細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取方法
【專利說明】細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取方法
[0001 ]所屬領(lǐng)域
本發(fā)明屬于從與天然植物中提取活性成分的方法，具體來說，屬于細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取純方法。
【背景技術(shù)】
[0002]細(xì)葉鼠曲草(Gnaphalium japonicum Thunb)為菊科鼠曲草屬植物，鼠曲草屬植物全世界共有200多種，分布廣泛，資源蘊(yùn)藏量大。我國鼠曲草屬植物有20余種，在民間有相當(dāng)長的使用史，俗稱“面蒿”、“清明菜”，是具有濃郁的民族資源特色食品；同時(shí)也是豐富的藥用資源，中藥詞典里稱之為“天青地白”，廣泛用于痛風(fēng)、炎癥、癰瘡腫毒，腸炎痢疾，活血止血等病癥，細(xì)葉鼠曲草就是其中的一種。細(xì)葉鼠曲草主要分布在我國長江以南，生長在海拔780?1200m的山坡陽處草地，全草入藥，味甘、性平，入肝、脾、肺、小腸四經(jīng)，清熱利濕，解毒清腫，主治結(jié)膜炎、咽喉腫痛、尿道炎；畬族同胞常由于治療小兒黃疸及成人肝病，療效顯著。
[0003]細(xì)葉鼠曲草屬植物的主要化學(xué)成分為黃酮和二萜類，目前國內(nèi)外對(duì)細(xì)葉鼠曲草黃酮類化合物的研究還相當(dāng)缺乏，而黃酮類成分具有抗氧化、抗菌作用及止咳平喘、降血脂、治療肝病及皮膚病，局部擴(kuò)張血管的作用。但中國專利數(shù)據(jù)庫中涉及細(xì)葉鼠曲草的專利申請(qǐng)件均直接將細(xì)葉鼠曲草作為藥材用于藥物組合物，例如2013106026547號(hào)《一種治療腸系膜脂肪炎的中藥》、2013107027621號(hào)《一種治療腹型偏頭痛的中藥》、201410304958X號(hào)《一種用于治療反流性食管炎的中藥及其制備方法》、2014103122551號(hào)《一種治療腸白塞病的中藥》等，目前尚無涉及提取細(xì)葉鼠曲草黃酮的申請(qǐng)件。
[0004]常用的提取黃酮的方法為水煎法、回流提取和酶法提取。水煎法和回流提取耗時(shí)，酶法需要找到適宜的酶種，而采用超聲提取，具有方法簡便，操作快捷、耗時(shí)短的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于各種植物黃酮的提取方面，如銀杏葉總黃酮、維藥多傘阿魏總黃酮、葛根總黃酮等。然而提取純化細(xì)葉鼠曲草總黃酮的方法未見相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在提供一種細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取方法，有效地提取細(xì)葉鼠曲草黃酮，為后續(xù)保健食品和藥品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，發(fā)明人提供的技術(shù)方法包括:
(1)將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，接著粉碎，得到草粉；
(2)用乙醇浸泡草粉；
(3)超聲波處理，超聲三次合并濾液，冷卻，得到提取液；
(4)提取液抽真空，濃縮去乙醇，得到濃縮液；
(5)濃縮液上吸附樹脂層析分離，上柱后先用純凈水洗雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，得到洗脫液:
(6)將洗脫液真空濃縮，獲得黃色提取物，即為細(xì)葉鼠曲草黃酮。
[0007]上述方法的第(I)步中，所述粉碎的細(xì)葉鼠曲草細(xì)度為過20?40目篩。
[0008]上述方法的第(2)步中，所述乙醇為質(zhì)量分?jǐn)?shù)80%的醫(yī)用乙醇，乙醇用量為藥材原料質(zhì)量30倍，浸泡草粉時(shí)間為0.5h以上。
[0009]上述方法的第(3)步中，所述超聲波處理的功率為常規(guī)功率及以上，溫度控制在60°C，處理時(shí)間為0.5h，處理后所得細(xì)葉鼠曲草總黃酮純度為2mg/g。
[0010]上述方法的第(4)步中，所述濃縮溫度控制在40°C?50°C。
[0011]上述方法的第(5)步中，所述吸附樹脂為DlOl大孔吸附樹脂或聚酰胺;所述純凈水用量為2倍柱體積的量;所述乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%?70%。
[0012]上述方法的第(6)步中，所述真空濃縮的真空度控制在0.06MPa。
[0013]本發(fā)明的方法首次采用超聲提取細(xì)葉鼠曲草總黃酮，方法簡便，快捷，價(jià)格低廉；采用大孔吸附樹脂純化，提取細(xì)葉鼠曲草總黃酮充分。適用于提取鼠曲草類植物其中的有效成分。
【具體實(shí)施方式】
[0014]實(shí)施例1將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，粉碎過20目篩，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)80%的醫(yī)用乙醇浸泡半小時(shí)，乙醇用量為藥材原料質(zhì)量30倍;接著，以常規(guī)功率進(jìn)行超聲波處理半小時(shí)，溫度控制在60°C，超聲三次合并濾液，處理后所得細(xì)葉鼠曲草總黃酮提取液純度為2mg/g;之后將提取液抽真空，在40°C?50°C下濃縮除去乙醇;再將濃縮液上大孔吸附樹脂DlOl，上柱后先用2倍柱體積純凈水洗雜質(zhì)，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇洗脫，得到洗脫液，最后真空濃縮，獲得純度為40%的總黃酮提取物。
[0015]實(shí)施例2將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，粉碎過40目篩，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)80%的醫(yī)用乙醇浸泡半小時(shí)，乙醇用量為藥材原料質(zhì)量30倍;接著，以160W功率進(jìn)行超聲波處理半小時(shí)，溫度控制在60°C，超聲三次合并濾液，處理后得到提取液;之后將提取液抽真空，40°C?500C濃縮去乙醇;此后同實(shí)施例1，獲得純度為40%的總黃酮提取物。
[0016]實(shí)施例3將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，粉碎過20目篩，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)80%的醫(yī)用乙醇浸泡半小時(shí)，乙醇用量為藥材原料質(zhì)量30倍;接著，以160W功率進(jìn)行超聲波處理半小時(shí)，溫度控制在60°C，超聲三次合并濾液，處理后得到提取液;之后將提取液抽真空，40°C?500C濃縮去乙醇，此后同實(shí)施例1，獲得純度為40%的總黃酮提取物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取方法，其特征包括: (1)將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，接著粉碎，得到草粉； (2)用乙醇浸泡草粉； (3)超聲波處理，超聲三次合并濾液，冷卻，得到提取液； (4)提取液抽真空，濃縮去乙醇，得到濃縮液； (5)濃縮液上吸附樹脂層析分離，上柱后先用純凈水洗雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，得到洗脫液: (6)將洗脫液真空濃縮，獲得黃色提取物，即為細(xì)葉鼠曲草黃酮。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第(I)步中，所述粉碎的細(xì)葉鼠曲草細(xì)度為過20?40目篩。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第(2)步中，所述乙醇為質(zhì)量分?jǐn)?shù)80%的醫(yī)用乙醇，乙醇用量為藥材原料質(zhì)量30倍，浸泡草粉時(shí)間為0.5h以上。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第(3)步中，所述超聲波處理的功率為常規(guī)功率及以上，溫度控制在60°C，處理時(shí)間為0.5h，處理后所得細(xì)葉鼠曲草總黃酮純度為2mg/g。5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第(4)步中，所述濃縮溫度控制在40°C?50°C。6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于第(5)步中，所述吸附樹脂為DlOl大孔吸附樹脂或聚酰胺;所述純凈水用量為2倍柱體積的量;所述乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%?70%。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種細(xì)葉鼠曲草總黃酮的提取方法，該方法包括：(1)將細(xì)葉鼠曲草洗凈、干燥，粉碎得到草粉；(2)用乙醇浸泡草粉；(3)超聲波處理三次合并濾液，冷卻，得到提取液；(4)提取液抽真空，濃縮去乙醇，得到濃縮液；(5)濃縮液上吸附樹脂層析分離，上柱后先用純凈水洗雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，得到洗脫液：(6)洗脫液真空濃縮，獲得黃色提取物，即為細(xì)葉鼠曲草黃酮。本發(fā)明方法首次采用超聲提取細(xì)葉鼠曲草總黃酮，方法簡便，快捷，產(chǎn)品成本低廉；采用大孔吸附樹脂純化，提取細(xì)葉鼠曲草總黃酮充分。適用于提取鼠曲草類植物其中的有效成分。
【IPC分類】A61K36/28
【公開號(hào)】CN105663197
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610130979
【發(fā)明人】楊雪鷗, 孟祥順, 唐智勇
【申請(qǐng)人】貴州師范大學(xué)
【公開日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年3月9日