植物乳桿菌在制備反芻動(dòng)物甲烷減排飼料上的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物乳桿菌在制備反芻動(dòng)物甲烷減排飼料上的應(yīng)用。植物乳桿菌用在反芻動(dòng)物飼料中降低瘤胃甲烷產(chǎn)生量是本發(fā)明的首創(chuàng)，在應(yīng)用時(shí)添加量低，可以單獨(dú)用水混勻，也可以混合在飼料中使用，添加方便。在降低甲烷排放的基礎(chǔ)上，仍可提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，優(yōu)于其他甲烷抑制劑。研究表明，植物乳桿菌可在一定程度上降低反芻動(dòng)物甲烷排放量，提高瘤胃發(fā)酵性能，改善瘤胃發(fā)酵類型，并提高飼料的能量利用率，具有安全、實(shí)用、有效等優(yōu)勢(shì)。
【專利說(shuō)明】
植物乳桿菌在制備反芻動(dòng)物甲烷減排飼料上的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及反芻動(dòng)物養(yǎng)殖領(lǐng)域，具體涉及可降低牛羊甲烷排放量的益生菌。
【背景技術(shù)】
[0002] 反芻動(dòng)物生產(chǎn)中，因甲烷(CH4)形式損失的能量占飼料總能的2%~15%，這不僅造成 飼料資源的浪費(fèi)，而且對(duì)有害于大氣環(huán)境。反芻動(dòng)物瘤胃是一個(gè)動(dòng)態(tài)的生態(tài)系統(tǒng)，其CH 4的 產(chǎn)生是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，是瘤胃內(nèi)碳水化合物發(fā)酵不可避免的產(chǎn)物。然而甲烷的產(chǎn)生會(huì)加 劇溫室效應(yīng)，降低飼料利用率，需要采用科學(xué)、合理的措施對(duì)其進(jìn)行調(diào)控。
[0003] 目前關(guān)于瘤胃甲烷調(diào)控的研究已有很多，對(duì)甲烷生成機(jī)制的認(rèn)識(shí)逐步加深。微生 態(tài)制劑作為新型的綠色添加劑，對(duì)動(dòng)物及環(huán)境的副作用小，在反芻動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用多集 中在促生長(zhǎng)、防疾病、提高生產(chǎn)性能等方面，在甲烷調(diào)控方面的報(bào)道卻較少。
[0004] 因此，尋找合適的微生態(tài)添加劑及其科學(xué)、合理的添加劑量以降低反芻動(dòng)物甲烷 的排放量具有很重要的研究意義。
[0005] 現(xiàn)有的甲烷抑制劑，采用了微生物、有機(jī)化合物、植物或植物提取物等，其中：采用 有機(jī)化合物作為甲烷抑制劑的飼料，有可能因?yàn)楦淖冿暳系倪m口性而影響動(dòng)物的采食量和 生長(zhǎng);植物及植物提取物被大量報(bào)導(dǎo)證實(shí)對(duì)調(diào)控反芻動(dòng)物甲烷排放具有積極作用，但是在 反芻動(dòng)物飼料中并非常規(guī)原料或添加劑，其供給范圍和供給量受到產(chǎn)地、產(chǎn)量的影響，尚不 能大規(guī)模普及。在微生物方面，CN201310161752.U公開號(hào)為CN104137944A)公開了還原性 產(chǎn)乙酸菌具有抑制反會(huì)動(dòng)物胃內(nèi)的甲燒生成機(jī)能ProteiniphilumacetatigenesSROD-l (KCCM11219P )及利用其的方法。
[0006] 益生菌定義為在微生態(tài)學(xué)理論指導(dǎo)下，將從動(dòng)物體內(nèi)分離得到的有益微生物通過(guò) 特殊工藝制成的只含活菌或者包含菌體及其代謝產(chǎn)物的活菌制劑，能改善動(dòng)物胃腸道微生 物生態(tài)平衡，有益于動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能發(fā)揮的一類微生物添加劑。益生菌在飼料中的應(yīng) 用越來(lái)越廣泛，成型的制劑也較多，適合大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用。目前益生菌的種類主要有:乳酸 菌、芽孢桿菌、酵母和曲霉類。其中乳酸菌是人們發(fā)現(xiàn)最早的有益菌之一，已廣泛使用。乳酸 菌通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生的有機(jī)酸、細(xì)菌表面成分、特殊酶系等物質(zhì)，能抑制腐敗菌和病原菌、提高 動(dòng)物免疫力、降低膽固醇、改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)等，可刺激組織發(fā)育，對(duì)機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、生理 功能、細(xì)胞感染、藥物效應(yīng)、毒性反應(yīng)、免疫反應(yīng)、腫瘤發(fā)生、衰老過(guò)程和應(yīng)激反應(yīng)等產(chǎn)生作 用。乳酸菌作為飼料添加劑，具有無(wú)污染、無(wú)殘留、不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，并可以改善飼料風(fēng) 味，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高免疫力，增加動(dòng)物對(duì)疾病的抵抗力，在目前畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有良好 的發(fā)展趨勢(shì)和應(yīng)用前景。
[0007] 有關(guān)乳酸菌在動(dòng)物生產(chǎn)中的積極作用的研究多集中在治療腹瀉、降低死亡率、增 強(qiáng)機(jī)體免疫力、提高抗病力和生產(chǎn)性能等方面，在反芻動(dòng)物瘤胃CH 4方面的研究仍未見報(bào) 道。
[0008] 植物乳桿菌(/^(^0如(^_/_/^/5/7_/3/3?^1'腫)是乳酸菌的一種，最適生長(zhǎng)溫度為30~35 °C，厭氧或兼性厭氧，菌種為直或彎的桿狀，單個(gè)、有時(shí)成對(duì)或成鏈狀，最適pH 6. 5左右，屬 于同型發(fā)酵乳酸菌。在飼料中應(yīng)用，已發(fā)現(xiàn)的功能有，免疫調(diào)節(jié)，抑制致病菌，維持腸道內(nèi)菌 群平衡，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收等。
[0009] CN104719615A(申請(qǐng)?zhí)枮?01510036493.9)涉及一種復(fù)合乳酸菌瘤胃調(diào)控劑及其 制備方法。該復(fù)合乳酸菌瘤胃調(diào)控劑由植物乳桿菌代謝物及滅活的植物乳桿菌、乳酸乳球 菌代謝物及滅活的乳酸菌、糞腸球菌代謝物及滅活的糞腸球菌組成，該復(fù)合乳酸菌瘤胃調(diào) 控劑可促進(jìn)和維護(hù)瘤胃內(nèi)微生物區(qū)系平衡，穩(wěn)定瘤胃pH值，提高瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)量， 提尚菌體蛋白的含量。
[0010] "地衣芽孢桿菌及其復(fù)合菌對(duì)后備牛生長(zhǎng)性能和瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響" 一文中寫明， 隨著后備牛年齡的增加，瘤胃液中優(yōu)勢(shì)菌種類開始降低，最終保持穩(wěn)定;添加參試益生菌還 提高了瘤胃纖維分解菌的數(shù)量(符運(yùn)勤，碩士論文，地衣芽孢桿菌及其復(fù)合菌對(duì)后備牛生長(zhǎng) 性能和瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響）。根據(jù)甲烷生成過(guò)程可以預(yù)測(cè)，纖維分解菌數(shù)量提高，會(huì)提高瘤 胃中氫的產(chǎn)量，從而促進(jìn)甲烷的產(chǎn)生。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物瘤胃中纖維分解菌的數(shù)量和甲 烷菌數(shù)量呈正相關(guān)。綜上，瘤胃纖維分解菌數(shù)量的提高，可能會(huì)導(dǎo)致甲烷產(chǎn)量提高，而非降 低。在"益生菌的篩選鑒定及其對(duì)斷奶仔豬、犢牛生長(zhǎng)和消化道微生物的影響"一文中提到， 從北京市大興種豬場(chǎng)附近土壤中分離得到一株能抑制病原菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌 生長(zhǎng)的乳酸菌GF103,經(jīng)16s rRNA基因序列分析鑒定為植物乳桿菌（ZaciokciDt/s 添加到基礎(chǔ)日糧中飼用，可以明顯增加仔豬的重量，飼料轉(zhuǎn)化率較高，仔豬糞 中大腸桿菌的數(shù)量顯著降低，血清IgM濃度顯著整高，結(jié)果表明，日糧添加植物乳桿菌，能改 善斷奶仔豬早期的生長(zhǎng)性能（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，博士論文，董曉麗，益生菌的篩選鑒定及其 對(duì)斷奶仔豬、犢牛生長(zhǎng)和消化道微生物的影響）。
[0011] 經(jīng)過(guò)檢索，乳酸菌可用于沼氣池甲烷產(chǎn)量增加，而在降低反芻動(dòng)物甲烷瘤胃排放 量的應(yīng)用方面未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的是提供了植物乳桿菌在制備反芻動(dòng)物甲烷減排飼料上的應(yīng)用。
[0013] 上述應(yīng)用中： 所述植物乳桿菌(Zacio/?at/s j〇_/a/3iar·)為任意植物乳桿菌。
[0014] 優(yōu)選地，所述植物乳桿菌為植物乳桿菌GLPOUGenBank登錄號(hào)EU626013.1)。
[0015] 應(yīng)用時(shí)，可將植物乳桿菌干粉用水溶解后供動(dòng)物飲用，或?qū)⒅参锶闂U菌摻入飼料 中使用。
[0016] 所述飼料中，每千克飼料干物質(zhì)中添加植物乳桿菌4X109 CFU~4X1011 CFU。 [0017] 優(yōu)選地，每千克飼料干物質(zhì)中添加植物乳桿菌4X109 CFU~4X101Q CFU。
[0018] 進(jìn)一步優(yōu)選地，每千克飼料干物質(zhì)中添加植物乳桿菌4X101() CFU。
[0019] 所述飼料由以下重量份成分組成(干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草50~70份，玉米17~29份，豆柏 10~19份，磷酸氫鈣1.0~2.0份，石粉0.3~0.5份，食鹽0.4~0.8份，預(yù)混合飼料0.1~0.3份。
[0020] 優(yōu)選地，所述飼料由以下重量份成分組成（干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草66.4份，玉米19.1 份，豆柏12.2份，磷酸氫鈣1.25份，石粉0.35份，食鹽0.5份，預(yù)混合飼料0.2份。
[0021] 所述預(yù)混合飼料可以市售購(gòu)買，可為每千克飼料（除羊草外成分)提供(最低保證 值）：維生素 A 1.0~1.5萬(wàn)IU、維生素 D 2000~4000IU、維生素 E 50~90g、維生素0.1~ Ο · 5mg、維生素 B2 Ο · 2~Ο · 8mg、煙酸Ο · 1~Ο · 5mg、賴氨酸18~25g、蛋氨酸10~15g、色氨酸2 · 0~ 3·5g、鐵50~120mg、銅10~15mg、梓90~130mg、猛100~140mg、砸0·1~0·5mg、鵬1·0~1·5mg、鉆 0.2~0.8mg等微量成分。
[0022] 本發(fā)明提供的植物乳桿菌的新用途具有以下優(yōu)點(diǎn)： 1.植物乳桿菌用在降低反芻動(dòng)物飼料中的甲烷產(chǎn)生量是本發(fā)明的首創(chuàng)，在應(yīng)用時(shí)添 加量低，可以單獨(dú)用水混勻后飲用，也可以混合在飼料中使用，添加方便。在降低甲烷排放 的基礎(chǔ)上，仍可提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，優(yōu)于其他甲烷抑制劑。
[0023] 2.發(fā)明人擯棄體外試驗(yàn)的缺陷，通過(guò)呼吸代謝試驗(yàn)方法實(shí)測(cè)甲烷排放量的方法， 篩選出有效的甲烷抑制劑及其添加比例，可不經(jīng)換算直接應(yīng)用于反芻動(dòng)物預(yù)混合飼料中， 降低反芻動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)甲烷排放水平，提高生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。采用體外培養(yǎng)試驗(yàn)得出的添加比 例，生產(chǎn)中需要根據(jù)采食量、瘤胃容積等因素進(jìn)行換算，實(shí)際應(yīng)用效果需要進(jìn)一步檢驗(yàn)。
[0024] 3.通過(guò)實(shí)測(cè)肉羊24小時(shí)的二氧化碳、甲烷排放量，在植物乳桿菌的不同添加劑量 中篩選出甲烷排放量最低的組，從而確定其在反芻動(dòng)物飼料中的適宜比例。研究表明，植物 乳桿菌可在一定程度上降低反芻動(dòng)物甲烷排放量，提高瘤胃發(fā)酵性能，改善瘤胃發(fā)酵類型， 并提高飼料的能量利用率，具有安全、實(shí)用、有效等優(yōu)勢(shì)。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。
[0026] 本實(shí)施例僅以植物乳桿菌GLPOUGenBank登錄號(hào):EU626013.1)(見洪梅著"青貯源 乳酸菌培養(yǎng)工藝及發(fā)酵效果的研究"，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2011年，碩士論文)為例對(duì)發(fā)明的具 體內(nèi)容做詳細(xì)闡述，但是不限制本發(fā)明菌種來(lái)源的選擇，植物乳桿菌GLP01活菌單位2 X 101() CFU/g，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所貯存； 預(yù)混合飼料，由北京精準(zhǔn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究中心生產(chǎn)，為每千克飼料(除羊草外飼料成分） 提供(最低保證值）：維生素 A 1.2萬(wàn)IU、維生素 D 3000IU、維生素 E 70g、維生素 Bi 0.3mg、維 生素 B2 0 · 5mg、煙酸0 · 3mg;賴氨酸22g、蛋氨酸12g、色氨酸2 · 8g;鐵90mg、銅12mg、鋅llOmg、 猛120mg、硒0.3mg、碘1.3mg、鈷0.5mg等微量成分。
[0027] 其他飼料添加劑及飼料原料皆從飼料市場(chǎng)購(gòu)買獲得。
[0028] 實(shí)施例1:植物乳桿菌在反芻動(dòng)物飼料中降低甲烷排放的應(yīng)用 植物乳桿菌的用量為每千克飼料干物質(zhì)中添加4 X 109CFU植物乳桿菌。
[0029] 飼料由以下重量百分比組成(干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草70%，玉米17%，豆柏10.98%，磷酸 氫鈣1.1%，石粉0.3%，食鹽0.45%，預(yù)混合飼料0.17%。
[0030] 實(shí)施例2:植物乳桿菌在反芻動(dòng)物飼料中降低甲烷排放的應(yīng)用 植物乳桿菌的用量為每千克飼料干物質(zhì)中添加4X 101() CFU。
[0031] 飼料由以下重量百分比組成(干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草66.4%，玉米19.1%，豆柏12.2%，磷 酸氫鈣1.25%，石粉0.35%，食鹽0.5%，預(yù)混合飼料0.2%。
[0032]實(shí)施例3:植物乳桿菌在反芻動(dòng)物飼料中降低甲烷排放的應(yīng)用 植物乳桿菌的用量為每千克飼料干物質(zhì)中添加4 X 1011 CFU。
[0033] 飼料由以下重量百分比組成(干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草50%，玉米28.4%，豆柏18.2%，磷酸 氫鈣1.9%，石粉0.5%，食鹽0.7%，預(yù)混合飼料0.3%。
[0034] 實(shí)驗(yàn)例1:植物乳桿菌在反芻動(dòng)物飼料中降低甲烷排放的應(yīng)用效果驗(yàn)證 1.試驗(yàn)材料與設(shè)備 植物乳桿菌GLP01 (GenBank登錄號(hào)EU626013.1)，活菌單位2 X 101Q CFU/g，由中國(guó)農(nóng)業(yè) 科學(xué)院飼料研究所貯存，北京華農(nóng)生物工程有限公司擴(kuò)繁并生產(chǎn)。
[0035] 甲烷實(shí)測(cè)裝置:開路式氣體代謝系統(tǒng)，LGR氣體分析儀，購(gòu)于美國(guó)Sable公司。整套 試驗(yàn)裝置由Sable系統(tǒng)的測(cè)定裝置、密閉式氣體代謝室和配套的計(jì)算機(jī)軟件組成。一次可同 時(shí)測(cè)定6只羊的全天呼吸氣體及甲烷排放量。
[0036] 2.試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:試驗(yàn)選取24只體重為(51.75 ± 1.48)kg，年齡相近、體況良好的杜泊綿羊(d) X小尾寒羊（罕）雜交F1代成年羯羊。
[0037]試驗(yàn)設(shè)計(jì):試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將24只羊分為4個(gè)處理組，即1個(gè) 對(duì)照組和3個(gè)試驗(yàn)組，每組6只羊，每只羊?yàn)?個(gè)重復(fù)，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(配方見實(shí)施例2 提供的飼料），3個(gè)試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加植物乳桿菌，其中： 低劑量組:添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中添加4 X 109 CFU; 中劑量組:添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中添加4 X 101() CFU; 高劑量組:添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中添加4 X 1011 CFU。
[0038] 試驗(yàn)期31 d，其中預(yù)試期18 d，正試期13 d。
[0039] 3.試驗(yàn)日糧:基礎(chǔ)飼糧由精料和羊草組成，見實(shí)施例2提供的飼料，其營(yíng)養(yǎng)水平見 表1。
[0040] 表1基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平(％，干物質(zhì)基礎(chǔ)）
4.測(cè)定指標(biāo)與方法 4.1試驗(yàn)羊體重 進(jìn)行氣體代謝試驗(yàn)時(shí)，在試驗(yàn)羊進(jìn)入和離開氣體代謝室時(shí)分別對(duì)其進(jìn)行體重測(cè)定，兩 次測(cè)定的平均體重作為試驗(yàn)羊代謝體重的計(jì)算依據(jù)。
[0041 ] 代謝體重平均體重°·75。
[0042] 4.2 CH4 排放量 CH4排放量采用開路式氣體代謝系統(tǒng)(Sable，USA)進(jìn)行測(cè)定，系統(tǒng)連接6個(gè)呼吸測(cè)熱箱， 可以同時(shí)測(cè)定6只羊的CH4排放量。每個(gè)呼吸測(cè)熱箱內(nèi)配有料槽和水槽，試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間 可自由采食和飲水。試驗(yàn)羊進(jìn)入呼吸測(cè)熱箱后，先適應(yīng)24 h，隨后測(cè)定48 h的CH4排放量。測(cè) 定系統(tǒng)循環(huán)一次的時(shí)間為60 min。
[0043] 開始測(cè)定時(shí)，系統(tǒng)首先測(cè)定試驗(yàn)環(huán)境中CH4的含量，測(cè)定時(shí)間為2 min，隨后由環(huán)境 向呼吸測(cè)熱箱內(nèi)置換，置換時(shí)間為1 min，然后依次測(cè)定6個(gè)呼吸測(cè)熱箱的CH4排放量，每個(gè) 呼吸測(cè)熱箱測(cè)定時(shí)間為9 min，接著系統(tǒng)由呼吸測(cè)熱箱向環(huán)境置換，置換時(shí)間為1 min，最后 再次測(cè)定試驗(yàn)環(huán)境中的CH4含量，測(cè)定時(shí)間為2 min。以上為Sable開路式氣體代謝系統(tǒng)完成 一次循環(huán)的測(cè)定流程，以此循環(huán)連續(xù)測(cè)定48 h的CH4排放量。
[0044] 計(jì)算過(guò)程中，以兩次試驗(yàn)環(huán)境中測(cè)定的CH4含量的平均值作為基底值，通過(guò)系統(tǒng) Sable氣體代謝系統(tǒng)的測(cè)定程序?qū)?yīng)的宏文件進(jìn)行計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)分析，得到每只試驗(yàn)羊每天 的CH4排放量。
[0045] 根據(jù)試驗(yàn)羊CH4的日排放量，計(jì)算其單位干物質(zhì)采食量的的CH4排放量(L/kg DMI)、 單位代謝體重的CH4排放量(L/kg W^75)、單位干物質(zhì)采食量和代謝體重的CH4排放量(L/kg WQ· 75 kg-tMI)及單位可消化干物質(zhì)采食量的CH4排放量(L/kg DDMI)。
[0046] 4.3消化代謝率 試驗(yàn)羊糞樣和尿樣的采集于每天晨飼前進(jìn)行。收集糞樣時(shí)，將每只試驗(yàn)羊?qū)?yīng)的收糞 袋取下稱取重量，記錄其前一天的排糞量，將每只羊的糞樣混合均勻后，按排糞量的10%進(jìn) 行取樣。收集尿樣時(shí)，收集前先向收集尿桶中加入l〇〇mL 10°/c^H2S〇4以固尿氮，收集后記錄 每只試驗(yàn)羊?qū)?yīng)的尿液體積，隨后用4層紗布過(guò)濾，按每只羊排尿量的10%進(jìn)行取樣。
[0047] 將每天收集的糞樣和尿樣保存于-20°C冰箱。此過(guò)程連續(xù)進(jìn)行6 d，并將每只羊所 有收集到的樣品混合均勻后保存于_20°C冰箱備用。消化代謝試驗(yàn)結(jié)束后，將每只羊的糞樣 置于65°C烘箱內(nèi)烘干48 h，回潮48 h后稱重，得出初水分含量，隨后經(jīng)粉碎過(guò)40目網(wǎng)篩制成 分析樣品，以備分析檢測(cè)。
[0048]按照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》的方法測(cè)定飼料和糞的能量(GE)、干物質(zhì) (DM)、有機(jī)物(0M)、氮(N)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)含量以及尿中的能量和 氮含量，并計(jì)算相應(yīng)的消化率和代謝率。
[0049] 總能攝入量(GE) =日糧干物質(zhì)采食量X日糧總能含量； 甲烷能(CH4-E)=甲烷排放量(L) X 0 · 714(g/L) X 10-3 X 55 · 65MJ/kg; 消化能(DE)=總能攝入量(GE)_糞中總能排出量，其中糞中總能排出量=糞排出總量X 糞中總能含量； 代謝能(ME)=總能攝入量(GE)-糞中總能排出量-尿中總能排出量-甲烷能，糞中總能排 出量=奠排出總量X糞中總能含量，尿中總能排出量=尿排出總量X尿中總能含量； 某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(％)=(該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入量-糞中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)排出量)/該營(yíng)養(yǎng)物 質(zhì)攝入量X100%，其中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入量=日糧干物質(zhì)采食量X日糧中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量； 總能量消化率(DE/GE)(%)=(總能攝入量-糞中總能排出量)/總能攝入量X100%。
[0050] 總能量代謝率(ME/GE ) (%)=(攝入總能-糞中排出總能-尿中排出總能-CH4能)/攝 入總能X 100%。
[0051 ] 5.數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel進(jìn)行初步整理，再用統(tǒng)計(jì)軟件SAS 9.2中的AN0VA進(jìn)行單因素方差 分析，若差異顯著時(shí)用Dunan氏法進(jìn)行多重比較，以P〈0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。
[0052] 6.結(jié)果 6.1植物乳桿菌對(duì)甲燒排放的影響:見表2 表2植物乳桿菌對(duì)肉羊甲烷排放的影響
注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同字母或無(wú)字母表示差異不顯著(P>〇.05)，肩標(biāo)不同小寫字母表 不差異顯著(/^< 0.05)。下表同。
[0053] 表2結(jié)果顯示：在肉羊飼糧中添加了植物乳桿菌后，與對(duì)照組相比，中劑量組顯著 降低了 CH4的日排放量(L/d)(P〈0.05)、干物質(zhì)采食量(DMI)基礎(chǔ)的甲烷排放量(L/kgDMI)(P 〈0.05)、代謝體重基礎(chǔ)的甲烷排放量(L/kgWQ·75) (P〈0.05)和干物質(zhì)采食量代謝體重基礎(chǔ)的 甲烷排放量(L/kgW0.75. kg-tMI) (K0 · 05 )。
[0054] 在相同干物質(zhì)采食量下，與對(duì)照組相比，低和中劑量組顯著降低了可消化干物質(zhì) 基礎(chǔ)的甲烷排放量(L/kg DDMI)(P〈0.05)，高劑量組的該項(xiàng)指標(biāo)則差異不顯著(A0.05)。
[0055] 從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，植物乳桿菌對(duì)肉羊甲烷的排放具有一定程度的抑制作用， 且以中劑量組，即當(dāng)植物乳桿菌的添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中4X10 1() CFU時(shí)甲烷排放 量的抑制效果最顯著。
[0056] 6.2植物乳桿菌對(duì)肉羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝的影響:見表3 表3植物乳桿菌對(duì)肉羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響
表3結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，低、中和高劑量組的干物質(zhì)、有機(jī)物、中性洗滌纖維和氮 等的表觀消化率均顯著提高。
[0057] 6.3植物乳桿菌對(duì)肉羊能量消化代謝的影響:見表4 表4植物乳桿菌對(duì)肉羊能量消化代謝的影響
表4結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，中劑量組的甲烷能和甲烷能/食入總能的比例均顯著降 低(P〈0.05)，高劑量組的相應(yīng)指標(biāo)顯著升高(P〈0.05)，低劑量組的相應(yīng)指標(biāo)則差異不顯著 (/^0.05)〇
[0058] 3個(gè)植物乳桿菌添加組均提高了肉羊的消化能和總能消化率(P〈0.05)，但不同添 加組之間差異(A0.05)不顯著。中和高劑量組的代謝能和總能代謝率均顯著高于低劑量組 和對(duì)照組(P〈〇.05)，但兩組之間差異不顯著(D0.05)，低劑量組的相應(yīng)指標(biāo)顯著高于對(duì)照 組(K0.05)。
[0059] 植物乳桿菌作為肉羊的飼料添加劑，可以提高飼料的能量利用效率。
[0060] 小結(jié)： 添加植物乳桿菌可以降低肉羊的甲烷排放量，提高能量和部分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。當(dāng) 添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中4X109 CFU和4X101() CFU時(shí)，降低了肉羊可消化干物質(zhì) 基礎(chǔ)的CH4排放量，降幅分別為5.84%和15.28%。當(dāng)添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中4 X 101() CFU時(shí)，降低了CH4的日排放量，當(dāng)添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中4 X 1011 CFU時(shí)，升高了 CH4的日排放量。植物乳桿菌抑制肉羊甲烷排放的最佳添加水平為每千克飼料干物質(zhì)中4X 1010 CFUo
[0061] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明、【具體實(shí)施方式】及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描 述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見 的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的 范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 植物乳桿菌在制備反芻動(dòng)物甲烷減排飼料上的應(yīng)用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，將植物乳桿菌干粉用水溶解后供動(dòng)物飲 用，或?qū)⒅参锶闂U菌摻入飼料中使用。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述植物乳桿菌（ZacioAaciDus j〇_/a/3 iar )為任意植物乳桿菌。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述植物乳桿菌（ZacioAaciBus j〇_/a/3iar?)為植物乳桿菌 GLP01(GenBank 登錄號(hào) EU626013 · 1) 〇5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料中，每千克飼料干物質(zhì)中添加 植物乳桿菌4X109 CFU~4X1011 CFU。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料中，每千克飼料干物質(zhì)中添加植 物乳桿菌4X109 CFU ~4X101Q CFU。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料中，每千克飼料干物質(zhì)中添加植 物乳桿菌4X101() CFU。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料由以下重量份成分組成 (干物質(zhì)基礎(chǔ)）：羊草50~70份，玉米17~29份，豆柏10~19份，磷酸氫鈣1.0~2.0份，石粉0.3~ 〇. 5份，食鹽0.4~0.8份，預(yù)混合飼料0.1~0.3份。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述飼料由以下重量份成分組成(干物質(zhì) 基礎(chǔ)）：羊草66.4份，玉米19.1份，豆柏12.2份，磷酸氫鈣1.25份，石粉0.35份，食鹽0.5份，預(yù) 混合飼料0.2份。10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述預(yù)混合飼料為每千克飼料（除羊 草外成分）的營(yíng)養(yǎng)含有以下成分：維生素 A 1.0~1.5萬(wàn)IU、維生素 D 2000~4000IU、維生素 E 50~90g、維生素 Βι 0· 1~0.5mg、維生素 B2 0.2~0.8mg、煙酸0· 1~0.5mg、賴氨酸18~25g、蛋氨酸 10~15g、色氨酸 2.0~3.5g、鐵50~120mg、銅 10~15mg、鋅90~130mg、錳 100~140mg、硒0· 1~ 0·5mg、鵬1·0~1·5mg、鉆0·2~0·8mg。
【文檔編號(hào)】A23K20/142GK105995061SQ201610399742
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月8日
【發(fā)明人】刁其玉, 郭江鵬, 屠焰, 肖怡
【申請(qǐng)人】中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所