技術(shù)特征：

1.一種流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括RT-LAMP引物、2×反應(yīng)緩沖液、酶混合物EM、熒光目視檢測試劑、超純水和流感病毒RNA模板，所述的RT-LAMP引物包括外引物F3與B3、內(nèi)引物FIP與BIP；

其中引物的序列分別為：

F3 TCTGGAGGGGTGAAAATGGA

B3 GTGCAACTGATCCCCTCAG

FIP GCCCTCTGGGCAGCTGTTTGCGAAGGACAAGGGTTGCTTA

BIP AAGTCGAAACCCAGGAAACGCTAATGAGTGCTGACCGTGC

所述的2×反應(yīng)緩沖液包括Tris-HCL、KCL、MgSO₄、(NH₄)₂SO₄、Tween20、Betaine和dNTPs。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述的流感病毒RNA模板取自病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述的熒光目視檢測試劑采用鈣黃綠素?zé)晒庠噭瑹晒庠噭┰诜磻?yīng)前加入。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述的2×反應(yīng)緩沖液包括Tris-HCL 35-50mM、KCL 15-35mM、MgSO₄ 15-20mM、(NH₄)₂SO₄ 15-25mM、Tween20 0.4-0.8℅、Betaine 1.5-3.0M 和dNTPs 2.5-4 mM。

5.一種流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒的應(yīng)用，其特征在于，具體操作步驟包括：

（1）RT-LAMP引物的設(shè)計(jì)與合成

（2）流感病毒RNA模板的提取

（3）RT-LAMP反應(yīng)體系建立

（4）RT-LAMP檢測方法。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒的應(yīng)用，其特征在于，所述的RT-LAMP反應(yīng)體系建立以25μl計(jì)，

2×反應(yīng)緩沖液 12.5 μL

EM 1 μL

FIP 40 pmol

BIP 40 pmol

F3 5 pmol

B3 5 pmol

流感病毒RNA 5 μL

超純水 補(bǔ)足25 μL。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒的應(yīng)用，其特征在于，所述的RT-LAMP檢測方法是采用特異性檢測、敏感性檢測和熒光可視化檢測的方法。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的流感病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試劑盒的應(yīng)用，其特征在于，所述的RT-LAMP檢測方法采用實(shí)時(shí)濁度儀進(jìn)行密閉全程監(jiān)控。