本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及一種山奈酚在制備治療或改善腸道炎癥藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、枇杷葉作為傳統(tǒng)藥食同源原材料，富含包括多酚類化合物、黃酮類化合物、三萜類化合物在內(nèi)的多種生物活性物質(zhì)，具有卓越的食用和藥用價(jià)值?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，枇杷葉中的黃酮化合物主要是山奈酚和槲皮素。而其中山柰酚的含量穩(wěn)定性最好，其含量受產(chǎn)地間影響較小，可將其用作枇杷葉藥材及其制劑成品質(zhì)量控制的標(biāo)志成分。大量研究表明，山柰酚具有抗炎、抗氧化、抗癌、預(yù)防心血管疾病、調(diào)節(jié)脂肪代謝的作用。

2、炎癥是機(jī)體免疫防御機(jī)制的一種，適當(dāng)?shù)难装Y反應(yīng)可通過(guò)刺激免疫系統(tǒng)執(zhí)行防御功能，用于維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)。研究表明，腸道疾病大多是由腸道炎癥引發(fā)的腸道上皮屏障破壞、腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致。根據(jù)以往研究表明，炎癥性腸損傷的病理生理特征之一是上皮屏障的破壞，而上皮屏障的關(guān)鍵要素之一是緊密連接zo-1、occludin和claudin-1的功能。腸上皮細(xì)胞層由腸道干細(xì)胞(細(xì)胞標(biāo)志蛋白為lgr?5)和各種高度分化的上皮細(xì)胞組成，包括杯狀細(xì)胞(細(xì)胞標(biāo)志蛋白為muc?2)、細(xì)胞潘氏細(xì)胞(細(xì)胞標(biāo)志蛋白為lyz)和腸內(nèi)分泌細(xì)胞(細(xì)胞標(biāo)志蛋白為chg?a)，它們共同維持腸道屏障和緊密連接的穩(wěn)態(tài)。所以其蛋白表達(dá)水平對(duì)維持腸道功能穩(wěn)態(tài)方面具有重要意義。

3、類器官模型因其具有最顯著近生理性的優(yōu)勢(shì)，在研究腸道疾病的發(fā)生和發(fā)展方面具有強(qiáng)大的效用。特別是在炎癥性腸病的研究中發(fā)現(xiàn)可通過(guò)將細(xì)胞因子、免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、腸道微生物群和代謝產(chǎn)物等元素?fù)饺虢】祩€(gè)體的腸道類器官中用于重現(xiàn)疾病發(fā)病機(jī)理。同時(shí)腸類器官也具有足夠的復(fù)雜度來(lái)模擬生理和病理下飲食-宿主條件，為小腸類器官模型在食品營(yíng)養(yǎng)與腸道健康領(lǐng)域的研究奠定了理論基礎(chǔ)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明設(shè)計(jì)的目的在于提供一種山奈酚在制備治療或改善腸道炎癥藥物中的應(yīng)用，具體通過(guò)以下技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)：

2、山奈酚在制備治療或改善腸道炎癥藥物中的應(yīng)用。

3、進(jìn)一步地，腸道炎癥為脂多糖誘導(dǎo)的腸道炎癥。

4、進(jìn)一步地，山奈酚通過(guò)降低促炎因子和增加抑炎因子的表達(dá)水平來(lái)調(diào)節(jié)脂多糖引起的炎癥性腸損傷。

5、進(jìn)一步地，促炎因子為tnf-α、il-1β和il-6，所述抑炎因子為il-10。

6、一種治療或改善腸道炎癥的藥物，該藥物中含有活性成分山奈酚。

7、進(jìn)一步地，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體或常規(guī)輔料。

8、山奈酚在對(duì)炎癥性類器官模型毒性暴露評(píng)估中的應(yīng)用，所述炎癥性類器官模型是通過(guò)脂多糖誘導(dǎo)的。

9、進(jìn)一步地，炎癥性類器官模型為小鼠腸道類器官模型，采用以下方法進(jìn)行構(gòu)建：

10、1)小鼠腸道隱窩分離

11、獲取安樂(lè)死的c57bl/6小鼠小腸組織，并將腸組織縱向剖開，清洗干凈后制成5mm左右組織片段，然后置于edta溶液中消化20min，得到腸隱窩；將腸道隱窩經(jīng)過(guò)濾、離心后重懸于適當(dāng)體積的基質(zhì)膠中，取10μl隱窩-基質(zhì)膠混合物進(jìn)行試種板，進(jìn)行種板密度調(diào)節(jié)；然后取45μl隱窩-基質(zhì)膠混合物種板，待基質(zhì)膠充分凝固后加入小鼠小腸類器官培養(yǎng)基，在37℃、5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)生長(zhǎng)情況可進(jìn)行2-3天換液，5-7天傳代；

12、2)小鼠腸道類器官傳代

13、棄去原培養(yǎng)基，向孔板里加入1ml預(yù)冷的pbs溶液，用槍頭反復(fù)吹打matrigel，至沒(méi)有凝固態(tài)存在，將液體全部轉(zhuǎn)移至離心管中，于冰上繼續(xù)吹打直至隱窩完全分離或絕大部分已經(jīng)分離；室溫2500rpm/min離心3min后，棄上清，加入適量基質(zhì)膠進(jìn)行重懸，即可按照1)的方法進(jìn)行種板，從而進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

14、進(jìn)一步地，所述pbs溶液中含有400u/ml雙抗；含edta的冷pbs溶液中，edta的濃度為5mm。

15、本發(fā)明通過(guò)建立脂多糖誘導(dǎo)腸道腸道類器官炎癥培養(yǎng)模型，來(lái)模擬生理和病理下飲食-疾病-宿主條件，同時(shí)充分挖掘山奈酚功能，發(fā)現(xiàn)山奈酚可以顯著改善腸道炎癥，可以用于治療炎癥性腸炎的新藥的開發(fā)，提高了山柰酚的經(jīng)濟(jì)和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)特征：

1.山奈酚在制備治療或改善腸道炎癥藥物中的應(yīng)用。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述腸道炎癥為脂多糖誘導(dǎo)的腸道炎癥。

3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述山奈酚通過(guò)降低促炎因子和增加抑炎因子的表達(dá)水平來(lái)調(diào)節(jié)脂多糖引起的炎癥性腸損傷。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述促炎因子為tnf-α、il-1β和il-6，所述抑炎因子為il-10。

5.一種治療或改善腸道炎癥的藥物，其特征在于該藥物中含有活性成分山奈酚。

6.如權(quán)利要求5所述的一種治療或改善腸道炎癥的藥物，其特征在于所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體或常規(guī)輔料。

7.山奈酚在對(duì)炎癥性類器官模型毒性暴露評(píng)估中的應(yīng)用，其特征在于所述炎癥性類器官模型是通過(guò)脂多糖誘導(dǎo)的。

8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述炎癥性類器官模型為小鼠腸道類器官模型，采用以下方法進(jìn)行構(gòu)建：

9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述pbs溶液中含有400u/ml雙抗；含edta的冷pbs溶液中，edta的濃度為5mm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明山奈酚在制備治療或改善腸道炎癥藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過(guò)建立脂多糖誘導(dǎo)的腸道類器官炎癥培養(yǎng)模型，來(lái)模擬生理和病理下飲食?疾病?宿主條件，同時(shí)充分挖掘山奈酚功能，發(fā)現(xiàn)山奈酚可以顯著改善腸道炎癥，可以用于治療炎癥性腸炎的新藥的開發(fā)，提高了山柰酚的經(jīng)濟(jì)和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)研發(fā)人員：關(guān)榮發(fā),劉曉鳳,周志遠(yuǎn),鐘浩,張堯,蔡修磊
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江工業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15