黃芩乳酸菌發(fā)酵物、含發(fā)酵物的化妝品及制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及黃芩乳酸菌發(fā)酵物、含發(fā)酵物的化妝品及制 備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 《中國(guó)藥典》記載，黃芩性味苦、寒。歸肺、膽、脾、大腸、小腸經(jīng)。清熱燥濕，瀉火解 毒，止血，安胎。用于濕溫、署濕，胸悶嘔吐，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱 吐衄，癰腫瘡毒，胎動(dòng)不安?！侗静菥V目》記載："黃芩苦、平、無(wú)毒"?！侗窘?jīng)》記載："主治諸熱 黃膽，腸泄痢，逐水，下血閉，惡瘡疽蝕火瘍"?！秳e錄》記載："主治療痰熱胃中熱，小腹絞痛， 消谷，利小腸，女子血閉，淋露下血，小兒腹痛"。據(jù)現(xiàn)代藥理學(xué)研宄表明，黃芩具有抗腫瘤、 抗菌、降血脂、保肝、利膽、抗氧化等作用。黃芩作為傳統(tǒng)中藥材，臨床上對(duì)多種疾病的治療 都具有較好的療效。近年來(lái)，黃芩在化妝品中的應(yīng)用越來(lái)越多，其美白作用也有相關(guān)研宄和 應(yīng)用。
[0003] 乳酸菌是一種存在于人類體內(nèi)的益生菌，是發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類無(wú)芽 孢、革蘭氏染色陽(yáng)性細(xì)菌的總稱，目前至少可分為18個(gè)屬，共有200多種，絕大部分都是人 體內(nèi)必不可少且具有重要生理功能的菌群，廣泛存在于人體的腸道中。乳酸菌是能利用葡 萄糖或乳糖的發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌。它不僅是研宄分類、生化、遺傳、分子生物學(xué)和 基因工程的理想材料，在理論上具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值，而且在工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、食品和醫(yī)藥等 與人類生活密切相關(guān)的重要領(lǐng)域應(yīng)用價(jià)值也極高。目前，乳酸菌在美白保濕化妝品中均有 所應(yīng)用。
[0004] 但黃芩和乳酸菌均未見(jiàn)有美白和祛痘控油等功效的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題是以"生物轉(zhuǎn)化理論"為指導(dǎo)，采用黃芩與乳酸菌的液體 發(fā)酵體系提供一種具有美白、祛痘控油功效的產(chǎn)品。
[0006] 本發(fā)明所解決的第一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供黃芩與乳酸菌的液體發(fā)酵所得的黃芩乳 酸菌發(fā)酵物。
[0007] 本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物，以黃芩和水組成培養(yǎng)基，然后接種乳酸菌發(fā)酵所得的 液體發(fā)酵混合物；其中，培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為3~8%;乳酸菌的接種量 為I. 0XIO4~I. 0X10 8cfu/ml。
[0008] 上述技術(shù)方案中，培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為5%。黃芩為原生藥材 或黃芩飲片。
[0009] 上述技術(shù)方案中，乳酸菌的接種量?jī)?yōu)選為I.OX106cfu/ml。
[0010] 本發(fā)明所解決的第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物的制備方法，包 括以下步驟：
[0011]A、以黃芩和水組成培養(yǎng)基，以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為3~8% ;
[0012] B、滅菌后接種乳酸菌，接種量為I.OXIO4~I.OX10 8cfu/ml;
[0013] C、于30°C~40°C和0_200rpm的條件下培養(yǎng)24~72小時(shí)后即得黃芩乳酸菌發(fā)酵 物。
[0014] 上述技術(shù)方案中，培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為5 %。
[0015] 上述技術(shù)方案中，乳酸菌的接種量?jī)?yōu)選為I.OX106cfu/ml。
[0016] 上述技術(shù)方案中，步驟B所述"滅菌后接種乳酸菌"是指在105°C_115°C滅菌 20-40min，冷卻后再接種乳酸菌。進(jìn)一步的優(yōu)選，所述"滅菌后接種乳酸菌"是指在115°C滅 囷30min，冷卻后再接種乳酸囷。
[0017] 上述技術(shù)方案中，步驟C優(yōu)選于37°C的條件下培養(yǎng)72小時(shí)。
[0018] 上述技術(shù)方案中，接種采用的乳酸菌菌種可以選擇使用目前由各種常用方式培養(yǎng) 得到的菌種，如用于制造泡菜、酸奶的乳酸菌種等。
[0019] 其中，一種優(yōu)選的菌種來(lái)源和培養(yǎng)方式為：
[0020] A、在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)乳酸菌菌種；
[0021] B、將步驟A培養(yǎng)的乳酸菌接種入乳酸菌液體培養(yǎng)基中；
[0022] C、在30°C~40°C和0~200rpm的條件下培養(yǎng)1~5天所得乳酸菌菌種。
[0023] 上述技術(shù)方案中，步驟B所述乳酸菌液體培養(yǎng)基中含有乳酸菌常規(guī)發(fā)酵的碳源、 氮源、微量元素和/或無(wú)機(jī)鹽成分，其中：碳源成分為液體培養(yǎng)基總重量的〇. 5 %~10%，氮 源成分為〇. 5 %~3 %，微量元素和/或無(wú)機(jī)鹽成分為0. 01 %~1 %，其余為水，滅菌即可。 其中所說(shuō)的碳源、氮源都可以選擇目前通用培養(yǎng)基中的常用成分，如葡萄糖、蔗糖、淀粉、牛 肉膏、酵母膏等常規(guī)培養(yǎng)基組成成分。進(jìn)一步優(yōu)選所述滅菌為經(jīng)115~121°C滅菌15~ 30min〇
[0024] 上述技術(shù)方案中，步驟A所述固體培養(yǎng)基是由步驟B中所述的乳酸菌液體培養(yǎng)基 1000 ml和瓊脂10~20g組成，按同樣方式作常規(guī)滅菌處理。培養(yǎng)條件為：在30-40°C和 0-200rpm的條件下培養(yǎng)1-3天；優(yōu)選培養(yǎng)條件為：在37°C和50rpm的條件下培養(yǎng)1天。
[0025] 本發(fā)明所解決的第三個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物的用途，具體表 現(xiàn)為本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物具有明顯的抑制酪氨酸酶的活性，抑制黑色素瘤細(xì)胞中黑色 素的生成，抑制主要青春痘致病菌產(chǎn)生的作用。即本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物具有明確的美 白、祛痘控油的效果。同時(shí)，對(duì)人角質(zhì)細(xì)胞增殖無(wú)抑制作用。
[0026] 本發(fā)明所解決的第四個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供采用本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物或其提取 物為活性成分，加入化妝品上可接受的輔料制備而成的化妝品。
[0027] 本發(fā)明制備的化妝品可為爽膚水、乳液、精華液、面霜、面膜、眼膜等常見(jiàn)的化妝 品。
[0028] 采用本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物用于肌膚的護(hù)理，通過(guò)抑制酪氨酸酶的活性，以及 抑制黑色素瘤細(xì)胞中黑色素的生成，進(jìn)而起到美白的效果，具有明確的美白功效。同時(shí)，通 過(guò)"溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法"，測(cè)定樣品的對(duì)青春痘主要致病菌（如，痤瘡 丙酸桿菌，金黃色葡萄球菌）的抑菌率，考察得到具有明顯的祛痘控油的作用。同時(shí)，通過(guò) 研宄其對(duì)人角質(zhì)細(xì)胞增殖的抑制作用，可以得到黃芩乳酸菌發(fā)酵物作為化妝品使用不具有 細(xì)胞毒性。本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物按常規(guī)方法制備的化妝品具有明確的美白和祛痘控油 功效。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 以下通過(guò)實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō) 明，說(shuō)明但不限制本發(fā)明。
[0030] 實(shí)施例1乳酸菌對(duì)黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基的生長(zhǎng)適應(yīng)性及影響試驗(yàn)
[0031] (1)按1.0父105(^11/1111接種量將乳酸菌分別接種于3%、4%、5%、6%、7%和8% 的黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基（黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基，以黃芩、蒸餾水為原料，混合后滅菌即可，其 中均以黃芩生藥重量百分比計(jì)，以下同此）中，于37°C和靜置條件下培養(yǎng)2~4天，采用平 板涂布法檢測(cè)發(fā)酵液中的乳酸菌菌落數(shù)。結(jié)果如表1所示。
[0032] 表1結(jié)果顯示，當(dāng)黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基中黃芩的濃度為3-8%時(shí)，均一定程度可促 進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng)；當(dāng)黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基中黃芩的濃度為5%時(shí)，乳酸菌的長(zhǎng)勢(shì)較佳且基本 一致；當(dāng)黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基中黃芩的濃度大于5%時(shí)，乳酸菌的生長(zhǎng)出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)； 故優(yōu)選采用黃芩-蒸餾水培養(yǎng)基中黃芩的濃度為5%。
[0033] 表1首次發(fā)酵黃芩濃度和發(fā)酵時(shí)間對(duì)乳酸菌培養(yǎng)的影響
[0034]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 黃芩乳酸菌發(fā)酵物，其特征在于：以黃芩和水組成培養(yǎng)基，然后接種乳酸菌發(fā)酵所 得的液體發(fā)酵混合物；其中，培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為3~8%。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物，其特征在于：培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩 重量百分比為5%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物，其特征在于：所述黃芩為原生藥材 或黃芩飲片。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物，其特征在于：培養(yǎng)基中乳酸菌 的接種量為1.0 X IO4~1.0 XlO 8cfu/ml ;優(yōu)選，培養(yǎng)基中乳酸菌的接種量為L(zhǎng)OXlO6Cfu/ ml 〇
5. 黃芩乳酸菌發(fā)酵物的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： A、以黃芩和水組成培養(yǎng)基，以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為3~8% ; 8、滅菌后接種乳酸菌，接種量為1.0\104~1.0\108〇包/1111; C、于30°C~40°C和0_200rpm的條件下培養(yǎng)24~72小時(shí)后即得黃芩乳酸菌發(fā)酵物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物的制備方法，其特征在于：至少滿足以下 任意一項(xiàng)： 培養(yǎng)基以生藥重量計(jì)，黃芩重量百分比為5% ; 乳酸菌的接種量為1.0 X 106cfu/ml ; 步驟B所述"滅菌后接種乳酸菌"是指在105°C _115°C滅菌20-40min，冷卻后再接種乳 酸菌；優(yōu)選的，所述"滅菌后接種乳酸菌"是指在115°C滅菌30min，冷卻后再接種乳酸菌； 步驟C于37°C的條件下培養(yǎng)72小時(shí)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物的制備方法，其特征在于：乳酸菌菌種的 培養(yǎng)方法包括如下步驟： A、 在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)乳酸菌菌種； B、 將步驟A培養(yǎng)的乳酸菌接種入乳酸菌液體培養(yǎng)基中； C、 在30°C~40°C和0~200rpm的條件下培養(yǎng)1~5天所得乳酸菌菌種。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的黃芩乳酸菌發(fā)酵物的制備方法，其特征在于：至少滿足以下 任意一項(xiàng)： 步驟B所述乳酸菌液體培養(yǎng)基中含有乳酸菌常規(guī)發(fā)酵的碳源、氮源、微量元素和/或 無(wú)機(jī)鹽成分；優(yōu)選，培養(yǎng)基中碳源成分為液體培養(yǎng)基總重量的0.5%~10%，氮源成分為 0. 5 %~3 %，微量元素和/或無(wú)機(jī)鹽成分為0. 01 %~1 %，其余為水； 步驟A所述固體培養(yǎng)基是由步驟B中所述的乳酸菌液體培養(yǎng)基1000 ml和瓊脂10~ 20g組成； 優(yōu)選步驟A培養(yǎng)條件為：在30-40°C和0-200rpm的條件下培養(yǎng)1-3天；進(jìn)一步優(yōu)選培 養(yǎng)條件為：在37°C和50rpm的條件下培養(yǎng)1天。
9. 黃芩乳酸菌發(fā)酵物在制備具有美白、祛痘控油功效的藥物或化妝品中應(yīng)用。
10. 化妝品，其特征在于：以權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述黃芩乳酸菌發(fā)酵物或其提取物為 活性成分，加入化妝品上可接受的輔料制備而成的化妝品； 優(yōu)選的，所述化妝品為爽膚水、乳液、精華液、面霜、面膜、眼膜。
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及黃芩乳酸菌發(fā)酵物、含發(fā)酵物的化妝品及制備方法和用途。本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題是以“生物轉(zhuǎn)化理論”為指導(dǎo)，采用黃芩與乳酸菌的液體發(fā)酵體系提供一種具有美白、祛痘控油功效的產(chǎn)品。本發(fā)明黃芩乳酸菌發(fā)酵物是以黃芩和水組成培養(yǎng)基，然后與乳酸菌發(fā)酵所得的發(fā)酵液體混合物；其中，培養(yǎng)基中以生藥重量計(jì)，含有重量百分比為5～10％的黃芩；乳酸菌的接種量為1.0×104～1.0×108cfu/ml。
【IPC分類】A61Q19-02, A61P17-10, A61P31-04, A61K8-99, A61Q19-00, A61K8-97
【公開(kāi)號(hào)】CN104644538
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510035587
【發(fā)明人】羅霞, 許曉燕, 余夢(mèng)瑤, 江南, 魏巍
【申請(qǐng)人】四川省中醫(yī)藥科學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2015年1月23日