本發(fā)明涉及一種口服液的制備方法，具體是一種蟲草口服液的制備方法。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草是我國的一種名貴中藥材，屬于藥用真菌，野生冬蟲夏草主要分布在我國青藏高原高海拔地區(qū)。
近幾十年來，冬蟲夏草產(chǎn)量近年下降，價格逐年上漲。冬蟲夏草目前還不能人工栽培。目前國內(nèi)保健品或制藥行業(yè)大部分是采用北蟲草或發(fā)酵的菌絲體代替冬蟲夏草，而傳統(tǒng)的發(fā)酵方法主要采用化學(xué)元素培養(yǎng)基，營養(yǎng)不全面、單一，冬蟲夏草主要成分低和活性物質(zhì)少，大大影響和降低了產(chǎn)品的質(zhì)量和功能。
目前已有一些關(guān)于蟲草口服液的專利，CN103445151B公開了一種北蟲草口服液及其制備方法，其原料中有多種化學(xué)添加劑。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種蟲草口服液的制備方法及專用培養(yǎng)基，從根本上解決了用生物發(fā)酵技術(shù)填補(bǔ)野生蟲草不足的現(xiàn)狀，還提高了口服液中蟲草主要成分的含量，為食品工業(yè)和制藥行業(yè)，為人民的健康提供了新的保障和途徑。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種蟲草口服液的制備方法，步驟如下：
1）制備搖瓶種：將培養(yǎng)基裝入三角燒瓶內(nèi)，裝液量25-35%，封口后在121-123℃的溫度下滅菌35分鐘，待培養(yǎng)基溫度降到20-28℃時，在無菌條件下將斜面菌種接入三角瓶內(nèi)上搖床培養(yǎng)，當(dāng)菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用；
2）發(fā)酵罐培養(yǎng)：將培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐中，裝液量為發(fā)酵罐總?cè)萘康?5-75%，當(dāng)罐溫升至121-123℃、罐壓0.11-0.13Mpa時，滅菌50min，然后通冷卻水降溫，待罐內(nèi)溫度降到30℃時停止，調(diào)整罐壓0.05Mpa，進(jìn)入培養(yǎng)狀態(tài)；
將培養(yǎng)好的搖瓶種菌種接入罐內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，接種量5-15%，罐溫20-28℃，罐壓0.04-0.05MPa，氣體流量1.5m3/h，罐內(nèi)培養(yǎng)36-48h時，取樣檢驗(yàn)；
繼續(xù)培養(yǎng)5-7d，當(dāng)菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、pH5-6左右、殘?zhí)橇拷抵?.3%左右時，培養(yǎng)結(jié)束，進(jìn)行分裝。所述分裝是在無菌無塵車間內(nèi)，采用冷鏈專用灌裝設(shè)備，將發(fā)酵液灌至滅過菌的瓶內(nèi)。
進(jìn)一步地，將步驟1）的搖瓶種接入種子罐放大培養(yǎng)，再擴(kuò)接到發(fā)酵罐培養(yǎng)。
進(jìn)一步地，步驟1）和步驟2）所述的糖為葡萄糖與二糖的混合，其各占50%質(zhì)量百分比。所述的二糖為蔗糖、白糖或者紅糖。
進(jìn)一步地，視產(chǎn)品需要或者工藝要求，分裝前也可過濾除去菌球。
進(jìn)一步地，步驟1）搖瓶培養(yǎng)基配方：以重量百分比計為：麩皮0.5-1.5%，玉米1.5-2.5%，黃豆1.5-2.5%，燕麥0.5-1.5%，糖（1.5-2.5%，酵母粉1-2%，蜂花粉0.1-0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水。
進(jìn)一步地，步驟1）和步驟2中培養(yǎng)基的pH值為5.5-7.5。
進(jìn)一步地，所述步驟2）培養(yǎng)基的配方為：原料按重量百分比為：桑木0.5-1.5%，麩皮0.5-1.5%，玉米1.5-2.5%，黃豆1.5-2.5%，燕麥0.5-1.5%，糖1.5-2.5%，酵母粉1-2%，蜂花粉0.1-0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.3-0.6%，余量為水。
進(jìn)一步地，步驟1）中搖床轉(zhuǎn)速180-240r/min，搖床培養(yǎng)是20-28℃下振蕩培養(yǎng)7-10天。
進(jìn)一步地，步驟1）和步驟2）中培養(yǎng)基的制備方法為：麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補(bǔ)足水，裝入三角燒瓶內(nèi)。
進(jìn)一步地，步驟2）中，當(dāng)罐溫升至80℃時，先打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態(tài)。
本發(fā)明的有益效果為：1、改變了以往發(fā)酵的化學(xué)合成培養(yǎng)基，而是以天然植物為主，天然綠色無化學(xué)殘留，微量元素多，營養(yǎng)全面；2、傳統(tǒng)配方中只添加葡萄糖這樣的單糖，現(xiàn)改為葡萄糖與蔗糖、白糖、紅糖之一的二糖共同添加，讓成分全面持久；3、傳統(tǒng)發(fā)酵中用消泡劑來處理發(fā)酵產(chǎn)生的泡沫，該技術(shù)用植物油來替代，既有營養(yǎng)，又無化學(xué)殘留；4、口服液在生產(chǎn)和加工灌裝過程中，全程不采用高溫、干燥、萃取、破碎等傳統(tǒng)或現(xiàn)代的物理或化學(xué)方法，不僅有效地保留了口服液中所有的活性成分，而且使活性成分不被損傷或被破壞；5、口服液中改變以往添加防腐劑、增稠劑、穩(wěn)定劑、著色劑等添加劑的方法，從制備搖瓶種至產(chǎn)品灌裝都不添加任何不符合國家要求的化學(xué)添加劑；6、該種方法生產(chǎn)的口服液經(jīng)權(quán)威檢測部門檢測有效成分含量高；7、采用液體發(fā)酵的方法，縮短了生產(chǎn)周期，產(chǎn)量高，成分好。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施對本發(fā)明作進(jìn)一步解釋說明。
實(shí)施例1
1、搖瓶種配方：原料按重量的百分比為：麩皮0.5%，玉米2.5%，黃豆2.5%，燕麥0.5%，糖2.5%（其中，糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%），酵母粉1%，蜂花粉0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為5.5。
2、方法：麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補(bǔ)足水，裝入三角燒瓶內(nèi)，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進(jìn)行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至121℃，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當(dāng)瓶中培養(yǎng)基溫度降到25℃時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內(nèi)，接完菌的三角瓶移入培養(yǎng)室上搖床培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速200r/min，25℃下振蕩培養(yǎng)8天，當(dāng)菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用。
二、發(fā)酵罐培養(yǎng)
1、培養(yǎng)基：原料按重量的百分比為：麩皮1.5%，玉米2.5%，黃豆1.5%，燕麥0.5%打漿過濾，糖（其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%）1.5%，酵母粉1%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.6%，余量為水，pH值為5.5。制備方法同搖瓶培養(yǎng)基。
2、液體發(fā)酵培養(yǎng)方法和條件：將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發(fā)酵罐總?cè)莘e的60%。當(dāng)罐溫升至80℃時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態(tài)，罐溫升至121-123℃、罐壓0.12Mpa時，計時開始，滅菌50min，計時結(jié)束通冷卻水降溫，罐內(nèi)溫度降到30℃時停止降溫，調(diào)整罐壓0.05Mpa，進(jìn)入培養(yǎng)狀態(tài)。將培養(yǎng)好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，接種量10%，罐溫28℃，罐壓0.04Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內(nèi)培養(yǎng)36h時，取樣檢驗(yàn)。繼續(xù)培養(yǎng)6天，當(dāng)菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、pH5-6左右、殘?zhí)橇拷抵?.3%左右時，培養(yǎng)結(jié)束，經(jīng)檢驗(yàn)合格即可分裝（分裝時視產(chǎn)品需要或工藝要求保留菌球或?yàn)V去菌球）。
三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標(biāo)、裝箱
在國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)凈化無菌無塵車間內(nèi)，采用冷鏈專用灌裝設(shè)備，將發(fā)酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內(nèi)，旋蓋后進(jìn)行燈檢、貼標(biāo)、裝箱。
實(shí)施例2
1、搖瓶種配方：原料按重量的百分比為：麩皮1.0%，玉米1.5%，黃豆2%，燕麥1.5%，糖1.5%（其中，糖為葡萄糖和紅糖，各占50%），酵母粉2%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為6.5。
2、方法：麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補(bǔ)足水，裝入三角燒瓶內(nèi)，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進(jìn)行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至123℃，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當(dāng)瓶中培養(yǎng)基溫度降到28℃時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內(nèi)，接完菌的三角瓶移入培養(yǎng)室上搖床培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速200r/min，28℃下振蕩培養(yǎng)7天，當(dāng)菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用。
二、發(fā)酵罐培養(yǎng)
1、培養(yǎng)基：原料按重量的百分比為：麩皮1 %，玉米2%，黃豆2%，燕麥1%打漿過濾，糖（其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%）2%，酵母粉1%，蜂花粉0.15%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.4%，余量為水，pH值為6.5。制備方法同搖瓶培養(yǎng)基。
2、液體發(fā)酵培養(yǎng)方法和條件：將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發(fā)酵罐總?cè)莘e的70%。當(dāng)罐溫升至80℃時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態(tài)，罐溫升至123℃、罐壓0.11Mpa時，計時開始，滅菌50min，計時結(jié)束通冷卻水降溫，罐內(nèi)溫度降到30℃時停止降溫，調(diào)整罐壓0.05Mpa，進(jìn)入培養(yǎng)狀態(tài)。將培養(yǎng)好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，接種量10%，罐溫28℃，罐壓0.04Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內(nèi)培養(yǎng)36h時，取樣檢驗(yàn)。繼續(xù)培養(yǎng)7天，當(dāng)菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、pH5-6左右、殘?zhí)橇拷抵?.3%左右時，培養(yǎng)結(jié)束，經(jīng)檢驗(yàn)合格即可分裝（分裝時視產(chǎn)品需要或工藝要求保留菌球或?yàn)V去菌球）。
三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標(biāo)、裝箱
在國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)凈化無菌無塵車間內(nèi)，采用冷鏈專用灌裝設(shè)備，將發(fā)酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內(nèi)，旋蓋后進(jìn)行燈檢、貼標(biāo)、裝箱。
實(shí)施例3
1、搖瓶種配方：原料按重量的百分比為：麩皮1.5%，玉米2.5%，黃豆1.5%，燕麥1.5%，糖2.5%（其中，糖為葡萄糖和白糖，各占50%），酵母粉1%，蜂花粉0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為7。
2、方法：麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補(bǔ)足水，裝入三角燒瓶內(nèi)，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進(jìn)行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至121℃，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當(dāng)瓶中培養(yǎng)基溫度降到20℃時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內(nèi)，接完菌的三角瓶移入培養(yǎng)室上搖床培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速200r/min，20℃下振蕩培養(yǎng)10天，當(dāng)菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用。
二、發(fā)酵罐培養(yǎng)
1、培養(yǎng)基：原料按重量的百分比為：麩皮1.5%，玉米-2.5%，黃豆1.5%，燕麥1.5%打漿過濾，糖（其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%）2.5%，酵母粉1%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.6%，余量為水，pH值為5.5。制備方法同搖瓶培養(yǎng)基。
2、液體發(fā)酵培養(yǎng)方法和條件：將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發(fā)酵罐總?cè)莘e的55%。當(dāng)罐溫升至80℃時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態(tài)，罐溫升至121-123℃、罐壓0.13Mpa時，計時開始，滅菌50min，計時結(jié)束通冷卻水降溫，罐內(nèi)溫度降到30℃時停止降溫，調(diào)整罐壓0.05Mpa，進(jìn)入培養(yǎng)狀態(tài)。將培養(yǎng)好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，接種量10%，罐溫28℃，罐壓0.05Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內(nèi)培養(yǎng)36h時，取樣檢驗(yàn)。繼續(xù)培養(yǎng)5天，當(dāng)菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、pH5-6左右、殘?zhí)橇拷抵?.3%左右時，培養(yǎng)結(jié)束，經(jīng)檢驗(yàn)合格即可分裝（分裝時視產(chǎn)品需要或工藝要求保留菌球或?yàn)V去菌球）。
三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標(biāo)、裝箱
在國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)凈化無菌無塵車間內(nèi)，采用冷鏈專用灌裝設(shè)備，將發(fā)酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內(nèi)，旋蓋后進(jìn)行燈檢、貼標(biāo)、裝箱。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。