一種血小板保存液的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一種血小板保存液,制備方法為:將二甲基亞砜即DMSO與新鮮注射用水配置成體積濃度為100~50%的溶液,然后攪拌均勻,加入藥用炭;然后將所得溶液經(jīng)鈦棒過(guò)濾脫碳后,先經(jīng)0.45um的微孔濾膜過(guò)濾,再經(jīng)0.22um的微孔濾膜過(guò)濾,即得所述血小板保存液。本保存液能夠在低溫下保持血小板的生理功能,且本身無(wú)毒副作用,對(duì)受體的損傷控制在最低范圍內(nèi)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種血小板保存液
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,尤其是涉及一種用于體外低溫保存血小板的保存液。
【背景技術(shù)】
[0002] 血小板是血液重要的組成成分,參與機(jī)體凝血過(guò)程,發(fā)揮正常的止血功能,防止損 傷后血液丟失;同時(shí),血小板也參與炎癥、免疫及支持內(nèi)皮完整性的功能。血小板在在4°C 儲(chǔ)存時(shí),活性很快下降,6h后約有40%的活性,12h后僅有20%的活性。室溫儲(chǔ)存的血小板 容易失去止血功能,室溫相對(duì)較高,很難控制細(xì)菌的污染,由細(xì)菌污染血小板的輸注而引起 的敗血癥休克一直是一個(gè)嚴(yán)重的臨床問(wèn)題。如何保護(hù)血小板的活性、提高其在體外的存活 率,如何延長(zhǎng)血小板的保存期以及減少或杜絕細(xì)菌的污染等,是血小板保存面臨的重要問(wèn) 題。
[0003] 冷凍時(shí)細(xì)胞損傷的主要原因是在快速冷凍時(shí),細(xì)胞內(nèi)形成許多冰晶,冰晶作用于 細(xì)胞膜并使細(xì)胞膜上形成小孔,使得細(xì)胞膜不可逆的喪失其半透性從而失去活性。玻璃化 是保存生物材料最有效的方法,由液態(tài)向固態(tài)轉(zhuǎn)化過(guò)程中沒(méi)有相變熱產(chǎn)生,也就沒(méi)有晶體 產(chǎn)生,在玻璃化狀態(tài)下可以長(zhǎng)期保持血細(xì)胞的功能與活性,抑制冰晶形成,可避免細(xì)胞內(nèi)外 溶質(zhì)的濃縮給細(xì)胞造成損傷,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。
[0004] DMSO不僅對(duì)血小板保存效果好,而且低濃度的DMSO對(duì)人體沒(méi)有副作用以及制作 方便,輸注時(shí)不用洗滌;同時(shí),DMSO還有具有一定的抑菌和抗血小板凝集作用,可明顯防止 微循環(huán)堵塞。因此探索血小板低溫保存已成為一個(gè)非常有意義的課題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題,本 申請(qǐng)人:提供了一種血小板保存液。本保存液能 夠在低溫下保持血小板的高生物活性,且本身的生物毒性小,對(duì)受體的損傷控制在最低范 圍內(nèi)。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007] -種血小板保存液,制備方法為:
[0008] 將二甲基亞砜即DMSO與新鮮注射用水配置成體積濃度為100?50 %的溶液,然后 攪拌均勻,加入藥用炭;然后將所得溶液經(jīng)鈦棒過(guò)濾脫碳后,先經(jīng)〇. 45um的微孔濾膜過(guò)濾, 再經(jīng)0. 22um的微孔濾膜過(guò)濾,即得所述血小板保存液。
[0009] 所述藥用炭的用量為每IOOOml血小板保存液中加入2?IOg藥用炭。
[0010] 將所得血小板保存液在-14?-KTC下保存3?3. 5h,然后在10?14°C下保存 3?3. 5h,如此反復(fù)循環(huán)1?3次,最后置于室溫保存。
[0011] 本發(fā)明有益的技術(shù)效果在于:
[0012] 本發(fā)明使用藥用炭是用來(lái)吸附去除DMSO和注射用水中的熱源,以免熱量破壞血 小板的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。本發(fā)明對(duì)制備好的血小板保存液進(jìn)行冷凍和融化處理,可以在微觀形態(tài) 上改變保存液的空間立體結(jié)構(gòu),使其在血小板細(xì)胞內(nèi)部更好的發(fā)揮玻璃化作用。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 實(shí)施例1
[0014] 本血小板保存液的制備方法為:
[0015] 將二甲基亞砜即DMSO與新鮮注射用水配置成體積濃度為50%的溶液,然后攪拌 均勻,加入藥用炭;然后將所得溶液經(jīng)鈦棒過(guò)濾脫碳后,先經(jīng)0. 45um的微孔濾膜過(guò)濾,再經(jīng) 0. 22um的微孔濾膜過(guò)濾,即得所述血小板保存液。其中藥用炭的用量為為每IOOOml血小板 保存液中加入2g藥用炭。
[0016] 實(shí)施例2
[0017] 本血小板保存液的制備方法為:
[0018] 將二甲基亞砜即DMSO與新鮮注射用水配置成體積濃度為85%的溶液,然后攪拌 均勻,加入藥用炭;然后將所得溶液經(jīng)鈦棒過(guò)濾脫碳后,先經(jīng)0. 45um的微孔濾膜過(guò)濾,再經(jīng) 0. 22um的微孔濾膜過(guò)濾,即得所述血小板保存液。其中藥用炭的用量為為每IOOOml血小板 保存液中加入IOg藥用炭。
[0019] 實(shí)施例3
[0020] 將實(shí)施例1所得血小板保存液在-14°C下保存3h,然后在14°C下保存3h,如此反 復(fù)循環(huán)1次,最后置于室溫保存。
[0021] 實(shí)施例4
[0022] 將實(shí)施例1所得血小板保存液在-KTC下保存3. 5h,然后在KTC下保存3. 5h,如 此反復(fù)循環(huán)3次,最后置于室溫保存。
[0023] 測(cè)試?yán)?br>
[0024] 將實(shí)施例1?4所得的血小板保存液分別與大鼠血小板按照表1的比例混合。表 1中的單位為血小板保存液在血小板液體中的體積濃度。
[0025] 表 1
【權(quán)利要求】
1. 一種血小板保存液,其特征在于制備方法為: 將二甲基亞砜即DMSO與新鮮注射用水配置成體積濃度為100?50 %的溶液,然后攪拌 均勻,加入藥用炭;然后將所得溶液經(jīng)鈦棒過(guò)濾脫碳后,先經(jīng)0. 45um的微孔濾膜過(guò)濾,再經(jīng) 0. 22um的微孔濾膜過(guò)濾,即得所述血小板保存液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血小板保存液,其特征在于所述藥用炭的用量為每1000ml血 小板保存液中加入2?10g藥用炭。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血小板保存液,其特征在于將所得血小板保存液 在-14?-10°C下保存3?3. 5h,然后在10?14°C下保存3?3. 5h,如此反復(fù)循環(huán)1?3 次,最后置于室溫保存。
【文檔編號(hào)】A01N1/02GK104222067SQ201410410653
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月19日
【發(fā)明者】王布強(qiáng), 劉丹 申請(qǐng)人:江陰金悅達(dá)生物技術(shù)有限公司