本發(fā)明涉及培養(yǎng)基制備技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣的微生物受到消毒劑的化學(xué)成分影響，首先解決公共場(chǎng)所空氣中消毒作用的多種化學(xué)物質(zhì)成分是關(guān)鍵核心部分，并且需要嚴(yán)格掌握其作用時(shí)間。這項(xiàng)技術(shù)是根據(jù)公共衛(wèi)生場(chǎng)所中空氣消毒劑與微生物接觸一定時(shí)間之后，空氣中的微生物發(fā)生變化評(píng)價(jià)空氣消毒劑效果，以至于比較市面銷售的各種空氣消毒劑(包括室內(nèi)空氣消毒劑)及開(kāi)發(fā)更有效地空氣消毒劑的開(kāi)發(fā)與生產(chǎn)。目前為止，除去空氣中殘留消毒劑化學(xué)成分的方法已有很多，例如來(lái)源于中國(guó)期刊網(wǎng)2016年7期《心理醫(yī)生》，于2016年8月發(fā)表的殘余消毒劑的清除方法，針對(duì)消毒劑中存在的酸、堿的成分，即選用吸附、稀釋、離心、過(guò)濾等方法來(lái)除去殘留化學(xué)成分。但是這些方法存在局限性，稀釋方法的缺點(diǎn)是若標(biāo)本中存活的菌數(shù)已經(jīng)較少，經(jīng)過(guò)再稀釋后會(huì)使標(biāo)本中的細(xì)菌大幅度降低，導(dǎo)致在檢測(cè)室檢驗(yàn)不出，致使假陰性的結(jié)果發(fā)生，過(guò)濾法使用過(guò)程相對(duì)比較復(fù)雜，對(duì)操作人員的技術(shù)要求較高，這些方法都比較簡(jiǎn)單，局限性比較大，目前方法中使用較多的是化學(xué)中和法，現(xiàn)在中和劑種類有很多，但針對(duì)不同消毒劑和細(xì)菌，至今尚無(wú)理想的中和劑來(lái)進(jìn)行處理，所以如何采取空氣樣本中不含殘余消毒劑多種化學(xué)物質(zhì)是這項(xiàng)技術(shù)的將解決核心部分，才能使空氣質(zhì)量檢測(cè)方法更準(zhǔn)確、可靠。為此，我們選用新型空氣采樣中和培養(yǎng)基技術(shù)，全面去除殘留的空氣消毒劑各種化學(xué)成分，以培養(yǎng)空氣中存在的細(xì)菌來(lái)考察對(duì)公共空氣中進(jìn)行消毒的空氣消毒劑的效果高低，以至于評(píng)價(jià)公共衛(wèi)生環(huán)境中的空氣質(zhì)量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基，以解決上述背景技術(shù)中提出的問(wèn)題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基，該種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基的制備方法步驟如下：

s1：選取材料：選取卵磷脂20-30g，吐溫-8020-60g，組氨酸2-10g，硫代硫酸鈉2-10g，巰基乙酸鈉1-2g，葡萄糖30-40g，胰蛋白胨20-30g，瓊脂40-50g，氯化鈉17g；

s2：過(guò)濾、溶解：將步驟s1選取的材料依次通入到活性炭過(guò)濾器內(nèi)進(jìn)行空氣前過(guò)濾處理，然后將卵磷脂、吐溫-80、組氨酸、硫代硫酸鈉和巰基乙酸鈉添加在加熱裝置中加熱攪拌，攪拌時(shí)間25-35分鐘，溫度設(shè)置在80℃，溶解后形成溶液一，然后將葡萄糖、胰蛋白胨、瓊脂和氯化鈉添入到加熱裝置內(nèi)，攪拌混合10-20分鐘，溶解后形成溶液二，然后將溶液一內(nèi)溶解的混合溶液加入到溶液二，攪拌混合10-16分鐘，靜置冷卻10-20分鐘最后將得到的混合料中加入80-120毫升的水充分?jǐn)嚢?0-20分鐘，至各成分全部與水溶解均勻，溶解后形成培養(yǎng)基；

s3：調(diào)整ph：取與標(biāo)準(zhǔn)管同口徑的試管三支，于第一、三管各加入欲測(cè)定ph的的培養(yǎng)基5ml，并于第一管中加入0.2g/l的酚紅0.25ml作為測(cè)定管，充分混勻，在第二管加入蒸餾水5ml，標(biāo)準(zhǔn)管為ph標(biāo)準(zhǔn)比色管，然后精確緩慢的將矯正溶液向測(cè)定管進(jìn)行矯正，直至顏色通過(guò)ph試紙測(cè)定后與標(biāo)準(zhǔn)管相同為止，顏色呈淡紫色，其ph值調(diào)節(jié)為7，每加一滴后都需要充分混勻，比色后再加第二滴準(zhǔn)確記錄加入的量；

s4：過(guò)濾澄清：將步驟s2中的培養(yǎng)基導(dǎo)入到容器內(nèi)，以高壓100-110kpa蒸汽融化10分鐘后，靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜12小時(shí)，次日將培養(yǎng)基傾出，用刀將底部沉渣切去，再融化即可收清晰的培養(yǎng)基；

s5：分裝：向步驟s4中清晰的培養(yǎng)基加熱融化，溫度為120-130℃，時(shí)間為1小時(shí)，然后靜置培養(yǎng)基30分鐘，使得培養(yǎng)基內(nèi)溫度冷至50℃左右，以無(wú)菌手續(xù)倒入滅菌平皿內(nèi)，平皿倒入的培養(yǎng)基約13-15mol/l，輕搖平皿底，使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部，待凝固后備用；

s6：滅菌：將步驟s5中凝固的培養(yǎng)基以后高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，溫度為115℃，時(shí)間為15-30min；

s7：檢定和保存：培養(yǎng)基制成后須經(jīng)檢定方可使用，檢定時(shí)將培養(yǎng)基放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，制好的培養(yǎng)基放在4-6℃冰箱內(nèi)備用。

優(yōu)選的，所述步驟s2中的加熱裝置為電爐。

優(yōu)選的，所述步驟s3中的矯正液為過(guò)酸或過(guò)堿溶液，且過(guò)酸或過(guò)堿溶液采用0.1mol/l鹽酸溶液或者0.1mol/l氫氧化鈉。

優(yōu)選的，所述步驟s4中的容器為鋁鍋或者廣口搪瓷容器。

優(yōu)選的，所述步驟s5中的平皿的內(nèi)徑為九厘米。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：該種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基中和劑中的卵磷脂可中和季銨化合物，吐溫-80可中和酚類化合物，硫代硫酸鈉可中和具有氧化性的防腐劑如碘和氯，巰基乙酸鈉可中和含汞防腐劑，組氨酸可中和醛類防腐劑，上述物質(zhì)按比例混合后對(duì)殘留公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣消毒劑具有切實(shí)可靠的中和作用，能與殘留公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣消毒劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成對(duì)實(shí)驗(yàn)微生物沒(méi)有殺滅或抑制其生長(zhǎng)的作用、對(duì)培養(yǎng)成分沒(méi)有破壞作用、對(duì)物理性狀沒(méi)有影響的中和產(chǎn)物，對(duì)相應(yīng)殘留公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣消毒劑具有切實(shí)可靠的中和作用。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明工作流程圖；

圖2為本發(fā)明一般培養(yǎng)基處理后的細(xì)菌濃度示意圖；

圖3為本發(fā)明培養(yǎng)基處理后的細(xì)菌濃度示意圖；

圖4為本發(fā)明細(xì)菌在培養(yǎng)基處理前后對(duì)照?qǐng)D。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例一

一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基，該種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基的制備方法步驟如下：

s1：選取材料：選取卵磷脂20g，吐溫-8020g，組氨酸2g，硫代硫酸鈉2g，巰基乙酸鈉1g，葡萄糖30g，胰蛋白胨20g，瓊脂40g，氯化鈉17g；

s2：過(guò)濾、溶解：將步驟s1選取的材料依次通入到活性炭過(guò)濾器內(nèi)進(jìn)行空氣前過(guò)濾處理，然后將卵磷脂、吐溫-80、組氨酸、硫代硫酸鈉和巰基乙酸鈉添加在加熱裝置中加熱攪拌，攪拌時(shí)間25分鐘，溫度設(shè)置在80℃，溶解后形成溶液一，然后將葡萄糖、胰蛋白胨、瓊脂和氯化鈉添入到加熱裝置內(nèi)，攪拌混合10分鐘，溶解后形成溶液二，然后將溶液一內(nèi)溶解的混合溶液加入到溶液二，攪拌混合10分鐘，靜置冷卻10分鐘最后將得到的混合料中加入80毫升的水充分?jǐn)嚢?0分鐘，至各成分全部與水溶解均勻，溶解后形成培養(yǎng)基；

s3：調(diào)整ph：取與標(biāo)準(zhǔn)管同口徑的試管三支，于第一、三管各加入欲測(cè)定ph的的培養(yǎng)基5ml，并于第一管中加入0.2g/l的酚紅0.25ml作為測(cè)定管，充分混勻，在第二管加入蒸餾水5ml，標(biāo)準(zhǔn)管為ph標(biāo)準(zhǔn)比色管，然后精確緩慢的將矯正溶液向測(cè)定管進(jìn)行矯正，直至顏色通過(guò)ph試紙測(cè)定后與標(biāo)準(zhǔn)管相同為止，顏色呈淡紫色，其ph值調(diào)節(jié)為7，每加一滴后都需要充分混勻，比色后再加第二滴準(zhǔn)確記錄加入的量；

s4：過(guò)濾澄清：將步驟s2中的培養(yǎng)基導(dǎo)入到容器內(nèi)，以高壓100kpa蒸汽融化10分鐘后，靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜12小時(shí)，次日將培養(yǎng)基傾出，用刀將底部沉渣切去，再融化即可收清晰的培養(yǎng)基；

s5：分裝：向步驟s4中清晰的培養(yǎng)基加熱融化，溫度為120℃，時(shí)間為1小時(shí)，然后靜置培養(yǎng)基30分鐘，使得培養(yǎng)基內(nèi)溫度冷至50℃左右，以無(wú)菌手續(xù)倒入滅菌平皿內(nèi)，平皿倒入的培養(yǎng)基約13mol/l，輕搖平皿底，使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部，待凝固后備用；

s6：滅菌：將步驟s5中凝固的培養(yǎng)基以后高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，溫度為115℃，時(shí)間為15min；

s7：檢定和保存：培養(yǎng)基制成后須經(jīng)檢定方可使用，檢定時(shí)將培養(yǎng)基放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，制好的培養(yǎng)基放在4℃冰箱內(nèi)備用。

實(shí)施例二

一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基，該種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基的制備方法步驟如下：

s1：選取材料：選取卵磷脂25g，吐溫-8040g，組氨酸6g，硫代硫酸鈉6g，巰基乙酸鈉1.5g，葡萄糖35g，胰蛋白胨25g，瓊脂45g，氯化鈉17g；

s2：過(guò)濾、溶解：將步驟s1選取的材料依次通入到活性炭過(guò)濾器內(nèi)進(jìn)行空氣前過(guò)濾處理，然后將卵磷脂、吐溫-80、組氨酸、硫代硫酸鈉和巰基乙酸鈉添加在加熱裝置中加熱攪拌，攪拌時(shí)間30分鐘，溫度設(shè)置在80℃，溶解后形成溶液一，然后將葡萄糖、胰蛋白胨、瓊脂和氯化鈉添入到加熱裝置內(nèi)，攪拌混合15分鐘，溶解后形成溶液二，然后將溶液一內(nèi)溶解的混合溶液加入到溶液二，攪拌混合13分鐘，靜置冷卻15分鐘最后將得到的混合料中加入100毫升的水充分?jǐn)嚢?5分鐘，至各成分全部與水溶解均勻，溶解后形成培養(yǎng)基；

s3：調(diào)整ph：取與標(biāo)準(zhǔn)管同口徑的試管三支，于第一、三管各加入欲測(cè)定ph的的培養(yǎng)基5ml，并于第一管中加入0.2g/l的酚紅0.25ml作為測(cè)定管，充分混勻，在第二管加入蒸餾水5ml，標(biāo)準(zhǔn)管為ph標(biāo)準(zhǔn)比色管，然后精確緩慢的將矯正溶液向測(cè)定管進(jìn)行矯正，直至顏色通過(guò)ph試紙測(cè)定后與標(biāo)準(zhǔn)管相同為止，顏色呈淡紫色，其ph值調(diào)節(jié)為7，每加一滴后都需要充分混勻，比色后再加第二滴準(zhǔn)確記錄加入的量；

s4：過(guò)濾澄清：將步驟s2中的培養(yǎng)基導(dǎo)入到容器內(nèi)，以高壓105kpa蒸汽融化10分鐘后，靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜12小時(shí)，次日將培養(yǎng)基傾出，用刀將底部沉渣切去，再融化即可收清晰的培養(yǎng)基；

s5：分裝：向步驟s4中清晰的培養(yǎng)基加熱融化，溫度為125℃，時(shí)間為1小時(shí)，然后靜置培養(yǎng)基30分鐘，使得培養(yǎng)基內(nèi)溫度冷至50℃左右，以無(wú)菌手續(xù)倒入滅菌平皿內(nèi)，平皿倒入的培養(yǎng)基約14mol/l，輕搖平皿底，使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部，待凝固后備用；

s6：滅菌：將步驟s5中凝固的培養(yǎng)基以后高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，溫度為115℃，時(shí)間為22.5min；

s7：檢定和保存：培養(yǎng)基制成后須經(jīng)檢定方可使用，檢定時(shí)將培養(yǎng)基放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，制好的培養(yǎng)基放在5℃冰箱內(nèi)備用。

實(shí)施例三

一種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基，該種公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣采樣中和培養(yǎng)基的制備方法步驟如下：

s1：選取材料：選取卵磷脂30g，吐溫-8060g，組氨酸10g，硫代硫酸鈉10g，巰基乙酸鈉2g，葡萄糖40g，胰蛋白胨30g，瓊脂40-50g，氯化鈉17g；

s2：過(guò)濾、溶解：將步驟s1選取的材料依次通入到活性炭過(guò)濾器內(nèi)進(jìn)行空氣前過(guò)濾處理，然后將卵磷脂、吐溫-80、組氨酸、硫代硫酸鈉和巰基乙酸鈉添加在加熱裝置中加熱攪拌，攪拌時(shí)間35分鐘，溫度設(shè)置在80℃，溶解后形成溶液一，然后將葡萄糖、胰蛋白胨、瓊脂和氯化鈉添入到加熱裝置內(nèi)，攪拌混合20分鐘，溶解后形成溶液二，然后將溶液一內(nèi)溶解的混合溶液加入到溶液二，攪拌混合16分鐘，靜置冷卻20分鐘最后將得到的混合料中加入120毫升的水充分?jǐn)嚢?0分鐘，至各成分全部與水溶解均勻，溶解后形成培養(yǎng)基；

s3：調(diào)整ph：取與標(biāo)準(zhǔn)管同口徑的試管三支，于第一、三管各加入欲測(cè)定ph的的培養(yǎng)基5ml，并于第一管中加入0.2g/l的酚紅0.25ml作為測(cè)定管，充分混勻，在第二管加入蒸餾水5ml，標(biāo)準(zhǔn)管為ph標(biāo)準(zhǔn)比色管，然后精確緩慢的將矯正溶液向測(cè)定管進(jìn)行矯正，直至顏色通過(guò)ph試紙測(cè)定后與標(biāo)準(zhǔn)管相同為止，顏色呈淡紫色，其ph值調(diào)節(jié)為7，每加一滴后都需要充分混勻，比色后再加第二滴準(zhǔn)確記錄加入的量；

s4：過(guò)濾澄清：將步驟s2中的培養(yǎng)基導(dǎo)入到容器內(nèi)，以高壓110kpa蒸汽融化10分鐘后，靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜12小時(shí)，次日將培養(yǎng)基傾出，用刀將底部沉渣切去，再融化即可收清晰的培養(yǎng)基；

s5：分裝：向步驟s4中清晰的培養(yǎng)基加熱融化，溫度為130℃，時(shí)間為1小時(shí)，然后靜置培養(yǎng)基30分鐘，使得培養(yǎng)基內(nèi)溫度冷至50℃左右，以無(wú)菌手續(xù)倒入滅菌平皿內(nèi)，平皿倒入的培養(yǎng)基約15mol/l，輕搖平皿底，使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部，待凝固后備用；

s6：滅菌：將步驟s5中凝固的培養(yǎng)基以后高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，溫度為115℃，時(shí)間為30min；

s7：檢定和保存：培養(yǎng)基制成后須經(jīng)檢定方可使用，檢定時(shí)將培養(yǎng)基放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，制好的培養(yǎng)基放在6℃冰箱內(nèi)備用。

由圖2可知一般的培養(yǎng)基對(duì)消毒劑中和不充分，抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)菌濃度不能夠增加，由圖3可知，根據(jù)實(shí)施例一、二、三的實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)得出：最佳實(shí)施方案為實(shí)施例二，實(shí)施例二中的中和培養(yǎng)基相對(duì)實(shí)施例一和實(shí)施例二的中和培養(yǎng)基其微生物的回收率明顯較高，而實(shí)施例一和三種細(xì)菌生長(zhǎng)的速度還是有所抑制，增長(zhǎng)速度較慢，所以該中和劑可消除空氣消毒劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，更好的殘留公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣消毒劑中的微生物數(shù)量，提高殘留公共衛(wèi)生場(chǎng)所空氣消毒劑中的微生物檢測(cè)的準(zhǔn)確性。。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對(duì)這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。