本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物，尤其涉及一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)：

1、當(dāng)歸(angelica?sinensis(oliv.)diels)為傘形科多年生草本植物，主產(chǎn)于甘肅東南部，以岷縣產(chǎn)量多，質(zhì)量好，其次為云南、四川、陜西等省，其干燥根是一味常用的中藥材，具有補(bǔ)血和血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)燥滑腸、免疫之功效。當(dāng)歸不僅能夠用于治病，還能夠用于保健和美容，其也是中國(guó)出口創(chuàng)匯的主要藥用植物之一，需求量逐年增加。

2、目前當(dāng)歸主要采用傳統(tǒng)的繁殖方法來育種或育苗，但傳統(tǒng)的繁殖方法的繁殖系數(shù)低，且幼苗生長(zhǎng)緩慢，特別是在早期生長(zhǎng)階段，幼苗對(duì)環(huán)境條件較為敏感，易受病蟲害侵襲以及惡劣氣候條件的影響，導(dǎo)致在育苗過程中的種苗的損失率較高，進(jìn)而不能滿足市場(chǎng)發(fā)展的需求，難以實(shí)現(xiàn)大規(guī)?；a(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法，該組織培養(yǎng)方法不受季節(jié)和地域的限制，所得到的種苗的存活率高，且僅需具備相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和技術(shù)條件就能夠全年進(jìn)行當(dāng)歸種苗的生產(chǎn)，滿足了市場(chǎng)需求，也實(shí)現(xiàn)了大規(guī)?；a(chǎn)。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明公開了一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法，所述方法包括：

4、s1：獲取消毒后的當(dāng)歸種子，將所述消毒后的當(dāng)歸種子在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，得到組培苗，獲取所述組培苗的胚軸作為外植體；

5、s2：將所述外植體在愈傷培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到愈傷組織；

6、s3：將所述愈傷組織在繼代培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；

7、s4：將所述不定芽在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到完整植株。

8、可能的實(shí)施方式中，在所述獲取消毒后的當(dāng)歸種子之前，還包括獲取當(dāng)歸種子，并對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行催芽處理。

9、可能的實(shí)施方式中，所述催芽處理包括：將所述當(dāng)歸種子在預(yù)設(shè)溫度下浸泡預(yù)設(shè)時(shí)間，所述預(yù)設(shè)溫度為25～35℃，所述預(yù)設(shè)時(shí)間為12～18h。

10、可能的實(shí)施方式中，所述步驟s1中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括ms培養(yǎng)基、瓊脂和蔗糖。

11、可能的實(shí)施方式中，所述步驟s2中的愈傷培養(yǎng)基包括第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第一植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第一植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-芐氨基嘌呤和/或萘乙酸。

12、可能的實(shí)施方式中，所述愈傷培養(yǎng)基至少滿足下述條件的至少之一：

13、所述第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括ms培養(yǎng)基；

14、在所述愈傷培養(yǎng)基中，所述第一植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-芐氨基嘌呤和萘乙酸；

15、在所述愈傷培養(yǎng)基中，所述6-芐氨基嘌呤的濃度為3～4mg/l；

16、在所述愈傷培養(yǎng)基中，所述萘乙酸的濃度為0.4～0.6mg/l。

17、可能的實(shí)施方式中，所述步驟s3中的繼代培養(yǎng)基包括第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第二植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第二植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括6-芐氨基嘌呤、萘乙酸和吲哚丁酸中的至少一種。

18、可能的實(shí)施方式中，所述繼代培養(yǎng)基至少滿足下述特征的至少之一：

19、所述第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括2/3ms培養(yǎng)基，所述2/3ms培養(yǎng)基是指ms培養(yǎng)基中的大量元素減少為原來的2/3所得到的培養(yǎng)基；

20、所述第二植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-芐氨基嘌呤、萘乙酸和吲哚丁酸；

21、在所述繼代培養(yǎng)基中，所述6-芐氨基嘌呤的濃度為0.4～0.6mg/l；

22、在所述繼代培養(yǎng)基中，所述萘乙酸的濃度為0.05～0.15mg/l；

23、在所述繼代培養(yǎng)基中，所述吲哚丁酸的濃度為0.1～0.3mg/l。

24、可能的實(shí)施方式中，所述步驟s4中的生根培養(yǎng)基包括第三基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第三植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第三植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括6-芐氨基嘌呤、吲哚丁酸和活性炭中的至少一種。

25、可能的實(shí)施方式中，所述生根培養(yǎng)基滿足下述特征的至少之一：

26、所述第三基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括1/2ms培養(yǎng)基，所述1/2ms培養(yǎng)基是指ms培養(yǎng)基中的大量元素減半所得到的培養(yǎng)基；

27、在所述生根培養(yǎng)基中，所述第三植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-芐氨基嘌呤、吲哚丁酸和活性炭；

28、在所述生根培養(yǎng)基中，所述6-芐氨基嘌呤的濃度為0.3～0.5mg/l；

29、在所述生根培養(yǎng)基中，所述吲哚丁酸的濃度為0.1～0.2mg/l；

30、在所述生根培養(yǎng)基中，所述活性炭的濃度為0.4～0.6g/l。

31、可能的實(shí)施方式中，在所述步驟s1-s4的培養(yǎng)的過程中，均需光照培養(yǎng)，所述光照培養(yǎng)滿足下述特征的至少之一：

32、所述光照培養(yǎng)過程中的光照時(shí)長(zhǎng)均為12～16h；

33、所述光照培養(yǎng)過程中的光照強(qiáng)度均為3000～5000lx；

34、所述光照培養(yǎng)過程中的溫度均為20～26℃。

35、可能的實(shí)施方式中，在所述步驟s1-s2的培養(yǎng)的過程中，均需先暗培養(yǎng)再光照培養(yǎng)，所述方法包括下述特征的至少之一：

36、在所述步驟s1-s2的培養(yǎng)的過程中，暗培養(yǎng)的時(shí)間為5～7天；

37、在所述步驟s1-s2的培養(yǎng)的過程中，暗培養(yǎng)所采用的溫度為20～26℃；

38、所述步驟s1-s4中的培養(yǎng)基的ph值均保持在5～6。

39、可能的實(shí)施方式中，所述獲取消毒后的當(dāng)歸種子包括：獲取當(dāng)歸種子，并對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行消毒處理，得到消毒后的當(dāng)歸種子，在對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行消毒處理的過程中，需將所述當(dāng)歸種子在除菌溶液中浸泡預(yù)設(shè)時(shí)間，所述方法滿足下述特征的至少之一：

40、所述當(dāng)歸種子浸泡的預(yù)設(shè)時(shí)間為8～16min；

41、所述除菌溶液的濃度為2～4％；

42、所述除菌溶液為次氯酸鈉溶液。

43、基于上述技術(shù)方案，本申請(qǐng)具有以下有益效果：本發(fā)明的技術(shù)方案提供了一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法，該方法包括：獲取消毒后的當(dāng)歸種子，將消毒后的當(dāng)歸種子在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，得到組培苗，獲取組培苗的胚軸作為外植體，之后將外植體在愈傷培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到愈傷組織，再將愈傷組織在繼代培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽，最后將不定芽在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到完整植株；采用該方法培育出的當(dāng)歸種苗存活率高，且不受季節(jié)和地域的限制，即能培養(yǎng)出大批量的當(dāng)歸種苗，并且該方法易操作，生產(chǎn)成本較低，不污染環(huán)境，采用該方法建立了穩(wěn)定、高效的組織再生培養(yǎng)體系，可實(shí)現(xiàn)大規(guī)?；a(chǎn)，并且也為當(dāng)歸的品種改良和種質(zhì)創(chuàng)新提供了靈活的技術(shù)平臺(tái)，可以方便地引入現(xiàn)代基因工程等先進(jìn)技術(shù)手段進(jìn)行新品種培育。

技術(shù)特征：

1.一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述獲取消毒后的當(dāng)歸種子之前，還包括獲取當(dāng)歸種子，并對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行催芽處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述催芽處理包括：將所述當(dāng)歸種子在預(yù)設(shè)溫度下浸泡預(yù)設(shè)時(shí)間，所述預(yù)設(shè)溫度為25～35℃，所述預(yù)設(shè)時(shí)間為12～18h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟s1中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括ms培養(yǎng)基、瓊脂和蔗糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟s2中的愈傷培養(yǎng)基包括第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第一植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第一植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-芐氨基嘌呤和/或萘乙酸。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述愈傷培養(yǎng)基至少滿足下述條件的至少之一：

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟s3中的繼代培養(yǎng)基包括第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第二植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第二植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括6-芐氨基嘌呤、萘乙酸和吲哚丁酸中的至少一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述繼代培養(yǎng)基至少滿足下述特征的至少之一：

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述步驟s4中的生根培養(yǎng)基包括第三基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第三植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，所述第三植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑包括6-芐氨基嘌呤、吲哚丁酸和活性炭中的至少一種。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基滿足下述特征的至少之一：

11.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述步驟s1-s4的培養(yǎng)的過程中，均需光照培養(yǎng)，所述光照培養(yǎng)滿足下述特征的至少之一：

12.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述步驟s1-s2的培養(yǎng)的過程中，均需先暗培養(yǎng)再光照培養(yǎng)，所述方法包括下述特征的至少之一：

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述獲取消毒后的當(dāng)歸種子包括：獲取當(dāng)歸種子，并對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行消毒處理，得到消毒后的當(dāng)歸種子，在對(duì)所述當(dāng)歸種子進(jìn)行消毒處理的過程中，需將所述當(dāng)歸種子在除菌溶液中浸泡預(yù)設(shè)時(shí)間，所述方法滿足下述特征的至少之一：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種當(dāng)歸的植物組織再生培養(yǎng)方法。該方法包括：獲取消毒后的當(dāng)歸種子，將消毒后的當(dāng)歸種子在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng)，得到組培苗，獲取組培苗的胚軸作為外植體，之后將外植體在愈傷培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到愈傷組織，再將愈傷組織在繼代培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽，最后將不定芽在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到完整植株；采用該方法培育出的當(dāng)歸種苗存活率高，且不受季節(jié)和地域的限制，即能培養(yǎng)出大批量的當(dāng)歸種苗，并且該方法易操作，生產(chǎn)成本較低，不污染環(huán)境。

技術(shù)研發(fā)人員：陳鳳丹,林昊維
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廈門新格諾康生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15