酸吡格列酮或者羅格列酮(或者其馬來(lái)酸鹽)，特別優(yōu) 選鹽酸吡格列酮。本領(lǐng)域中已經(jīng)提出抗糖尿病藥和噻唑烷二酮衍生物的組合的藥物劑型。例如， EP00749751教導(dǎo)了包含胰島素敏感性增強(qiáng)劑(其是噻唑烷二酮化合物)與其他抗糖尿病 劑組合的藥物組合物。更特別地，EP00749751教導(dǎo)優(yōu)選的胰島素敏感性增強(qiáng)劑是吡格列 酮，其可以與其他抗糖尿病劑如羅格列酮、苯乙雙胍或者丁雙胍組合，并且這些藥物可以結(jié) 合(混合和/或包衣)常規(guī)賦形劑以提供味道掩蔽或者持續(xù)釋放?？固悄虿∷幒袜邕蛲槎?酮衍生物的組合的另一實(shí)例是美國(guó)專利號(hào)6，011，049，該專利教導(dǎo)了緩釋形式，如滲透泵或 者皮膚貼劑形式的含有吡格列酮或者曲格列酮和羅格列酮或吡格列酮的單一藥物組合物。 抗糖尿病藥和噻唑烷二酮衍生物的其他組合可以見(jiàn)美國(guó)專利號(hào)6，524,621 ；6，475，521 ； 6，451，342和6，153，632和PCT專利申請(qǐng)W001/3594，將它們引入本文作為參考。

發(fā)明內(nèi)容
具有以下結(jié)構(gòu)式的(3aS，5s，6aR)-5-(2-((2S，4S)_2-氰基_4_氟-吡咯 烷-1-基)-2_氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (1H)-氨甲酰是化合物A。 化合物A化合物A或其鹽對(duì)DPP-IV活性抑制時(shí)間比LAF-237長(zhǎng)，抑制強(qiáng)度比LAF-237大。 通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究，本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)化合物A或其鹽和羅格列酮或吡格列酮或它們鹽的 復(fù)方藥效顯著地高于任一成分的單獨(dú)用藥，尤其是當(dāng)羅格列酮或其鹽和化合物A或其鹽的 配比為1 6.25-1 75，吡格列酮或其鹽和化合物A或其鹽的配比為1 3-1 50時(shí)效 果更好。因此，化合物A或者其鹽與羅格列酮或其鹽組成的組合物，化合物A或者其鹽與吡 格列酮或其鹽組成的組合物在臨床上具有重大意義。本發(fā)明提供了化合物A或其藥學(xué)上可接受的鹽和羅格列酮或吡格列酮或它們藥 學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物提供兩種活性藥物成 分是立即釋放或緩慢釋放。本發(fā)明的藥物組合物是片劑形式，并且特別是涂膜片劑，也可以 是其他口服劑型例如膠囊劑等。本發(fā)明的一方面涉及用于醫(yī)學(xué)給藥化合物A或者其藥學(xué)上可接受的鹽和羅格列 酮或吡格列酮或它們藥學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的劑型。所述劑型可以為粉劑或者 固體形式，并且包括片劑、膠囊、小袋等等。具體的固體劑型涉及含有化合物A或者其藥學(xué)上可接受的鹽和羅格列酮或吡格列酮或者其藥學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的片劑。本發(fā)明還提供了通過(guò)干燥或者濕法處理方法制備化合物A或其鹽和羅格列酮或 吡格列酮或它們鹽的固定劑量組合的藥物組合物的方法。干法處理方法包括干法壓縮和干 法成粒，和濕法處理方法包括濕式?；?。本發(fā)明的另一方面提供了本發(fā)明藥物組合物在治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病 的用途，該用途包括給予需要所述治療的主體治療有效量的本發(fā)明藥物組合物。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，藥物組合物包含(1)化合物A或者其藥學(xué)上可接受 的鹽，為第一種活性藥物成分；(2)羅格列酮或吡格列酮或它們的鹽，為第二種活性藥物成 分；和(3)潤(rùn)滑劑或者助流劑。在本發(fā)明該方面的具體實(shí)施方案中，藥物組合物還可以含有 一種或者多種賦形劑，所述賦形劑選自一種或者多種粘合劑(結(jié)合劑)；一種或者多種稀釋 劑；一種或者多種表面活性劑或者潤(rùn)濕劑；一種或者多種崩解劑；和一種或者多種抗氧化 劑。化合物A藥學(xué)上可接受的鹽、羅格列酮或吡格列酮的鹽包括但不限于，對(duì)甲苯磺 酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、甲磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸 鹽、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、枸櫞酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、萘磺酸鹽、乳 酸鹽或蘋果酸鹽。合并入本發(fā)明藥物組合物中的化合物A或者其鹽的人日用劑量為25毫克 300 毫克。優(yōu)選化合物A或者其鹽的人日用劑量為50毫克 200毫克。離散的人日用劑量為 25、50、75、100、150、200、250和300毫克化合物A或者其鹽。合并入本發(fā)明固定劑量組合中的羅格列酮或其鹽的人日用劑量為1毫克 12毫 克，離散的人日用劑量為1、2、4、8、10和12毫克，吡格列酮或其鹽的人日用劑量為7. 5毫 克 60毫克，離散的人日用劑量為7. 5、15、30、45和60毫克。羅格列酮或吡格列酮或它們 鹽的這些日用劑量表示在中國(guó)和/或美國(guó)批準(zhǔn)用于市售治療人2型糖尿病的日用劑量。在本發(fā)明的固定劑量組合中，化合物A或者其鹽和羅格列酮或吡格列酮或它們的 鹽人日用劑量的具體實(shí)施方案如下化合物A 或其鹽(mg) 25，50，75，100，150，200，250，300羅格列酮或其鹽(mg)l，2，4，8，12吡格列酮或其鹽(mg)7. 5，15，30，45，60可以是化合物A或其鹽任何治療有效量與羅格列酮或吡格列酮或它們鹽的任 何治療有效量的組合物，例如:50+2，50+4，100+2，100+4 或 50+7. 5，50+15，50+30，50+45， 75+7. 5，75+15，100+30，100+45 等等。本發(fā)明的藥物組合物中的兩種活性藥物成分可以有四種釋放形式成分化合物A或其鹽 羅格列酮或吡格列酮或它們的鹽立即釋放立即釋放立即釋放緩慢釋放緩慢釋放立即釋放緩慢釋放緩慢釋放本發(fā)明的藥物組合物通過(guò)濕法或者干法處理方法進(jìn)行制備。在一種實(shí)施方案中，藥物組合物通過(guò)濕法處理方法進(jìn)行制備。在該實(shí)施方案的一類中，藥物組合物通過(guò)濕式造 粒方法進(jìn)行制備。在進(jìn)行濕式粒化中，可以應(yīng)用高剪切粒化或者流化床?；?。在一種實(shí)施 方案中，使用流化床粒化具有使得片劑具有更高徑向強(qiáng)度的優(yōu)點(diǎn)。可以將通過(guò)干法或者濕法處理方法獲得的藥物組合物壓縮成片劑、封裝或者計(jì)量 入小袋中。藥物組合物含有一種或者多種潤(rùn)滑劑或者助流劑。潤(rùn)滑劑的實(shí)例包括硬脂酸鎂、 硬脂酸鈣、硬脂酸、硬脂富馬酸鈉、氫化蓖麻油或其混合物。優(yōu)選的潤(rùn)滑劑是硬脂酸鎂或者 硬脂富馬酸鈉或者其混合物。助流劑的實(shí)例包括膠體二氧化硅、磷酸鈣、硅酸鎂和滑石。本發(fā)明的藥物組合物任選含有一種或者多種粘合劑。粘合劑的實(shí)施方案包括羥丙 基纖維素(HPC)、羥丙基甲基纖維素(HMPC)、羥乙基纖維素、淀粉1500、聚乙烯吡咯烷酮(聚 烯吡酮)和共聚烯吡酮。優(yōu)選的粘合劑是聚乙烯吡咯烷酮。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有一種或者多種稀釋劑。稀釋劑的實(shí)例包括 甘露醇、山梨醇、磷酸二氫鈣二水合物、微晶纖維素和粉化纖維素。優(yōu)選的稀釋劑是微晶纖 維素。微晶纖維素可以得自于數(shù)個(gè)供應(yīng)商，包括FMC Corporation制造的Avicel PH 101、 Avicel PH 102、Avicel PH 103、Avicel PH 105 和 Avicel PH 200。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有崩解劑。崩解劑可以是數(shù)種改性淀粉、改性 纖維素聚合物或者聚羧酸中的一種，比如交聯(lián)羥甲基纖維素鈉、淀粉乙醇酸鈉、波拉克林鉀 和羥甲基纖維素鈣(CMCCalcium)。在一種實(shí)施方案中，崩解劑是交聯(lián)羥甲纖維素鈉。交聯(lián) 羥甲纖維素鈉NF類型A在市場(chǎng)上以商品名“Ac-di-sol”獲得。本發(fā)明的藥物組合物還可以任選含有一種或者多種表面活性劑或者潤(rùn)濕劑。表面 活性劑可以為陰離子、陽(yáng)離子或者中性表面活性劑。陰離子表面活性劑包括月桂基硫酸鈉、 十二烷基磺酸鈉、油烯基硫酸鈉和與硬脂酸脂和滑石混合的月桂酸鈉。陽(yáng)離子表面活性劑 包括苯扎氯銨和烷基三甲基溴化銨。中性表面活性劑包括甘油單油酸脂、聚氧乙烯脫水山 梨糖醇脂肪酸脂、聚乙烯醇和脫水山梨醇脂。潤(rùn)濕劑的實(shí)施方案包括泊洛沙姆、聚氧乙烯烷 基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物和聚氧乙烯硬脂酸脂。可以任選將抗氧化劑加入到制劑中，從而給予其化學(xué)穩(wěn)定性?？寡趸瘎┻x自 a-生育酚、生育酚、生育酚、生育酚富集天然來(lái)源的提取物，L-抗壞血酸和它的 鈉或者鈣鹽、抗壞血酰棕櫚酸酯、掊酸丙酯、掊酸辛酯、掊酸十二烷基酯、丁基化羥基甲苯 (BHT)和丁基化羥基苯甲醚(BHA)。在一種實(shí)施方案中，抗氧化劑為BHT或者BHA。本發(fā)明藥組合物的優(yōu)選劑型是通過(guò)壓縮方法制備的片劑。所述片劑可以用比如羥 丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素的混合物進(jìn)行涂膜，該混合物中含有二氧化鈦和/或其它 著色劑，比如氧化鐵、染料和色淀；聚乙烯醇(PVA)和聚乙二醇(PEG)的混合物，含有二氧化 鈦和/或其它著色劑，比如氧化鐵、染料和色淀；或者任何其它適宜的即時(shí)釋放涂覆劑。包 衣對(duì)最終的片劑提供味道掩蔽和另外的穩(wěn)定性。市售的涂膜為Colorcon提供的為配制粉 末混合物的Opadry 。最后，如果需要，可以加入甜味劑和/或增香劑。本發(fā)明的羅格列酮或吡格列酮或它們的鹽既可以是立即釋放也可以是緩慢釋放， 化合物A或其鹽可以是立即釋放，也可以是緩慢釋放。本發(fā)明的藥物片劑組合物還可以含有一種或者多種另外的選自多種藥物制劑領(lǐng)域已知的賦形劑中的制劑成分。根據(jù)對(duì)藥物組合的期望的性能，基于它們?cè)谥苽淦瑒┙M合 物中的已知用途，可以單獨(dú)或者聯(lián)合選擇任意種成分。所述成分包括但不限于稀釋劑、壓縮 助劑、助流劑、崩解劑、潤(rùn)滑齊IJ、香料、增香齊IJ、甜味劑和防腐劑。在此使用的術(shù)語(yǔ)“片劑”意圖包括所有形狀和大小的壓縮藥物劑量制劑，無(wú)論涂覆 與否?？梢杂糜谕扛驳奈镔|(zhì)包括羥丙纖維素、羥丙基甲基纖維素、二氧化鈦、滑石、甜味劑、 著色劑和增香劑。本發(fā)明還提供了通過(guò)口服給藥需要所述治療的主體治療有效量的一種本發(fā)明固 定劑量組合藥物組合物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的方法。在一種實(shí)施方案中，需要 所述治療的主體是人類。在另一實(shí)施方案中，藥物組合物為片劑的形式，也可以是膠囊劑形 式。含有固定劑量組合的藥物組合物可以每日一次(QD)、每日兩次(BID)或者每日三 次(TID)給藥。本發(fā)明化合物A的合成方法(3aS，5s,6aR) _5_ (2_ ((2S，4S) _2_ 氰基 _4_ 氟-吡咯烷 基)_2_ 氧乙氨 基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (1H)-氨甲酰(化合物A)的合成方法按照PCT/ CN2008/071014實(shí)施例18所述的方法制備，因此將該公開內(nèi)容作為參考文獻(xiàn)。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例進(jìn)一步描述和說(shuō)明了在本發(fā)明范圍內(nèi)的實(shí)施方案。實(shí)施例和試驗(yàn)例僅 僅是為了例證說(shuō)明的目的給出，并不意圖將其視為對(duì)本發(fā)明的限制，其可能存在多種不背 離本發(fā)明精神和范圍的變體。實(shí)施例1、化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽與馬來(lái)酸羅格列酮復(fù)方片劑處方 每片含化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽 50mg馬來(lái)酸羅格列酮4mg微晶纖維素10mg2%淀粉漿 適量硬脂酸鎂 0. 5mg制備方法將化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽，馬來(lái)酸羅格列酮，微晶纖維素混勻，用2%淀 粉漿濕法制粒。干燥，加入硬脂酸鎂，混勻壓片。類似的，通過(guò)調(diào)節(jié)復(fù)方中化合物A或其鹽，羅格列酮或其鹽的用量，來(lái)制備含有不 同比例的兩種活性成分的復(fù)方，例如羅格列酮或其鹽與化合物A或其鹽的比例為1 6.25、 1 12. 5、1 25、1 50,1 75 等等。實(shí)施例2、化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽與鹽酸吡格列酮復(fù)方片劑處方 每片含化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽50mg鹽酸吡格列酮15mg微晶纖維素10mg2%淀粉漿適量
硬脂酸鎂0. 5mg制備方法將化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽，鹽酸吡格列酮，微晶纖維素混勻，用2%淀粉 漿濕法制粒。干燥，加入硬脂酸鎂，混勻壓片。類似的，通過(guò)調(diào)節(jié)復(fù)方中化合物A或其鹽，吡格列酮或其鹽的用量，來(lái)制備含有不 同比例的兩種活性成分的復(fù)方，例如吡格列酮或其鹽與化合物A或其鹽的比例為7. 5 25， 7.5 50,7. 5 75,7. 5 100,7. 5 150,7. 5 375 等等。試驗(yàn)例1 化合物A、LAF_237的體外活件及詵擇件研究方法解凍DPP-IV-Glo.使用前緩沖并平衡到室溫，使用前緩沖凍存的熒光素檢測(cè)試 劑，懸浮DPP-IV-Glo.在底物中加入超純水輕微混合均勻后，制成ImM的底物，將熒光素檢 測(cè)試劑放入茶色瓶中，加入DPP-IV-Glo.。熒光素檢測(cè)試劑應(yīng)在1分鐘內(nèi)溶解，用DMS0溶解 所測(cè)化合物至最終操作濃度的50倍，每個(gè)試管中加入50倍濃度的所測(cè)化合物2 u L，在反面 對(duì)照和空白對(duì)照中加入2ii LDMS0，在每個(gè)試管中加入46ii L Tris緩沖液，在空白對(duì)照中加 入48 y L Tris緩沖液，在反面對(duì)照和測(cè)試樣的每個(gè)試管中加入2 u LDPP4酶，振動(dòng)混合并離 心試管。將試管中物質(zhì)全部轉(zhuǎn)移到96-孔平板上，混合底物和DPP-IV-Glo.比例為1 49。 振動(dòng)混合至充分混合。使用前在室溫下靜置30-60分鐘，在每個(gè)96-孔平板孔中加入50 y L DPP-IV-Glo.和底物的混合液，用封膜封住平板，用平板振蕩器在300-500rpm/30s下慢慢 混合96孔中物質(zhì)。在室溫下培養(yǎng)30分鐘到3小時(shí)，在NOVOstar多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)化學(xué)發(fā) 光計(jì)數(shù)值。[表1] 結(jié)果化合物A對(duì)DPP4的抑制活性優(yōu)于對(duì)照藥物L(fēng)AF-237，選擇性也強(qiáng)于 LAF-237。試驗(yàn)例2 不同比例羅格列酮和化合物A藥物組合物對(duì)iH常ICR小鼠的口服糖耐
量研究雄性ICR小鼠于禁食6小時(shí)后口服雙蒸水、不同配比(羅格列酮馬來(lái)酸鹽化合 物 A 對(duì)甲苯磺酸鹽=1 6. 25,1 12. 5,1 25,1 50，1 75)相同劑量(10mg/kg)的 藥物組合物，各組于給藥30分鐘時(shí)口服葡萄糖2. 5g/kg，做口服糖耐量試驗(yàn)。于給糖后0、 30、60、120分鐘時(shí)取血，測(cè)定血清葡萄糖水平。血清葡萄糖測(cè)定方法；采用葡萄糖試劑盒測(cè)定血清中的葡萄糖含量，取250 ill酶工作液，加入5iU血 清，同時(shí)設(shè)立空白管(加入5iU雙蒸水)及標(biāo)準(zhǔn)管(加入5iU葡萄糖標(biāo)液)，混勻，37°C水 浴20分鐘，以空白管調(diào)零，0D505nm處比色測(cè)定。
血清葡萄糖含量BG(nmol/l) = 0D樣品管/0D標(biāo)準(zhǔn)管X5. 55數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析；1、采用均值士SD及Student-t test對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析2、計(jì)算給糖后30分鐘時(shí)血糖下降百分率以及曲線下面積AUC[表2]正常ICR小鼠口服受試藥物組合物(10mg/kg)后對(duì)口服糖耐量的影響(均 值 士 SD，n = 6)

*，P < 0. 05 ；與空白對(duì)照組相比；**，P < 0. 01 ；與空白對(duì)照組相比；***，P < 0. 001 ；與空白對(duì)照組相比；試驗(yàn)例3 不同比例吡格列酮和化合物A藥物組合物對(duì)iH常ICR小鼠的口服糖耐
量研究雄性ICR小鼠于禁食6小時(shí)后口服雙蒸水、不同配比(吡格列酮鹽酸鹽化合物 A 對(duì)甲苯磺酸鹽=7. 5 25，7. 5 50，7. 5 75，7. 5 100，7. 5 150，7. 5 375)相同 劑量(30mg/kg)的混合物，各組于給藥30分鐘時(shí)口服葡萄糖2. 5g/kg，做口服糖耐量試驗(yàn)。 于給糖后0、30、60、120分鐘時(shí)取血，測(cè)定血清葡萄糖水平。血清葡萄糖測(cè)定方法；采用葡萄糖試劑盒測(cè)定血清中的葡萄糖含量，取250 ill酶工作液，加入5iU血 清，同時(shí)設(shè)立空白管(加入5iU雙蒸水)及標(biāo)準(zhǔn)管(加入5iU葡萄糖標(biāo)液)，混勻，37°C水 浴20分鐘，以空白管調(diào)零，0D505nm處比色測(cè)定。血清葡萄糖含量BG (nmol/1) = 0D樣品管/0D標(biāo)準(zhǔn)管X5. 55數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析；1、采用均值士SD及Student-t test對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析2、計(jì)算給糖后30分鐘時(shí)血糖下降百分率以及曲線下面積AUC[表3]正常ICR小鼠口服受試復(fù)方物(30mg/kg)后對(duì)口服糖耐量的影響(均值 士 SD，n = 6) *，P < 0. 05 ；與空白對(duì)照組相比；**，P < 0. 01 ；與空白對(duì)照組相比；_，P < 0. 001 ；與空白對(duì)照組相比；it^m 4 仆,合物A對(duì)甲苯磺酸鹽、LAF-237分另I丨與羅格歹l|酮馬來(lái)酸鹽或吡格歹U酮 鹽_鹽的聯(lián)合服用在牛肥胖1患_尿病的Wistar肥鼠中的效應(yīng)將14 19周齡的雄性Wistar肥鼠分成8組，每組5 6只，分別服用蒸餾水、化 合物A對(duì)甲苯磺酸鹽、羅格列酮馬來(lái)酸鹽、吡格列酮鹽酸鹽、LAF-237+羅格列酮馬來(lái)酸鹽、 LAF-237+吡格列酮鹽酸鹽、化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽+羅格列酮馬來(lái)酸鹽和化合物A對(duì)甲苯 磺酸鹽+吡格列酮鹽酸鹽14天。從尾靜脈取血，使用一種商品試劑盒(NC-ROPET，Nippon Chemiphar CO.)以酶法分別測(cè)定血漿葡萄糖和血紅蛋白A1.結(jié)果表示為每組(n = 5_6)的 平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差并以Durmett’ s檢驗(yàn)分析，在表4中給出。使用的顯著性水平。[表 4] * :P < 0. 01與對(duì)照組相比
表4中化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽與羅格列酮馬來(lái)酸鹽或吡格列酮鹽酸鹽聯(lián)合服用很 明顯地降低了血液葡萄糖和血紅蛋白的濃度，其強(qiáng)度大于化合物A對(duì)甲苯磺酸鹽、羅格列 酮馬來(lái)酸鹽、吡格列酮鹽酸鹽、LAF-237的單獨(dú)給藥，而且其強(qiáng)度大于LAF-237與羅格列酮 馬來(lái)酸鹽或吡格列酮鹽酸鹽聯(lián)合用藥。
權(quán)利要求
一種治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，所述藥物組合物含有治療有效量的羅格列酮或吡格列酮或它們藥學(xué)上可接受的鹽與(3aS，5s，6aR) 5 (2 ((2S，4S) 2 氰基 4 氟 吡咯烷 1 基) 2 氧乙氨基) N，N，5 三甲基 六氫環(huán)戊[C]吡咯 2(1H) 氨甲酰或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中羅格列酮或其藥學(xué)上可接受的鹽與(3aS，5s，6aR) 5 (2 ((2S，4S) 2 氰基 4 氟 吡咯烷 1 基) 2 氧乙氨基) N，N，5 三甲基 六氫環(huán)戊[C]吡咯 2(1H) 氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽的重量比為1∶6.25 1∶75，吡格列酮或其藥學(xué)上可接受的鹽與(3aS，5s，6aR) 5 (2 ((2S，4S) 2 氰基 4 氟 吡咯烷 1 基) 2 氧乙氨基) N，N，5 三甲基 六氫環(huán)戊[C]吡咯 2(1H) 氨甲酰或其藥學(xué)上可接受的鹽的重量比為1∶3 1∶50。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述(3aS，5S，6aR)-5-(2-((2S，4S)-2-氰 基-4-氟-吡咯烷-1-基)_2_氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯_2(1H)_氨 甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽的人日用量為25-300mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述羅格列酮或其藥學(xué)上可接受的鹽的人 日用量為l_12mg，所述吡格列酮或其藥學(xué)上可接受的鹽的人日用量為7. 5-60mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物為片劑、硬膠囊 劑、軟膠囊劑、口服溶液劑、緩釋劑、滴丸劑、沖劑、顆粒劑、緩釋微丸或其他口服劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述的(3aS，5s， 6aR) -5- (2- ((2S，4S) -2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)_2_氧乙氨基)-N, N，5-三甲基-六 氫環(huán)戊[C]吡咯_2 (1H)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽是立即釋放或緩慢釋放。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述羅格列酮或吡格列酮或它們 藥學(xué)上可接受的鹽是立即釋放或緩慢釋放。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物是以一日一次、 一日兩次或一日三次給藥的藥用組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽選自對(duì)甲 苯磺酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、甲磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、酒石酸鹽、琥珀 酸鹽、醋酸鹽、三氟醋酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、枸櫞酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、萘磺酸鹽、 乳酸鹽或蘋果酸鹽。
9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療哺乳動(dòng)物包括人糖尿病的藥 物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的藥物組合物，特別是含有(3aS，5s，6aR)-5-(2-((2S，4S)-2-氰基-4-氟-吡咯烷-1-基)-2-氧乙氨基)-N，N，5-三甲基-六氫環(huán)戊[C]吡咯-2(1H)-氨甲?；蚱渌帉W(xué)上可接受的鹽和羅格列酮或吡格列酮或它們藥學(xué)上可接受的鹽的固定劑量組合的藥物組合物，制備所述藥物組合物的方法和所述藥物組合物治療哺乳動(dòng)物包括人2型糖尿病的用途。
文檔編號(hào)A61K31/403GK101919851SQ200910147609
公開日2010年12月22日 申請(qǐng)日期2009年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月9日
發(fā)明者劉華文, 朱亞飛, 袁開紅, 馬淑芹 申請(qǐng)人:江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司