本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有保健功能的調(diào)味料。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的調(diào)味料品種繁多，但一般的調(diào)味料功能比較單一，如味精、雞精、香料等都僅起到調(diào)節(jié)口感的作用。 人們?cè)谧鰶霾嘶驔銎?（ 如涼面、涼米線、涼卷粉、涼豌豆粉等）時(shí)，要進(jìn)行調(diào)料配制，其調(diào)出的料味因人而異。但目前的調(diào)味料，大多數(shù)通過人造食品添加劑來呈現(xiàn)其風(fēng)味，長(zhǎng)期食用對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生副作用，且不具有保健功能，不能夠通過人們的日常飲食來達(dá)到保健的效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明提供一種具有保健功能的調(diào)味料，本發(fā)明采用純天然的原料制備，含鹽量低，具有豐富的呈鮮味的成分，不存在人造食品添加劑，富含具有保健營養(yǎng)功能的活性組分，能夠起到提高免疫力、降血壓的功效，是一種原生態(tài)的保健調(diào)味料。
本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種具有保健功能的調(diào)味料，調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 80-110，水 100-135，活性組分A 40- 60，活性組分B 50- 70，陳醋 40- 60，鹽 3- 5，姜沫 8- 10，蒜 8- 10，芝麻油3- 5，花椒油 3- 5，胡椒粉 3- 5，活性組分C 3- 5。
進(jìn)一步的，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 52，活性組分B 58，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 3。
進(jìn)一步的，所述活性組分A為鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物，所述鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取鰩魚軟骨攪碎，使料水比為1:2-1:8(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.0-3.5以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為1200-1500U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、100-130 r/min振蕩酶解1.5-2.5 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.0-9.0，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為4500-6000 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為4:1-6:1，所述料水比1:3-1:6，酶解時(shí)間為3-4.5 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過真空冷凍干燥，設(shè)置干燥條件為預(yù)冷溫度-30℃,預(yù)冷時(shí)間2h，加熱溫度從-10℃開始18h后緩慢升溫,達(dá)到25℃,并保持到干燥終點(diǎn)，得到鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物。
更進(jìn)一步的，所述活性組分A為鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物，所述鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取鰩魚軟骨攪碎，使料水比為1:3(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.5以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為1300 U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、110 r/min振蕩酶解2 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.5，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為5200 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為5:1，所述料水比1:4.5，酶解時(shí)間為3.5 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過真空冷凍干燥，設(shè)置干燥條件為預(yù)冷溫度-30℃,預(yù)冷時(shí)間2h，加熱溫度從-10℃開始18h后緩慢升溫,達(dá)到25℃,并保持到干燥終點(diǎn)，得到鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物。
本發(fā)明中，所述金槍魚下腳料包括魚頭，內(nèi)臟，鰓，暗色肉和魚皮。
進(jìn)一步的，所述活性組分B為金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物，所述金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取金槍魚下腳料攪碎混合，使料水比為1:1-1:2(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.0以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為800-1000U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、75-105 r/min振蕩酶解1-1.5 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.0-9.0，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為2500-3500 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為6:1-8:1，所述料水比1:2-1:4，酶解時(shí)間為2.5-3.5 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過噴霧干燥的方式，設(shè)置干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度160℃,進(jìn)樣速度為50ml/min,離心霧化器轉(zhuǎn)速為25000r/min，得到金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物。
更進(jìn)一步的，所述活性組分B為金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物，所述金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取金槍魚下腳料攪碎混合，使料水比為1:1.5(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.0以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為880U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、85 r/min振蕩酶解1.3 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.2，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為2900 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為7:1，所述料水比1:2.5，酶解時(shí)間為2.8 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過噴霧干燥的方式，設(shè)置干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度160℃,進(jìn)樣速度為50ml/min,離心霧化器轉(zhuǎn)速為25000r/min，得到 金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物。
進(jìn)一步的，所述活性組分C為唐松草菌體粗提物，所述唐松草菌體粗提物的制備方法為：取新鮮植物的根、莖、葉分別洗凈至沒有明顯的雜質(zhì)，表面消毒處理后，接種至 PDA（分離內(nèi)生真菌）和高氏一號(hào)培養(yǎng)基（分離內(nèi)生放線菌）上培養(yǎng) 5-7 d，然后分離獲取菌落；從活化斜面中挑取菌絲塊接種于裝有 100 mL 發(fā)酵培養(yǎng)基的錐形瓶中，置 30℃，150 r/min 搖床振蕩培養(yǎng)3 d；發(fā)酵培養(yǎng)物除去菌體，濾液用等體積乙酸乙酯萃取 3 次，合并有機(jī)相，45 ℃ 減壓濃縮蒸干，即為混合菌液粗提物；離心和過濾得到的菌體，用適量 95%乙醇冷凝回流 3 次，合并乙醇相，減壓濃縮蒸干，即為菌體粗提物。
上述技術(shù)方案中，所述的運(yùn)動(dòng)營養(yǎng)保健品的制備方法為 ：按配比，將各組分混合，攪拌分散均勻后即可得成品。
本發(fā)明所述的具有保健功能的調(diào)味料，配方合理，活性組分中富含谷氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸，能夠呈現(xiàn)出最自然的風(fēng)味，并且調(diào)味料中各活性組分之間不易發(fā)生化學(xué)反應(yīng)且具 有協(xié)同增效作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明充分利用這些物質(zhì)的相互作用全方位來呈現(xiàn)食品的風(fēng)味，另外，本發(fā)明經(jīng)驗(yàn)證，長(zhǎng)久食用可達(dá)到增強(qiáng)免疫力和降血壓的效果。基于本發(fā)明中主要活性組分采用模擬人體胃腸消化的方式制得，配合從植物體內(nèi)提取出的活性菌體成分，活性菌體成分進(jìn)入腸道內(nèi)，一方面可以在腸道內(nèi)定殖，維持腸道微生物菌群的平衡；另一方面是活性菌體成分與鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物以及金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物共同作用于宿主的免疫系統(tǒng)，誘發(fā)腸道免疫，并刺激胸腺，脾臟等免疫器官，促進(jìn)巨噬細(xì)胞活性，通過增強(qiáng)B、T淋巴細(xì)胞對(duì)抗原刺激的反應(yīng)性，發(fā)揮特異性免疫活性，從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，易于被人體吸收，條件98%低齡人群長(zhǎng)期服用無不適癥狀。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
實(shí)施例1
一種具有保健功能的調(diào)味料，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 52，活性組分B 58，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 3。
進(jìn)一步的，所述活性組分A為鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物，所述鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取鰩魚軟骨攪碎，使料水比為1:3(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.5以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為1300 U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、110 r/min振蕩酶解2 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.5，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為5200 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為5:1，所述料水比1:4.5，酶解時(shí)間為3.5 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過真空冷凍干燥，設(shè)置干燥條件為預(yù)冷溫度-30℃,預(yù)冷時(shí)間2h，加熱溫度從-10℃開始18h后緩慢升溫,達(dá)到25℃,并保持到干燥終點(diǎn)，得到鰩魚軟骨酶解產(chǎn)物。
進(jìn)一步的，所述活性組分B為金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物，所述金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物的制備方法為：S1.取金槍魚下腳料攪碎混合，使料水比為1:1.5(w/v)，用2 mol/L鹽酸將溶液pH值調(diào)至2.0以呈現(xiàn)胃部酸堿環(huán)境，以酶與底物濃度比為880U/g加入胃蛋白酶，在恒溫水浴振蕩器中保持37 ℃、85 r/min振蕩酶解1.3 h，在此條件下獲得經(jīng)胃蛋白酶酶解的初產(chǎn)物；S2.用2 mol/L的氫氧化鈉將經(jīng)胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值調(diào)至8.2，保持37 ℃酶解溫度，復(fù)合酶添加量為2900 U/g， 所述復(fù)合酶中胰蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的質(zhì)量比為7:1，所述料水比1:2.5，酶解時(shí)間為2.8 h，酶解結(jié)束后，在100℃沸水浴中滅酶10min；將S2中的酶解產(chǎn)物通過噴霧干燥的方式，設(shè)置干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度160℃,進(jìn)樣速度為50ml/min,離心霧化器轉(zhuǎn)速為25000r/min，得到 金槍魚下腳料酶解產(chǎn)物。
進(jìn)一步的，所述活性組分C為唐松草菌體粗提物，所述唐松草菌體粗提物的制備方法為：取新鮮植物的根、莖、葉分別洗凈至沒有明顯的雜質(zhì)，表面消毒處理后，接種至 PDA（分離內(nèi)生真菌）和高氏一號(hào)培養(yǎng)基（分離內(nèi)生放線菌）上培養(yǎng) 5-7 d，然后分離獲取菌落；從活化斜面中挑取菌絲塊接種于裝有 100 mL 發(fā)酵培養(yǎng)基的錐形瓶中，置 30℃，150 r/min 搖床振蕩培養(yǎng)3 d；發(fā)酵培養(yǎng)物除去菌體，濾液用等體積乙酸乙酯萃取 3 次，合并有機(jī)相，45 ℃ 減壓濃縮蒸干，即為混合菌液粗提物；離心和過濾得到的菌體，用適量 95%乙醇冷凝回流 3 次，合并乙醇相，減壓濃縮蒸干，即為菌體粗提物。
實(shí)施例2
本實(shí)施例提供一種具有保健功能的調(diào)味料，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 40，活性組分B 50，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 3。
本實(shí)施例中活性組分A、活性組分B、活性組分C的成分及制備方式與實(shí)施例1一致。
實(shí)施例3
本實(shí)施例提供一種具有保健功能的調(diào)味料，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 60，活性組分B 70，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 5 。
本實(shí)施例中活性組分A、活性組分B、活性組分C的成分及制備方式與實(shí)施例1一致。
實(shí)施例4
本實(shí)施例提供一種具有保健功能的調(diào)味料，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 40，活性組分B 70，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 3。
本實(shí)施例中活性組分A、活性組分B、活性組分C的成分及制備方式與實(shí)施例1一致。
實(shí)施例5
本實(shí)施例提供一種具有保健功能的調(diào)味料，所述調(diào)味料的原料重量份配比為 ：木糖醇 95，水 113，活性組分A 60，活性組分B 50，陳醋51，鹽 3，姜沫 8，蒜 8，芝麻油 4，花椒油5，胡椒粉 3，活性組分C 5。
本實(shí)施例中活性組分A、活性組分B、活性組分C的成分及制備方式與實(shí)施例1一致。
效果實(shí)施例
1.增強(qiáng)免疫力效果實(shí)驗(yàn)
將通過實(shí)施例1制得的具有保健功能的調(diào)味料各組分混合，濃縮干燥后制備成粉末狀，作為測(cè)試樣品。
對(duì)照品：天美健牌大豆肽蛋白粉；來源：北京同仁堂健康藥業(yè)股份有限公司；成人臨床推薦用量：0.167g.kg-1.d-1。
受試動(dòng)物品系和級(jí)別：BALB/c小鼠，Hartley豚鼠，SPF級(jí)；數(shù)量及性別：BALB/c 小鼠60只，雄性； Hartley豚鼠6只，均可。購入體重BALB/c小鼠17-19g，Hartley豚鼠250-350g。由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（粵）2013-0002。實(shí)驗(yàn)期間，小鼠自由進(jìn)食飲水，每天觀察小鼠狀態(tài)。
根據(jù)樣品的基本情況進(jìn)行劑量設(shè)計(jì)，樣品低、中、高按成人臨床用量的5倍、10倍、20倍設(shè)計(jì)劑量，分別為0.15g.kg-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1；陽性對(duì)照組劑量按成人推薦劑量的5倍設(shè)計(jì)，為0.835g.kg-1.d-1。將60只雄性小鼠隨機(jī)各分為5組（陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組、受試樣品低、中、高劑量組），每組12只，其中2只作為備用動(dòng)物。各組小鼠每天按0.1mL/10g體重灌胃相應(yīng)樣品液，陰性對(duì)照組給予等量純凈水，每天1次，連續(xù)給藥30天。試驗(yàn)開始、試驗(yàn)結(jié)束均稱量體重1次，試驗(yàn)期間每周稱量體重1次。
小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
末次給藥1h，無菌取脾置于盛有RPMI-1640培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，并放置200目篩網(wǎng)，用注射器活塞在其上方研磨制成脾細(xì)胞懸液，分裝脾細(xì)胞懸液至加有淋巴細(xì)胞分離液的離心管中。400g，20℃下離心20min，離心完畢，取出離心管中淋巴細(xì)胞層離心管，加入RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌數(shù)次，250g，4℃下離心10min。洗滌完畢后，棄去上清液，加入完全培養(yǎng)基，吹打均勻，用臺(tái)盼蘭染色計(jì)數(shù)保證95%以上活細(xì)胞率，將細(xì)胞濃度調(diào)整為3×106個(gè)/ml。
將每份脾細(xì)胞懸液分兩孔加入48孔培養(yǎng)板中，每孔0.5ml，一孔加25 ul ConA液（相當(dāng)于5ug/ml），另一孔作為對(duì)照，置于5%CO2,37℃CO2孵箱中培養(yǎng)48h后每孔輕輕吸去上清液0.3 ml，加入0.3 mlRPMI-1640培養(yǎng)液，同時(shí)加入CCK 8 試劑50 ul/孔，繼續(xù)培養(yǎng)2 h。結(jié)束培養(yǎng)后，吹打均勻，然后分裝到96孔培養(yǎng)板中，每孔作3個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，用酶標(biāo)儀測(cè)450 nm波長(zhǎng)下的光密度值。淋巴細(xì)胞的增殖能力由加ConA孔的光密度值與不加ConA 孔的光密度值的差值表示。
小鼠體液免疫功能（血清溶血素）影響
給藥25天，用生理鹽水洗滌(2000r/min，10min)已脫纖維的羊血3次，在壓積SRBC中加入生理鹽水配成2%（v/v）的細(xì)胞懸液，每只小鼠腹腔注射0.2ml，第30天時(shí)，給藥1h后，稱重，所有小鼠摘除眼球取血0.8ml于離心管，靜置1h，離心2000r/min，10min，收集血清。頸椎脫臼處死小鼠。用SA緩沖液稀釋300倍的血清取1ml置試管內(nèi)，再一次加入10%（v/v）SRBC0.5ml、用SA緩沖液稀釋9倍的補(bǔ)體1ml，設(shè)置對(duì)照管（用SA代替血清），37℃恒溫水浴20min，再冰浴，然后離心2000r/min，10min。取上清液1ml于新試管，加3.75ml都氏試劑、0.25ml10%（v/v）SRBC，充分混勻，靜置10min，以對(duì)照管為空白，540nm處分別測(cè)定各管光密度值，溶血素的量以半數(shù)溶血值（HC50）表示。
小鼠體液免疫（抗體生成細(xì)胞）的影響
給藥25天，用生理鹽水洗滌已脫纖維的羊血3次，每次離心2000r/min，10min，在壓積SRBC中加入生理鹽水配成2%（v/v）的細(xì)胞懸液，每只小鼠腹腔注射0.2ml，第30天時(shí)，給藥1h后，稱重。頸椎脫臼處死小鼠后，取出脾臟，置于放有Hank’s液平皿中，經(jīng)過200目篩網(wǎng)過濾后，再用Hank’s液洗滌兩次，加入到5mL RPMI-1640培養(yǎng)液中將細(xì)胞懸浮，計(jì)數(shù)細(xì)胞，且調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL。
將1g瓊脂糖加雙蒸水至100mL形成的表層培養(yǎng)基加熱溶解后，40-45℃水浴保溫.與PH7.2-7.4、2倍Hank’s液等體積混合，搖勻，每管0.5mL分裝不同的試管，繼續(xù)向每管加入用SA緩沖液配制成的10％SRBC(v/v） 50ul和脾細(xì)胞懸液 20ul，快速混勻，傾倒于涂有一層薄薄的瓊脂糖的薄片上，做平行片，等到瓊脂糖凝固后，將薄片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)1-1.5h后，將用SA緩沖液稀釋了9倍的補(bǔ)體加到玻片架的凹槽內(nèi)，繼續(xù)培養(yǎng)1-1.5h，然后計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。
小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能及免疫器官影響的測(cè)定
末次給藥1h，按體重從尾靜脈注射用生理鹽水1:3稀釋的印度墨汁（10mL/kg），待墨汁注入，立即計(jì)時(shí)。注入墨汁后2、10min，分別從眼眶靜脈叢采血20μL，并立即加到2mL 0.1％Na2CO3溶液中，以Na2CO3溶液作空白對(duì)照，用分光光度計(jì)在600nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度值（OD），計(jì)算吞噬指數(shù)a。
小鼠采血后脫臼處死，解剖取肝臟、脾臟和胸腺，濾紙吸干臟器周圍血液后，精密稱重，計(jì)算臟器/體重比值。
NK細(xì)胞活性測(cè)定
末次給藥1h，無菌取脾，無菌取脾置于盛有RPMI-1640培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，并放置200目篩網(wǎng)，用注射器活塞在其上方研磨制成脾細(xì)胞懸液，分裝脾細(xì)胞懸液至加有淋巴細(xì)胞分離液的離心管中。400g，20℃下離心20min，離心完畢，取出離心管中淋巴細(xì)胞層離心管，加入RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌數(shù)次，250g，4℃下離心10min。洗滌完畢后，棄去上清液，加入完全培養(yǎng)基，吹打均勻，用臺(tái)盼蘭染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)（應(yīng)在95%以上），最后用RPMI 1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107個(gè)/mL。
按比例將效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞（50:1）各100ul加入U(xiǎn)型96孔板；靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100ul加入靶細(xì)胞自然釋放孔；靶細(xì)胞和0.25%Triton各100ul加入靶細(xì)胞最大釋放孔。每組均設(shè)3個(gè)平行孔，37℃,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h后，離心1500rpm,5min。每孔吸取上清液100ul于平底96孔板，加入LDH基質(zhì)液100ul/孔，反應(yīng)3-10min，加入1mol/ml HCL 30ul/孔，酶標(biāo)490nm測(cè)定光密度值。
所有數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，測(cè)試結(jié)果如下表所示。
表1實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
注：采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與陰性對(duì)照組比較，”a”: p<0.05; 與陽性對(duì)照組比較, “b”: p<0.01
表2 實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)小鼠抗體水平（血清溶血素）的影響
注：采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與陰性對(duì)照組比較，”a”: p<0.05; 與陽性對(duì)照組比較, “b”: p<0.01表3實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)小鼠溶血空斑數(shù)的影響
注：采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與陰性對(duì)照組比較，”a”: p<0.05; 與陽性對(duì)照組比較, “b”: p<0.01 。
表4 實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)小鼠吞噬指數(shù)的影響
注：采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與陰性對(duì)照組比較，”a”: p<0.05; 與陽性對(duì)照組比較, “b”: p<0.01 。
表5實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響
注：采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，與陰性對(duì)照組比較，”a”: p<0.05; 與陽性對(duì)照組比較, “b”: p<0.01 。
同樣，對(duì)其余實(shí)施例和本發(fā)明的實(shí)施例其余配比進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1的效果類似。
2.降血壓效果測(cè)試實(shí)驗(yàn)
材料與試劑
將通過實(shí)施例1制得的具有保健功能的調(diào)味料各組分混合，濃縮干燥后制備成粉末狀，作為測(cè)試樣品。
SD 雄性大鼠，體重 180- 220 g。 戊巴比妥鈉，川芎素片。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
取 180-220g的雄性SD大鼠，注射戊巴比妥鈉（50mg/ kg）麻醉。剖開腹腔，用1 號(hào)絲線結(jié)扎左腎動(dòng)脈（使內(nèi)徑為 0.2 mm），右腎保存完好。手術(shù) 2 周以后血壓升高 15mmHg者認(rèn)為建模成功。
將腎型高血壓大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。分別灌胃給以受試物低劑量組（50mg/kg）、受試物中劑量組（100mg/kg）、受試物高劑量組（150mg/kg），川芎素水溶液（陽性對(duì)照，5mg/kg）、生理鹽水（陰性對(duì)照）。 每天灌胃 1 次，連續(xù)給藥 14 天，觀察給藥期間各組大鼠的血壓變化。 停止給藥以后，繼續(xù)觀察各組大鼠的血壓變化一周時(shí)間，結(jié)果如下表所示。
表6實(shí)施例樣品與對(duì)照組對(duì)大鼠血壓的影響
同樣，對(duì)其余實(shí)施例和本發(fā)明的實(shí)施例其余配比進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例1的效果類似。
對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實(shí)施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點(diǎn)來看，均應(yīng)將實(shí)施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
此外，應(yīng)當(dāng)理解，雖然本說明書按照實(shí)施方式加以描述，但并非每個(gè)實(shí)施方式僅包含一個(gè)獨(dú)立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說明書作為一個(gè)整體，各實(shí)施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實(shí)施方式。對(duì)于本發(fā)明中所有未詳盡描述的技術(shù)細(xì)節(jié)，均可通過本領(lǐng)域任一現(xiàn)有技術(shù)實(shí)現(xiàn)。