專利名稱：一種復(fù)方中藥的鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種質(zhì)量檢測方法，特別是涉及一種復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方 法，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心舒寶片是具有活血化瘀，益氣止痛的心血管藥物，用于冠心病，氣虛 血瘀引起的胸悶，心絞痛，以及高血壓，高血脂，動脈硬化等。該中藥品種 方中丹參苦微寒，祛瘀止痛、活血通經(jīng)，為活血化瘀之要藥；刺五加辛微苦 溫，益氣健脾、補(bǔ)腎安神，令氣旺血行、瘀去絡(luò)通；山楂酸甘微溫，消食健 胃、行氣散瘀，二藥配合丹參則活血化瘀，益氣止痛之功益彰；白芍緩急止 痛，郁金行氣化瘀，使氣行則血行，通則不痛，加強(qiáng)活血、化瘀止痛之功。 本品標(biāo)本兼治，祛邪而不傷正，扶正而不礙邪，共奏活血化瘀，益氣止痛之 功，是治療冠心病，氣虛血瘀引起的胸悶，心絞痛，以及高血壓，高血脂， 動脈硬化等的常用藥物。為促進(jìn)中藥制劑現(xiàn)代化，中藥制劑不斷研究質(zhì)量檢 測方法是必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種新的復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明目的是 通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法包括如下含量測定和/或鑒別中的一種 或幾種
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VI D); 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑，
25-29:8-12:60-65甲醇一 乙睛一 1 %甲酸溶液為流動相；檢測波長為 280-300nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備 精密稱取丹酚酸B對照品適量，加70-80%甲醇制成每lml含O. 14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，
置具塞錐形瓶中，精密加入70-80%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流30-60 分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用70-80%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液， 注入液相色譜儀，測定，即得。
鑒別a取固體制劑lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理10-30 分鐘，濾過，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇 制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005 年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)子同一硅膠G 薄層板上，以30-50:3-7:8-12:0.1-0.3三氯甲烷一醋酸乙酯一 甲醇一 甲酸 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-6%香草醛硫酸溶液，在105。C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏 色的斑點(diǎn)。
b取固體制劑5g，研細(xì)，加70-80X乙醇50ml，加熱回流O. 5-2小時(shí)， 濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取 2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試 品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照 品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述 兩種溶液各10yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以17-20:1氯仿一甲醇 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法優(yōu)選如下含量測定和/或鑒別中的一種 或幾種
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID); 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸 B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù) 方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75
5X甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用
75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精
密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得； 固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H3。016)計(jì)，不得少于0. 60mg。
鑒別a取固體制劑lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘， 濾過，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部 附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各IOpI，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板 上，以40:5:10:0. 2三氯甲垸_醋酸乙酯_甲醇_甲酸為展開劑，展開，取 出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°(]加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品 色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取固體制劑5g，研細(xì)，加75X乙醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶液； 另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液； 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19:1氯仿一甲醇為展開劑，展開， 取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明復(fù)方中藥固體制劑是由如下方法制成的
丹參100 300g白芍 1000 3000g 刺五加500 1500g
郁金150 450g山楂 1000 3000g
以上五味，取白芍200 500g粉碎成細(xì)粉，備用；山楂用乙醇加熱回流 提取1 3次，每次1 3小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白 芍粉或輔料混合，50 8(TC以真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用，剩余白芍或全部 白芍與其余丹參用6 12倍水煎煮1 3次，每次1 3小時(shí)，合并煎液，濾 過，濾液濃縮至密度為1.05 1.35，加乙醇，使含醇量達(dá)50 80%，靜置 過夜，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，按常規(guī)方法制成片劑、膠 囊劑、顆粒劑、滴丸等固體制劑。本發(fā)明質(zhì)量檢測方法使本發(fā)明復(fù)方中藥制劑質(zhì)量可控、療效確切。下述 實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。 實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明復(fù)方中藥固體制劑心舒寶片的抗心絞痛作用研究 方法和結(jié)果
(一)小鼠心臟耐缺氧能力取ICR系小鼠50只，早$各半，體重23 28g，隨機(jī)分為5組，每組10只，禁食不禁水12小時(shí)后按表1分別給予生 理鹽水、復(fù)方丹參以及等比劑量的心舒寶灌胃。40分鐘后腹腔注射5%烏拉 坦0. 15ml/10g麻醉，暴露氣管，以XZ-ll心電監(jiān)視儀(上海醫(yī)用電子儀器 廠)監(jiān)視肢體II導(dǎo)聯(lián)心電并記錄心率，然后以棉線將氣管扎緊，完全阻斷呼 吸，以心臟停轉(zhuǎn)時(shí)間的長短做為心臟耐缺氧的指標(biāo)，結(jié)果進(jìn)行t測驗(yàn)(表l)。
表l心舒寶對小鼠心臟耐缺氧能力的影響(X士SD， n二10)
組別藥物與劑量(灌胃)心臟耐缺氧時(shí)間(分)P值
1生理鹽水0. 2ml/10g6. 69 ±1. 40
2復(fù)方丹參0. 25g/10g18. 85±1.73<0. 001
3心舒寶0. 25g/10g19.10±1. 52<0. 001
4心舒寶0. 20g/10g14. 75±2. 88<0. 001
5心舒寶0. 16g/10g14. 35±2. 19<0. 001
注與生理鹽水對照組比較
表1提示，三個(gè)等比劑量的心舒寶都顯著地提高小鼠心臟的耐缺氧能力
并具有量效關(guān)系，其大劑量組的心臟耐缺氧時(shí)間延長達(dá)185.5%，超過復(fù)方丹參組。
(二)離體大鼠心臟冠脈流量雄性SD系大鼠40只，250 320g，隨機(jī) 分為4組，每組10只，按Langendorff法進(jìn)行離體心臟灌流(灌流壓50cmH20， 洛氏液溫38±rC， PH7. 25±1，充氧)，心尖部經(jīng)換能器與LMS-2A 二道生理記 錄儀(成都儀器廠)相連，冠脈流量由自動記錄儀(自制)描繪，給藥情況 及實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2.心舒寶對離體大鼠心臟冠脈流量和心率的影響(X±SD, n=10)
組別藥物濃度冠脈流量(ml/min)心率(次/min)
給藥前給藥后給藥前給藥后
1心舒寶0. 5mg%4. 86 ±0. 625. 92±0. 60※※188. 1±6. 7115. 36±8. 76
2心舒寶0. 5%4. 79 ±0. 805. 88±1. 12※190. 2 ±10. 97145. 56±14. 75※※
3心舒寶0. 25%4. 53 ±0. 645. 69±0. 98※※182. 6±8. 2130. 3士8.99※※
4心舒寶0. 125%4. 66 ±0. 655. 41±0. 83※186. 8±6. 88160. 9土19,50※※※P〈0.05，※※P〈0.01,給藥前后自身對比
從表2可見，心舒寶能顯著地減慢離體心臟的心率，提高冠脈灌流量， 其作用特點(diǎn)與心得安相似，其效果以0.25%濃度組最明顯，加大灌流濃度并 不相應(yīng)提高療效。
(三)對抗大鼠急性心肌缺血心電圖雄性SD系大鼠55只，250-350g， 隨機(jī)分為5組(其中生理鹽水組15只)，腹腔注射烏拉坦麻醉后以XDH-2心 電圖機(jī)(上海醫(yī)用電子儀器廠)描記肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖(lmv=10mm， 50mm/s) 并按表3所示給藥。經(jīng)l小時(shí)(復(fù)方丹參組0.5小時(shí))后再次描記心電圖， 從尾靜脈注入腦下垂體后葉素0.75u/kg(10〃)，分別記錄注射后10〃， 20〃， 30"， 40〃， l'， 3'，和5'的心電圖，按中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所標(biāo)準(zhǔn) (中草藥有效成份的研究，人民衛(wèi)生出版社1972)判斷是否發(fā)生急性心肌缺 血，結(jié)果進(jìn)行X2測驗(yàn)(表3)。
表3.心舒寶對大鼠急性心肌缺血心電圖的保護(hù)作用
組別給藥方法急性心肌缺血鼠數(shù)(只)P
陽性陰性
1生理鹽水2ml/100g po141
2復(fù)方丹參2g/100g po19<0.01
3心舒寶4g/100g po19<0. 01
4心舒寶2g/100g po19<0. 01
5心舒寶lg/100g po28〈0.01
注與生理鹽水對照組比較
對照組大鼠在靜脈注射腦下垂體后葉素后，出現(xiàn)典型的缺血性T-ST波 形，部份實(shí)驗(yàn)鼠還出現(xiàn)心律失常，急性心肌缺血發(fā)生率達(dá)93. 3%，而口服心 舒寶lg/100g和2g/100g的大鼠，其心肌缺血發(fā)生率明顯降低，分別只在20% 和1(m。其保護(hù)作用與腹腔注射復(fù)方丹參2g/100g組相似，組間無顯著差異。 這提示，心舒寶片口服有明顯的抗急性心肌缺血作用。
下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1:
丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
8以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱 回流提取二次。每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍
粉或輔料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍 與其余丹參等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過， 濾液濃縮至密度為1.165—1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置過夜，濾 取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，制粒，壓制成1000 片，即得。
含量測定:照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID); 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸 B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取片 劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75Q/^甲醇補(bǔ)足 減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品 溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位 制劑含丹參以丹酚酸B(C36H3。016)計(jì)，不得少于0. 60mg。
鑒別a取片劑lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部 附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10u 1，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°(:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取片劑5g，研細(xì)，加75X乙醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液 蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次，每次 10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取 異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄 層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10U 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19: l氯仿一甲醇為展開劑，展開，
取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。 實(shí)施例2:
丹參200g 白芍2000g 剌五加1000g 郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱 回流提取二次。每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍 粉或輔料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍 與其余丹參等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過， 濾液濃縮至密度為1.165—1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置過夜，濾 取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，制粒，制成膠囊1000 粒，即得。
含量測定:照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID); 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，27:10:63 甲醇一乙睛_1%甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸 B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取膠 囊內(nèi)容物，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇 50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲 醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取 對照品溶液與供試品溶液各10pl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑 中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H3。016)計(jì)，不得少于0. 60mg。
鑒別取膠囊內(nèi)容物5g，研細(xì)，加75X乙醇50ml，加熱回流1小時(shí)， 濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3 次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶 液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶 液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各10"1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19: l氯仿一甲醇為展開劑， 展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。 實(shí)施例3:
丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱 回流提取二次。每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍 粉或輔料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍 與其余丹參等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過， 濾液濃縮至密度為1.165—1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置過夜，濾 取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，加常規(guī)輔料制成滴丸。
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID); 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，27:10:63 甲醇一乙睛一lQ/^甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸 B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取滴 丸，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足 減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品 溶液與供試品溶液各10"1，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位 制劑含丹參以丹酚酸B(C36H3。016)計(jì)，不得少于0. 60mg。
鑒別取滴丸lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過， 濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附 錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例4:
丹參200g 白芍2000g刺五加1000g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍 粉或輔料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍
與其余丹參等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過， 濾液濃縮至密度為1.165—1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置過夜，濾 取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，加常規(guī)輔料制成顆粒劑。
鑒別a取顆粒劑lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液;另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部 附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10u 1，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲烷一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105"C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取顆粒劑5g，研細(xì)，加75X乙醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾 液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每 次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶液；另 取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照 薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 10Pl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19:1氯仿一甲醇為展開劑，展開， 取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。 實(shí)施例5:
丹參200g 白芍2000g 刺五加1500g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉，備用；山楂用乙醇加熱回流提取 二次。每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉混合， 7(TC以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍與其丹參等三味加水8、6倍 水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1. 165—1.205， 加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏， 與上述細(xì)粉混勻，制粒，壓制成1000片，即得。
含量測定照高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27:10:63甲醇一乙睛一1%甲酸溶液為流動 相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;對照品 溶液的制備:精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成每lml含O. 14mg 的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精 密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流 45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 lOul，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸 B (C36H3。0lfi)計(jì)，不得少于0. 60mg。
權(quán)利要求
1、一種復(fù)方中藥的鑒別方法，其特征在于該方法包括如下鑒別中的一種或幾種a取固體制劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以30-50∶3-7∶8-12∶0.1-0.3三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b取固體制劑5g，研細(xì)，加70-80％乙醇50ml，加熱回流0.5-2小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以17-20∶1氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；所述的復(fù)方中藥固體制劑是由如下方法制成的丹參100～300g白芍1000～3000g刺五加500～1500g郁金150～450g山楂1000～3000g以上五味，取白芍200～500g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取1～3次，每次1～3小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，50～80℃以真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用，剩余白芍或全部白芍與其余丹參6～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.05～1.35，加乙醇，使含醇量達(dá)50～80％，靜置過夜，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，按常規(guī)方法制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸等固體制劑。
2、如權(quán)利要求1所述的鑒別方法，其特征在于該方法包括如下鑒別中的一種或幾種a取固體制劑lg，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過， 濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10Ul，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40: 5: 10: 0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 在105QC加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b取固體制劑5g，研細(xì)，加75X乙醇50ml，加熱回流1小時(shí)，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶液； 另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以19: l氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm 下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光 斑點(diǎn)。
全文摘要
一種復(fù)方中藥心舒寶片的質(zhì)量檢測方法，該方法包括含量測定和/或鑒別，具體指對心舒寶制劑中的刺五加、白芍進(jìn)行薄層色譜定性鑒別，對丹參采用高效液相色譜法進(jìn)行丹酚酸B的含量測定。
文檔編號A61P3/06GK101584844SQ200910147298
公開日2009年11月25日 申請日期2006年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月10日
發(fā)明者松 夏, 緋 洪, 羅志毅, 趙水連, 陳紀(jì)鵬 申請人:漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司