技術(shù)特征：

1.一種金線蓮莖腐病菌分子檢測(cè)的PCR引物，其特征在于，引物序列為：

ITS403f：5’-CCCAACCCCTGTGACATAC-3’；

ITS403r：5’-ATTACCAGTAACGAGGGTT-3’；

上述引物ITS403f/ ITS403r可從金線蓮莖腐病菌特異性擴(kuò)增出403bp的產(chǎn)物。

2.利用權(quán)利要求1所述PCR引物用于檢測(cè)金線蓮莖腐病菌的方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）從所述的金線蓮莖腐病菌或被莖腐病菌感染的金線蓮植株中提取DNA；

（2）以該DNA為模板用權(quán)利要求1所述的引物ITS403f/ ITS403r通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增：PCR反應(yīng)體系25.0 μl，包括2×Taq PCR Master Mix12.5μL，10 μmol/L 的引物ITS403f / ITS403r各0.5 μL，DNA模板25ng，不足部分由dd H₂O補(bǔ)足；PCR反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性3min；94℃變性1min，58℃退火30sec，72℃延伸1min，共25個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min；

（3）然后取步驟（2）的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳分離，經(jīng)溴化乙錠染色后于紫外燈下觀察，根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的大小判定結(jié)果，如果能特異性地?cái)U(kuò)增出403bp的產(chǎn)物，即可判斷所述的植株樣品中存在金線蓮莖腐病菌。

3.如權(quán)利要求1所述PCR引物在檢測(cè)金線蓮莖腐病菌中的應(yīng)用。