專利名稱：一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
硼酸為白色結(jié)晶性粉末或無(wú)色微帶珍珠狀光澤的鱗片，有刺激性，可以用作化學(xué)試劑和生產(chǎn)蟑螂、甲蟲殺蟲劑，在醫(yī)藥上用作止血和防腐劑。硼砂經(jīng)由食品攝取后可與胃酸作用產(chǎn)生硼酸。硼酸未被允許作為食品添加劑，但民間常有將硼砂或硼酸摻入糧食中作為殺蟲防腐劑使用的現(xiàn)象，早年也有將硼酸用作食品防腐劑和膨松劑的的問(wèn)題。對(duì)于膠乳中硼酸，膠乳的保存一般采取兩種方式，一種是高氨保存，一種是低氨配合在O. 2-0. 25%之間含量的硼酸來(lái)保存的。
高效液相色譜法是20世紀(jì)60年代末在經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種現(xiàn)代色譜分析方法，歷史上曾出現(xiàn)過(guò)不同的叫法，如高壓液相色譜、高速液相色譜和高分辨液相色譜。就分離原理而言，高效液相色譜采用了高壓輸液泵、高效微粒固定相和高靈敏度檢測(cè)器，高效液相色譜具有分析速度快、分離效率好、檢測(cè)靈敏度高、分析速度快、樣品回收方便和操作自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。該方法在生物工程、制藥工業(yè)、食品工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和石油化工等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于硼酸的高效液相色譜方法的測(cè)定有部分報(bào)道。2002年隋迎軍等人報(bào)道了高效液相色譜法測(cè)定冰硼散中硼砂的含量。建立高效液相色譜法測(cè)定冰硼散中硼砂的含量。結(jié)果硼砂在進(jìn)樣量O. 14 O. 71 μ g .m]-1范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，r = O. 9992。結(jié)論建立含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。2007年陳艷等人報(bào)道了食品中硼砂的反相高效液相色譜測(cè)定法。建立反相高效液相色譜(RP-HPLC)測(cè)定食品中硼砂的方法，方法的檢出限為6. 4ng/kg，RSD為2. 3%，回收率為90. 63% 96. 88%，線性范圍為O. 032-0. 32μ g/L，相關(guān)系數(shù)為O. 9992。1995年胡奇志等人報(bào)道了硼-姜黃素絡(luò)合物的高效液相色譜研究及應(yīng)用。研究了在非水體系中硼與質(zhì)子化的姜黃素形成的絡(luò)合物以無(wú)水甲醇為溶劑，在C18色譜柱上用甲醇-水(80 20V/V)作流動(dòng)相(1.00mL/min)分離并檢測(cè).硼的校正曲線線性范圍為
O.4 3. 2μ g/25mL，硼的校測(cè)限為O. 08ng.此法用于復(fù)合硼肥的分析，結(jié)果令人滿意。這些方法的前處理方法多采用濃硫酸混酸質(zhì)子化的方法處理后進(jìn)高效液相色譜儀測(cè)定的，然而。濃硫酸對(duì)操作者有一定的危險(xiǎn)性，并且易于對(duì)儀器設(shè)備造成腐蝕，目前，關(guān)于水基膠中硼酸的測(cè)定方法，文獻(xiàn)鮮有報(bào)道，而本測(cè)定方法安全、易行并且對(duì)儀器設(shè)備不會(huì)造成損傷。對(duì)于測(cè)定水基膠中硼酸含量具有重現(xiàn)性好、可操作型強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開(kāi)了一種用高效液相色譜法測(cè)定水基膠中硼酸的方法。其特征在于，該方法包括以下步驟
(I)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲振蕩，離心；(2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻；(3)溶液液體采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析；(4)采用峰面積與濃度正比的關(guān)系用外標(biāo)法定量。所述步驟(I)的水基膠樣品的稱樣量為O. l-2g ;加入水的體積為lO-lOOOmL，超聲振蕩時(shí)間10-30min ;離心機(jī)轉(zhuǎn)速4000-12000轉(zhuǎn)；離心時(shí)間為5_30min。所述步驟(2)中溶液上層清液取O. l-2mL ;顯色劑溶液為姜黃素草酸溶液，顯色劑 的用量為2-8mL。所述步驟(2)水浴鍋溫度為30-60度，容量瓶體積為20_100mL。所述步驟(2)中溶劑為甲醇、95%乙醇或無(wú)水乙醇中任意一種。所述步驟⑶色譜柱采用反相色譜柱,流動(dòng)相比例甲醇水=10-90 90-10，色譜柱柱溫20-35°C ;高效液相色譜控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)500-600nm。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為該方法的測(cè)定步驟是經(jīng)過(guò)稀釋、超聲，離心后的試樣中加入姜黃素-草酸顯色劑在水浴鍋上恒溫水浴。蒸干后得到的固體用溶劑溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色譜法測(cè)定硼-姜黃素絡(luò)合物的峰面積，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線從而計(jì)算硼酸的含量。此方法快速可靠，簡(jiǎn)單易行。
具體實(shí)施例方式為便于理解本發(fā)明，本發(fā)明列舉實(shí)施例如下。所述實(shí)施例僅僅是幫助理解本發(fā)明，而不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的具體限制。(I)樣品的前處理準(zhǔn)確稱取Ig水基膠樣品，加入50mL水溶解于IOOmL三角瓶中，超聲振蕩lOmin，離心lOmin。取3mL上層清液加入三角瓶中，(2)溶液配制將上述清液稀釋五倍后，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后，在55度水浴鍋上蒸干，加入乙醇轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，混勻。(2)溶液液體采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析。按照本發(fā)明所確定的方法，將上述溶液，經(jīng)0. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，選擇色譜條件測(cè)定，即可得到水基膠中硼酸的含量。實(shí)施例I按照上述所述方法配制硼酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，將上述得到的標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)0. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，按照本發(fā)明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Extend-C18 ;流動(dòng)相甲醇水(90 10體積比);色譜柱溫25°C；進(jìn)樣量5μ L ;流速lmL/min ;檢測(cè)器紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)550nm。實(shí)施例2按照上述所述方法配制水基膠樣品溶液，將上述得到的標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)0. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，按照本發(fā)明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Rx-C18 ;流動(dòng)相甲醇水(80 20體積比);色譜柱溫35°C ;進(jìn)樣量=IOyL ;流速0. 8mL/min ;檢測(cè)器紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng):550nm。實(shí)施例3稱取O. 5g水基膠樣品,加入5OmL水溶解于IOOmL三角瓶中，超聲5min,經(jīng)離心機(jī)離心5min。取2mL上層清液加入三角瓶中，將上述得到的溶液經(jīng)O. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，按照本發(fā)明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。 其中，色譜柱Ecl ipse XDB ;流動(dòng)相甲醇水(85 15體積比)；色譜柱溫300C ;進(jìn)樣量:20μ L ;流速0. 7mL/min ;檢測(cè)器紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng):550nm。實(shí)施例4稱取Ig水基膠樣品，加入IOOmL水溶解于250mL三角瓶中，振蕩15min，經(jīng)離心機(jī)離心15min。取O. 5mL上層清液加入三角瓶中，將上述得到的溶液經(jīng)O. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，按照本發(fā)明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Ecl ipse Plus ;流動(dòng)相甲醇水(75 15體積比)；色譜柱溫30 0C ;進(jìn)樣量=IOyL ;流速0. 85mL/min ;檢測(cè)器紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng):550nm。實(shí)施例5稱取2g水基膠樣品，加入150mL水溶解于250mL三角瓶中，超聲15min，經(jīng)離心機(jī)離心20min。取ImL上層清液加入三角瓶中，按照上述所述方法配制水基膠樣品溶液，將上述得到的標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)O. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾后注入液相色譜儀，按照本發(fā)明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Z0RBAX ODS ;流動(dòng)相甲醇水(50 50體積比)；色譜柱溫25°C;進(jìn)樣量15 μ L ;流速0. 2mL/min ;檢測(cè)器紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)550nm。
權(quán)利要求
1.一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于，該方法包括以下步驟 (1)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲或振蕩、離心； (2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻； (3)溶液液體采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析； (4)采用峰面積與濃度正比的關(guān)系用外標(biāo)法定量。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于所述步驟(I)的水基膠樣品的稱樣量為O. l-2g ;加入水的體積為lO-lOOOmL，超聲或振蕩時(shí)間10-30min ;離心機(jī)轉(zhuǎn)速4000-12000轉(zhuǎn)；離心時(shí)間為5_30min。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟(2)中溶液中上層清液取O. l-2mL ;顯色劑溶液為姜黃素草酸溶液，顯色劑的用量為 2_8mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟(2)水浴鍋溫度為30-60度，容量瓶體積為20-100mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟(2)中溶劑為甲醇、95%乙醇或無(wú)水乙醇中任意一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟(3)色譜柱采用反相色譜柱，流動(dòng)相比例甲醇水=10-90 90 —10，色譜柱柱溫20— 35°C ;高效液相色譜控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)500_600nmo
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測(cè)定方法。該方法包括以下步驟(1)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲振蕩，離心；(2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻；(3)溶液液體采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析；(4)采用峰面積與濃度正比的關(guān)系用外標(biāo)法定量。該方法在經(jīng)過(guò)稀釋、超聲，離心后的試樣中加入姜黃素-草酸顯色劑在水浴鍋上恒溫水浴。蒸干后得到的固體用溶劑溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色譜法測(cè)定硼-姜黃素絡(luò)合物的峰面積，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線從而計(jì)算硼酸的含量。此方法快速可靠，簡(jiǎn)單易行。
文檔編號(hào)G01N30/06GK102879494SQ20121036297
公開(kāi)日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2012年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月26日
發(fā)明者吳晶晶, 黃泰松, 李小蘭, 陳志燕, 周蕓, 韓云輝, 胡斌, 范忠, 黃世杰, 孟冬玲, 蔣錦峰, 葉長(zhǎng)文 申請(qǐng)人:廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司