一種綠原酸殼聚糖微球及其制備工藝和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地講，涉及一種綠原酸殼聚糖微球及其制 備工藝和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 綠原酸（chlorogenic acid CA)是植物體在有氧呼吸過程中合成的一種苯丙素類 物質(zhì)，分子式為C16O18O 9且分子量為345. 30,是許多中草藥如金銀花、杜仲、茵陳等的主要有 效成分，也是眾多水果蔬菜中的重要活性成分。
[0003] 綠原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利膽等多種功效，近 年來還發(fā)現(xiàn)，綠原酸具有抗癌、抗艾滋病等作用，可作用于開發(fā)抗癌、抗艾滋病的藥物。同 時(shí)，作為良好的抗氧化劑，綠原酸被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、食品等各個(gè)領(lǐng)域。
[0004] 然而，綠原酸為活性小分子物質(zhì)，親水性好卻親脂性差，其與細(xì)胞的親和力不足、 半衰期較短，使得其口服時(shí)的生物利用度較低。為了實(shí)現(xiàn)綠原酸的有效口服利用并擴(kuò)大其 應(yīng)用范圍，有必要對(duì)其進(jìn)行劑型改造以提高口服有效性。
[0005] 殼聚糖是甲克素經(jīng)脫乙?；幚砗笏玫降漠a(chǎn)物，具有獨(dú)特的生物學(xué)特征，它無 毒、具有良好的生物相容性并且可生物降解、無抗原性，是一種優(yōu)良的生物材料。并且，殼聚 糖具有良好的成膜性，可以利用它制成包含藥物的凝膠、膜或微球等，并作為藥物環(huán)視、控 釋載體的材料。目前，以殼聚糖為材料制備制劑的研宄，已經(jīng)取得了巨大進(jìn)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明提供了一種綠原酸殼聚糖微球及其制備 方法和應(yīng)用，幫助改變綠原酸理化性質(zhì)上的不足并改善綠原酸在口服生物利用度上的局限 性，為綠原酸的開發(fā)應(yīng)用提供更多的參考和思路。
[0007] 本發(fā)明提供了一種綠原酸殼聚糖微球，所述綠原酸殼聚糖微球是以綠原酸為主藥 并以殼聚糖或三甲基殼聚糖為載體材料制備得到的微球。
[0008] 根據(jù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球的一個(gè)實(shí)施例，所述綠原酸與殼聚糖或三甲基殼 聚糖的質(zhì)量比為1:1~2:1。。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球的一個(gè)實(shí)施例，所述綠原酸殼聚糖微球是通過乳 化交聯(lián)法、噴霧干燥法或膠凝法制備而成的。
[0010] 本發(fā)明還提供了上述綠原酸殼聚糖微球的制備工藝，采用乳化交聯(lián)法制備，具體 包括以下步驟：
[0011] 將綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖混合后溶解于酸液中，得到綠原酸殼聚糖溶 液，其中，所述綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖的質(zhì)量比為1:1~2:1 ;
[0012] 將乳化劑加入油相中均勻混合得到混合液；
[0013] 將所述綠原酸殼聚糖溶液緩慢地滴加到所述混合液中并不斷攪拌，得到W/0型乳 劑；
[0014] 向所述W/Ο型乳劑中滴加戊二醛，靜置反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后除去油相并抽濾，再洗去 微球表面的油相并洗去未反應(yīng)的戊二醛，脫水后收集微球；
[0015] 將微球真空干燥，得到綠原酸殼聚糖微球。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球的制備工藝的一個(gè)實(shí)施例，所述綠原酸殼聚糖溶 液為6~10份，所述乳化劑為0. 5~2份，所述油相為3~7份。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球的制備工藝的一個(gè)實(shí)施例，所述乳化劑為司盤80 或吐溫80 ;所述油相為色拉油、大豆油或小麥胚芽油。
[0018] 本發(fā)明還提供了上述綠原酸殼聚糖微球的制備工藝，采用噴霧干燥法制備，具體 包括以下步驟：
[0019] 將綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖混合后溶解于酸液中，得到綠原酸殼聚糖溶 液，其中，所述綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖的質(zhì)量比為1:1~2:1 ;
[0020] 將所述綠原酸殼聚糖溶液靜置后進(jìn)行噴霧干燥，得到綠原酸殼聚糖微球。
[0021] 本發(fā)明還提供了上述綠原酸殼聚糖微球的制備工藝，采用膠凝法制備，具體包括 以下步驟：
[0022] 將綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖混合后溶解于酸液中，得到綠原酸殼聚糖溶 液，其中，所述綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖的質(zhì)量比為1:1~2:1 ;
[0023] 在持續(xù)攪拌的條件下，采用注射器將所述綠原酸殼聚糖溶液緩慢地加入陰離子膠 凝劑的水溶液中，其中，所述陰離子膠凝劑為硫酸鹽、三聚磷酸鹽和海藻酸鹽中的任意一 種；
[0024] 過濾并將所得微球洗凈、干燥，得到綠原酸殼聚糖微球。
[0025] 本發(fā)明又提供了上述綠原酸殼聚糖微球在制備藥物中的應(yīng)用。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球在制備藥物中的應(yīng)用的一個(gè)實(shí)施例，將所述綠原 酸殼聚糖微球與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分一起加工成膠囊劑、凍干粉針劑或口服 劑。
[0027] 本說明書中公開的所有特征，或公開的所有方法或過程中的步驟，除了互相排斥 的特征和/或步驟以外，均可以以任何方式組合。
[0028] 本發(fā)明采用適宜的方法將殼聚糖和綠原酸制備成綠原酸殼聚糖微球，從而能夠 有效增加綠原酸對(duì)生物膜的通透性，提高綠原酸的口服生物利用度，幫助綠原酸在體內(nèi)發(fā) 揮藥效，幫助改變了綠原酸理化性質(zhì)上的不足并改善了綠原酸在口服生物利用度上的局限 性，為綠原酸的開發(fā)應(yīng)用提供更多的參考和思路。
【附圖說明】
[0029] 圖1示出了實(shí)施例1中利用乳化交聯(lián)法的不同處方制備得到的綠原酸殼聚糖微球 的SEM圖片（A、B、C、D分別對(duì)應(yīng)于處方A、處方B、處方C、處方D)。
[0030] 圖2示出了實(shí)施例2中利用噴霧干燥法的不同處方制備得到的綠原酸殼聚糖微球 的SEM圖片（上圖對(duì)應(yīng)處方1，下圖對(duì)應(yīng)處方2)。
[0031] 圖3示出了實(shí)施例4中制備的綠原酸殼聚糖微球的體外釋放曲線。
[0032] 圖4示出了實(shí)施例5中Caco-2細(xì)胞對(duì)綠原酸殼聚糖微球和綠原酸原料藥的吸收 百分率對(duì)比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 在下文中，將對(duì)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球及其制備工藝和應(yīng)用的示例性實(shí)施例 進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0034] 綠原酸是屬于多酚類的小分子單體，其存在廣泛的生物活性和藥用價(jià)值，然而其 存在水溶性較高而脂溶性低和透膜吸收能力差的特點(diǎn)，這導(dǎo)致其與細(xì)胞的親和性較差且口 服生物利用度較低，在一定程度上限制了其應(yīng)用。殼聚糖具有良好的成膜性，可以利用它制 成包含藥物的凝膠、膜或微球等，并作為藥物環(huán)視、控釋載體的材料。微球是指藥物分散或 被吸附在高分子、聚合物基質(zhì)中而形成的微粒分散體系。本發(fā)明針對(duì)綠原酸親水性強(qiáng)而親 脂性差且口服半衰期短、生物利用度差的特點(diǎn)進(jìn)行了相應(yīng)的研宄，希望通過制備綠原酸殼 聚糖微球并進(jìn)而將其制備成各種制劑，從而增加綠原酸對(duì)生物膜的通透性，提高綠原酸的 口服生物利用度，幫助綠原酸在體內(nèi)發(fā)揮藥效。
[0035] 根據(jù)本發(fā)明的示例性實(shí)施例，所述綠原酸殼聚糖是以綠原酸為主藥并以殼聚糖或 三甲基殼聚糖為載體材料制備得到的微球。也即，本發(fā)明的綠原酸微乳是以綠原酸為主藥， 以殼聚糖或三甲基殼聚糖為載體材料，并可以根據(jù)制備方法的不同添加一定的輔料制成的 微球，從而能夠?qū)崿F(xiàn)幫助改變綠原酸理化性質(zhì)上的不足并改善綠原酸在口服生物利用度上 的局限性的目的。
[0036] 具體地，綠原酸可以為從植物中提取的或通過化學(xué)合成的綠原酸原料藥。例如，可 以從金銀花、牛蒡子、杜仲葉等植物中進(jìn)行綠原酸的提取。優(yōu)選地，綠原酸原料藥的純度為 98%以上。
[0037] 根據(jù)本發(fā)明的示例性實(shí)施例，上述綠原酸殼聚糖微球可以采用如乳化交聯(lián)法、噴 霧干燥法或膠凝法等多種方法制備而成，只要能夠制備得到上述的綠原酸殼聚糖微球即 可。
[0038] 為了更全面的公開和保護(hù)本發(fā)明的綠原酸殼聚糖微球，本發(fā)明還具體提供了幾種 制備上述綠原酸殼聚糖微球的工藝。
[0039] 工藝一：采用乳化交聯(lián)法
[0040] 具體步驟為：
[0041] 1)將綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖混合后溶解于酸液中，得到綠原酸殼聚糖溶 液。其中，綠原酸與殼聚糖或三甲基殼聚糖的質(zhì)量比為1:1~2:1。
[0042] 本發(fā)明中所述的綠原酸殼聚糖溶液是指綠原酸與殼聚糖混合后溶解于酸溶中形 成的溶液。其中，由于殼聚糖的結(jié)構(gòu)式顯示其含有較多的氨基，為了使其更容易溶解，通常 會(huì)將酸液與殼聚糖一起使用。根據(jù)本發(fā)明，所述酸液可以為乙酸、鹽酸等。本發(fā)明選用了 乙酸溶液進(jìn)行制備，乙酸溶液可以選用適宜濃度的乙酸溶液，例如體積濃度為3%的乙酸溶 液，但本發(fā)明不限于此。
[0043] 2)將乳化劑加入油相中均勻混合得到混合液。其中，乳化劑可以為司盤80或吐溫 80,本發(fā)明中使用的乳化劑是指幫助水相在油相中擴(kuò)散的表面活性劑；油相可以為色拉油、 大豆油或小麥胚芽油，油相是為了在乳劑制備的過程中形成油包水（W/0)型的乳劑。
[0044] 3)將綠原酸殼聚糖溶液緩慢地滴加到混合液中并不斷攪拌，得到W/0型乳劑。
[0045] 其中，綠原酸殼