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枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液應用的制作方法

文檔序號:258905閱讀:1460來源:國知局
專利名稱:枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液應用的制作方法
技術領域
本發(fā)明屬于肥料領域,具體涉及枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的應用,尤其是枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。
背景技術
枯草菌脂肽鈉是枯草菌脂肽的鈉鹽,枯草菌脂肽譯為Surfactin,是一種由枯草芽孢桿菌合成的環(huán)肽,多以鈉鹽形式應用。自1968年被Arima等人首次發(fā)現(xiàn)以來,Surfactin一直是表面活性最強、研究較多的生物表面活性劑之一,被廣泛應用在農業(yè)、化妝品、食品、醫(yī)藥工業(yè)。在農業(yè)領域,Surfactin按一定比例加入農藥原料后,可以使有效成分苯、二甲苯 均勻分散于水相中形成穩(wěn)定的半透明狀水包油型微乳液,提高農藥使用效果,同時可減少噴施用量,且安全性良好。在化妝品領域,Surfactin按一定比例加入化妝品原料后,使化妝品中各類非水溶物質均勻乳化形成水包油型的乳狀液。具有兩親性結構的Surfactin還擁有極強的增溶能力,Surfactin膠束能把各種微溶或不溶組分吸聚在親脂端,大大增強其溶解度,從而保證化妝品中各種營養(yǎng)活性物質能夠均勻滲透,被皮膚充分吸收。此外,Surfactin發(fā)泡性能強,泡沫豐富細膩,非常穩(wěn)定,無毒無害,與皮膚相容性好,無毒性、無不愉快氣味、無過敏等不良現(xiàn)象,適合作為各類高級化妝品和嬰幼兒洗浴產品的首選基質原料。在食品領域,Surfactin添加于食品后可顯著降低油水兩相界面張力從而形成穩(wěn)定乳池液,賦予其質感和池度。Surfactin還具有助溶,起泡等作用,它可將營養(yǎng)物質穩(wěn)定溶解在食品體系中,并可使飲料具有存在大量微細空氣泡口感良好。并且Surfactin作為天然綠色有機食品添加劑,符合食品衛(wèi)生安全要求。在醫(yī)藥領域,Surfactin按一定比例加入醫(yī)藥原料后,可以在水溶液中形成膠束,顯著增加藥物的溶解度,從而形成穩(wěn)定的透明膠體溶液。Surfactin還可作為乳劑或乳膏劑的助劑,增加制劑的穩(wěn)定性。同時Surfactin具有很強的抗菌溶菌作用和抑制血纖維素凝集作用,Surfactin與磷脂相互作用,誘導脂雙層膜離子通道的形成,可作為陽離子的膜轉移劑。此外,Surfactin還可協(xié)助靶向給藥,大大提高有效成分與靶點的結合率,從而顯著提高藥效。Surfactin除了具有較強的表面活性可以作為良好的生物相容性表面活性劑外,還能增加憎水烴類的可生物降解性,在受烴類污染土壤和海洋的生物修復中發(fā)揮重要作用,它還能與部分重金屬結合而移除受污染土壤和沉積物中的重金屬,并具有一定的抗菌活性等。然而,目前還未見枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑方面相關研究報道。

發(fā)明內容
有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供的枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的應用,即枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。
為實現(xiàn)本發(fā)明的目的,本發(fā)明采用如下技術方案本發(fā)明通過大田試驗考察添加不同量枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復混(合)肥料對水稻肥效生長及產量的影響,從而考察枯草菌脂肽鈉對復合肥的增效效果。結果顯示添加枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復合肥效果顯著增加,株高及實產均超過等養(yǎng)分常規(guī)肥對照組,保持有足夠的生長量。其中添加1. 0wt%和1. 0wt%的枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復合肥效果顯著,尤其以添加1. 2wt%的枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復合肥提高水稻的成穗率,延長有效分蘗期,穗、粒結構最為理想,667m2產量為495. 8公斤,比對照增產61. 1kg,增幅14% ;增收131. 8元,增幅為13. 2%ο因此本發(fā)明提供了枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。本發(fā)明所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液,也可以為枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液粗提物。進一步的,所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的制備方法為將可溶性淀粉、麥芽糖、谷氨酸及輔助物料投入到發(fā)酵罐中配制成發(fā)酵液,再高產菌株經過斜面、種瓶、種罐培養(yǎng)后注入發(fā) 酵液中,在適宜的溫度、溶氧、PH等狀態(tài)下發(fā)酵培養(yǎng)。進一步的,在一些實施例中所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液是按照申請?zhí)枮?01010566490. 3的中國專利公開的方法制備得到,其具體的制備方法包括步驟1:取保藏編號為CGMCC No. 1107的枯草芽孢桿菌E8接種斜面培養(yǎng)基3Γ35 0C培養(yǎng)48 72h,4 °C保藏2 15d,所述斜面培養(yǎng)基配方為牛肉膏2 8g/L、蛋白胨5 15g/L、氯化鈉2 8g/L、瓊脂粉10 25g/L ;步驟2 :取斜面保藏菌落接種于種瓶培養(yǎng)基,3f35°C培養(yǎng)2(T28h,所述種瓶培養(yǎng)基配方為葡萄糖15 25g/L、L-谷氨酸2 10g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5 3g/L ;步驟3 :取種瓶培養(yǎng)物接種于發(fā)酵培養(yǎng)基,31 37°C、15(T350rmp培養(yǎng)24 72h,期間用r3mol/L氫氧化鈉溶液控制發(fā)酵液pH值大于6. 8,所述發(fā)酵培養(yǎng)基配方為葡萄糖或麥芽糖3(T50g/L、可溶性淀粉或糊精3(T50g/L、L-谷氨酸鈉15 25g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5 3g/L。本發(fā)明所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液粗提物為枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液經預處理后制得。其中,所述發(fā)酵液預處理為枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液過濾除菌體,調節(jié)PH值至2飛,(T8°C靜置12^20h以上,收集沉淀,干燥得枯草菌脂肽鈉粗提物。由于枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液具有增效作用,因此本發(fā)明還提供了一種肥料增效劑包含枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液。本發(fā)明所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液也可以直接添加到普通單質肥或復混(合)肥料中。因此本發(fā)明還提供了一種肥料,包含枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液。其中,所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液,也可以為枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液粗提物。所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液和枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液粗提物可以按照上述方法制備的得到。
具體實施例方式本發(fā)明實施例公開了枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的應用。本領域技術人員可以借鑒本文內容,適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是,所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的,它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的應用已經通過較佳實施例進行了描述,相關人員明顯能在不脫離本發(fā)明內容、精神和范圍內對本文所述的應用進行改動或適當變更與組合,來實現(xiàn)和應用本發(fā)明技術。為了進一步理解本發(fā)明,下面結合實施例對本發(fā)明進行詳細說明。實施例1 :枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的制備斜面培養(yǎng)基牛肉膏2 8g/L、蛋白胨5 15g/L、氯化鈉2 8g/L、瓊脂粉l(T25g/L ;種瓶培養(yǎng)基葡萄糖15 25g/L、L-谷氨酸2 10g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5 3g/L ;發(fā)酵培養(yǎng)基葡萄糖或麥芽糖3(T50g/L、可溶性淀粉或糊精3(T50g/L、L-谷氨酸鈉15 25g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5 3g/L。取保藏編號為CGMCC No. 1107的枯草芽孢桿菌E8接種于斜面培養(yǎng)基,31°C培養(yǎng) 48h后,4°C保藏2d,然后取O.1cm2的斜面培養(yǎng)基菌落接種至含50mL種瓶培養(yǎng)基中,31°C培養(yǎng)20h,按1. 0%的接種量轉接至發(fā)酵培養(yǎng)基中,r3mol/L氫氧化鈉溶液控制發(fā)酵液pH值大于6. 8,31°C、150rmp培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液即得。實施例2 :枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液粗提物的制備取實施例1制備得到的枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液,過濾除菌體,發(fā)酵上清液調節(jié)pH值至2. 0,0°C靜置12h,收集沉淀,干燥即得枯草菌脂肽鈉粗提物。實施例3 :含不同量枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復混(合)肥料對水稻肥效試驗1.試驗時間和地點2011年6月-10月在池州市貴池區(qū)烏沙鎮(zhèn)紅莊村何圩組袁學濤承包田實施。2.材料與方法2.1供試土壤試驗田內7點采集土壤混合樣品,土壤為馬肝田。經檢測,PH值6.1,有機質 27. 8g/kg,水解氮 147mg/kg,速效磷 3. 8mg/kg,速效鉀 75mg/kg。2. 2供試肥料含不同量實施例1制得的枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的43%復合肥(23-8-12),由安徽帝元生物科技有限公司加工提供。對照肥45%復合肥、46. 4%尿素、60%氯化鉀由貴池區(qū)秋江農技推廣區(qū)域站提供。2. 3供試作物新8優(yōu)122,雜交粳稻,做單季稻栽培。2. 4試驗方案與方法試驗設3個對照,8個處理,3次重復,小區(qū)隨機排列,長6米X寬3. 3米,面積20平方米。重復間有排灌溝,小區(qū)間用塑料薄膜包埂。各小區(qū)單獨收害I]、單獨脫粒,分別稱重。處理如表I所示。表I試驗處理
權利要求
1.枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。
2.根據(jù)權利要求1所述應用,其特征在于,所述枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液制備方法包括 步驟1:取保藏編號為CGMCC No. 1107的枯草芽孢桿菌E8接種斜面培養(yǎng)基31 35°C培養(yǎng)48 72h,4°C保藏2 15d,所述斜面培養(yǎng)基配方為牛肉膏2 8g/L、蛋白胨5 15g/L、氯化鈉2 8g/L、瓊脂粉10 25g/L ; 步驟2 :取斜面保藏菌落接種于種瓶培養(yǎng)基,3f35°C培養(yǎng)2(T28h,所述種瓶培養(yǎng)基配方為葡萄糖15 25g/L、L-谷氨酸2 10g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5^3g/L ;步驟3 :取種瓶培養(yǎng)物接種于發(fā)酵培養(yǎng)基,3f37°C、15(T350rmp培養(yǎng)24 72h,期間用r3mol/L氫氧化鈉溶液控制發(fā)酵液pH值大于6. 8,所述發(fā)酵培養(yǎng)基配方為葡萄糖或麥芽糖3(T50g/L、可溶性淀粉或糊精3(T50g/L、L-谷氨酸鈉15 25g/L、磷酸二氫鉀O. 5 2g/L、酵母提取物O. 5 3g/L。
3.—種肥料增效劑,其特征在于,包含枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液。
4.一種肥料,其特征在于,包含枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液。
全文摘要
本發(fā)明屬于肥料領域,公開了枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液新應用,即枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。本發(fā)明通過大田試驗考察添加不同量枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復混(合)肥料對水稻肥效生長及產量的影響,從而考察枯草菌脂肽鈉對復合肥的增效效果。結果顯示添加枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液的復合肥效果顯著增加,株高及實產均超過等養(yǎng)分常規(guī)肥對照組,保持有足夠的生長量。因此本發(fā)明提供了枯草菌脂肽鈉發(fā)酵液在制備肥料增效劑中的應用。
文檔編號C05G3/00GK103011978SQ20121058135
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月27日 優(yōu)先權日2012年12月27日
發(fā)明者陳天河, 張一言, 王永國, 丁仕奇, 孫文, 葉郭剛, 龔有初, 徐汝民 申請人:安徽帝元生物科技有限公司
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