專利名稱：一種鬧羊花毒素Ⅲ單體的分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物化合物單體的制備方法，具體涉及從羊躑躅中提取分離鬧羊花毒素III單體的方法，屬于中藥活性成分的分離純化技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鬧羊花毒素III又叫鬧羊花素III，Rhodojaponin 一III，分子式為C2tlH32O6,分子量為368，結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于以杜鵑花科植物羊躑躅藥材為原料，通過(guò)提取、萃取、制備液相系統(tǒng)分離及干燥得鬧羊花毒素III單體，具體包括如下工藝步驟 A提取 將干燥的羊躑躅藥材粉碎成I 4_的粗粉，加入醇溶液，于60 100°C提取3 5次，每次I 3小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液，60 90°C濃縮回收乙醇，得相對(duì)密度1. O 1.1的濃浸膏； B萃取總毒素 將步驟A所得的濃浸膏加水稀釋至60°C時(shí)相對(duì)密度為O. 7 O. 9g/mL，然后加入等體積的乙酸乙酯萃取3 5次，分取上層溶液，45 60°C減壓濃縮至干，所得固體物用質(zhì)量/體積=10 15的甲醇超聲溶解，并用O. 45ΜΠ1有機(jī)膜過(guò)濾，得澄清溶液； C通過(guò)制備型高效液相色譜分離鬧羊花毒素III單體 取步驟B所得的濾液進(jìn)樣，進(jìn)行鬧羊花毒素III單體的制備分離，紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)針對(duì)性收集鬧羊花毒素III的制備餾分溶液，得鬧羊花毒素III單體溶液； D干燥制備鬧羊花毒素III單體產(chǎn)品 取步驟D所得鬧羊花毒素III單體溶液，于45°C 75°C減壓濃縮至干，再將固體物于45 85°C與另器盛放的五氧化二磷共存，真空干燥至恒重，收集干品，即得鬧羊花毒素III單體產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于步驟A所述醇溶液為甲醇或乙醇溶液，它們的濃度均為G/G=70 90%。
3.如權(quán)利要求1或2所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于步驟A所述醇溶液的加入量為藥材重量醇溶液體積=IKg: (6 10)L。
4.如權(quán)利要求1所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于步驟C所述制備型高效液相色譜采用填料為C18的色譜柱、流動(dòng)相組成為體積分?jǐn)?shù)65 85%的甲醇水溶液。
5.如權(quán)利要求1所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于步驟C所述紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。
6.如權(quán)利要求1所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于步驟C所述制備型高效液相色譜分離前，通過(guò)液-質(zhì)聯(lián)用方法或氣-質(zhì)聯(lián)用、核磁共振碳譜、氫譜方法確定高效液相色譜中鬧羊花毒素III單體的峰形。
7.如權(quán)利要求1或6所述鬧羊花毒素III單體的分離純化方法，其特征在于所述液-質(zhì)聯(lián)用方法，采用填料為C18的色譜柱，流動(dòng)相組成為體積分?jǐn)?shù)65 85%的甲醇水溶液，柱溫為室溫，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，根據(jù)質(zhì)譜正離子檢測(cè)結(jié)果，確定鬧羊花毒素III單體在液相色譜中所對(duì)應(yīng)的峰形及歸屬。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種鬧羊花毒素Ⅲ單體的分離純化方法，屬于中藥活性成分的分離純化技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明是以杜鵑花科植物羊躑躅為原料，通過(guò)醇提取、采用乙酸乙酯萃取及通過(guò)制備型高效液相色譜分離、濃縮干燥后得鬧羊花毒素Ⅲ單體。本發(fā)明通過(guò)最適宜的工藝及參數(shù)條件，使產(chǎn)品中鬧羊花毒素Ⅲ的含量達(dá)到98%以上；整個(gè)工藝過(guò)程操作簡(jiǎn)便、工藝穩(wěn)定、成本低，適合大量生產(chǎn)，且分離效率高、產(chǎn)品純度高，即可實(shí)現(xiàn)大量鬧羊花毒素Ⅲ單體的高純度分離制備。
文檔編號(hào)C07D301/32GK103012326SQ201210577690
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月27日
發(fā)明者文煥松, 夏柯, 姚志容, 李啟發(fā), 郭建華, 劉丁 申請(qǐng)人:成都普思生物科技有限公司