本發(fā)明涉及食用菌栽培
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種培養(yǎng)基及其在制備銀耳菌種中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：銀耳(Tremellafuciformis)在分類上隸屬于真菌門(Eumycota)，擔子菌綱(Basidiomycetes)，銀耳目(Tremellales)，銀耳科(Termelaceae)，銀耳屬(Tremell)，屬中溫、好氣性真菌，主要分布于亞熱帶，也分布于熱帶、溫帶和寒帶。銀耳與大多數(shù)生產(chǎn)栽培的食用菌種類不同，它是伴生真菌協(xié)同完成其生活史的典型代表，其生活史的完成離不開香灰菌的協(xié)同作用。我國是銀耳生產(chǎn)大國，近年來，響應(yīng)市場需求，銀耳的種植面積大幅提高，為了提高生產(chǎn)效率，銀耳栽培種的質(zhì)量受到了越來越多的關(guān)注。菌種生產(chǎn)從母種開始，經(jīng)過原種擴培和觀察出耳形態(tài)后，選擇生長優(yōu)良的轉(zhuǎn)接擴培成為栽培種，經(jīng)過一段時間培養(yǎng)后，選擇性狀優(yōu)良的成為成品栽培種。母種的篩選需要專業(yè)的儀器設(shè)備，原種和栽培種的制備對技術(shù)的要求較高，一般種植戶從市場上購買的菌種即為栽培種。對于栽培種的制種方法，目前銀耳栽培種的制種與其他食用菌相比并無特殊方法。制種時將培養(yǎng)基壓實并在中心預(yù)留轉(zhuǎn)接原種需要的孔洞。培養(yǎng)基經(jīng)過滅菌后無菌條件下接入原種，經(jīng)過20天左右的培養(yǎng)即可獲得栽培種。上述栽培種的制種方法方便易行，在食用菌栽培種的制備中廣泛使用。但這樣的方法對于需與伴生菌協(xié)同完成生活史的銀耳而言，卻存在著一定的缺陷?，F(xiàn)有銀耳菌種的制備通常以菌袋或蘑菇瓶為容器，銀耳菌絲的生長延伸范圍只能至接中點向外延伸2cm左右，其伴生菌(香灰菌)的菌絲生長范圍可以遍布整個菌袋，而通常菌袋撐開后直徑為不低于8cm；這就導(dǎo)致了菌袋中遠離中心的一側(cè)僅生長了伴生菌的菌絲，卻沒有生長銀耳菌絲。以菌袋或蘑菇瓶的體積尚無法使銀耳菌絲布滿，遑論進一步擴大制備體系，這嚴重的限制了銀耳菌種制備的效率。且擴大培養(yǎng)體系后，不僅菌絲生長不均勻，且生長不良。如果能夠研發(fā)一次性大規(guī)模發(fā)酵銀耳菌絲的培養(yǎng)基質(zhì)和培養(yǎng)方法，則能夠提高銀耳菌種的制備效率。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種培養(yǎng)基及其在制備銀耳菌種中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基組分合理，適宜銀耳生長，以其制備銀耳菌種能夠提高菌絲生長的速率，縮短菌種制備時間，且能夠?qū)崿F(xiàn)菌種的大規(guī)模制備。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)包括木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質(zhì)量比為78：(5～10)：(5～10)：(5～10)：(1～5)：1:1:0.1:0.05。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)中，麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉的質(zhì)量之和不超過培養(yǎng)基質(zhì)總質(zhì)量的30％。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質(zhì)量比為78∶9∶5∶5∶1∶1:1:0.1:0.05。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質(zhì)量比為78∶5∶10：10∶5∶1:1:0.1:0.05。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質(zhì)量比為78∶10∶7∶7∶3：1:1:0.1:0.05。麥麩為小麥最外層的表皮，主要營養(yǎng)成分包括纖維素、蛋白、維生素等；玉米粉也稱玉米面，是由玉米磨制而成，主要營養(yǎng)成分包括碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂肪、胡蘿卜素；米糠也稱洗米糠，主要包括稻谷的果皮、種皮、外胚乳、糊粉層和胚，營養(yǎng)成分包括：蛋白質(zhì)、粗纖維和脂肪。石膏的主要化學成分為硫酸鈣(CaSO4)的水合物，本發(fā)明用石膏將培養(yǎng)基質(zhì)的pH值調(diào)整為5.2～5.8。本發(fā)明以木屑為基質(zhì)，以麥麩、玉米粉、米糠和蛋白粉為營養(yǎng)物質(zhì)，并添加蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀、硫酸鎂。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基能夠提高菌種中菌絲的生長速率，從而縮短菌種制備時間，且該培養(yǎng)基質(zhì)能夠適應(yīng)大規(guī)模的菌種培養(yǎng)。實驗表明，以本發(fā)明培養(yǎng)基制備菌種，能夠?qū)崿F(xiàn)一次性發(fā)酵10000升的菌種，且能夠在10～15天內(nèi)完成菌種的制備，縮短了菌種的制備時間。其中，木屑為青岡木屑，粒徑為2mm～3mm。蛋白粉為銀耳的生長提供更豐富的營養(yǎng)，蛋白粉可以為乳清蛋白粉，酵母粉，大豆蛋白粉或昆蟲蛋白粉；本發(fā)明實施例中，蛋白粉為昆蟲蛋白粉。為了更好的制備銀耳菌種，本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)的含水量為50％～55％。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)在制備銀耳菌種中的應(yīng)用本發(fā)明還提供了一種銀耳菌種，在本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)中接種原種后，培養(yǎng)10～15天，經(jīng)分裝制得；或在本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)中接種原種后，培養(yǎng)3～5天，經(jīng)分裝后，進行后培養(yǎng)制得。本發(fā)明提供的銀耳菌種有本發(fā)明提供的培養(yǎng)基制得，所得菌種中菌絲潔白、健壯、濃密，菌絲數(shù)量大。本發(fā)明提供的銀耳菌種的具體制備方法為：將本發(fā)明提供的培養(yǎng)基滅菌、冷卻后，與原種混合均勻，培育至菌絲充分擴散后，進行分裝?；蛘邔⒈景l(fā)明提供的培養(yǎng)基滅菌、冷卻后，與原種混合均勻，培育3～5天后，進行分裝然后進行后培養(yǎng)。制備菌種的培養(yǎng)的溫度為22℃～25℃。所述后培養(yǎng)的溫度為20℃～23℃，時間為10天～15天。本發(fā)明實施例中，分裝至每份900g。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基能夠適應(yīng)大規(guī)模的菌種制備，每次滅菌10000升培養(yǎng)基質(zhì)?，F(xiàn)有銀耳菌種的制備通常在菌袋或蘑菇瓶中進行，不論以哪種裝置作為載體，其體系都不超過2kg。而本發(fā)明提供的培養(yǎng)基能夠使菌絲在大規(guī)模培養(yǎng)的情況下健壯、快速的生長。每次培養(yǎng)的規(guī)?？蛇_10000升，約合3500kg。本發(fā)明所述分裝優(yōu)選分裝至透氣袋中。本發(fā)明所述的透氣袋的材質(zhì)為聚丙烯。形式為內(nèi)折袋。規(guī)格為19cm×45cm×5cm，撐開長度32±0.1cm。其具有4cm直徑透氣孔。一種實施方式中，透氣袋具有套環(huán)和蓋子；透氣袋直徑與內(nèi)塞配套，套環(huán)與內(nèi)塞配套。套環(huán)呈喇叭形，上口內(nèi)徑3.8±0.1cm，高度3.2±0.1cm。另一種實施方式中，透氣袋不具有套環(huán)和蓋子，以熱合方式封口。透氣袋、套環(huán)、內(nèi)塞皆要求干凈、無破損，圓滑無毛刺。套環(huán)與內(nèi)塞的材質(zhì)為塑料，能夠耐130℃高溫、2.5kg高壓。本發(fā)明還提供了一種銀耳的栽培方法，接種本發(fā)明提供的銀耳菌種。本發(fā)明提供的銀耳的室內(nèi)栽培方法包括：將本發(fā)明的銀耳菌種接種于熟料或培養(yǎng)基，培養(yǎng)50天；所述培養(yǎng)的條件為22℃，濕度為70％，每天通風3次，每次30分鐘。優(yōu)選的，培養(yǎng)20天后用棉紗布保濕，每天噴水3～5次。所述熟料為經(jīng)過石灰水浸泡的段高10cm、電鉆打孔的短段，高壓滅菌的熟料。本發(fā)明提供的銀耳的室外栽培方法包括：3月初～4月初將本發(fā)明的銀耳菌種接種于青岡樹段木，培養(yǎng)至5月底～6月初開始出耳，直到9月底結(jié)束。所述青岡樹段木的制備方法為：砍伐青岡樹，晾曬15天～25天后截成1米的段木，鉆孔2～3厘米深。所述砍伐的時間為春節(jié)后，所述晾曬至驚蟄。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基質(zhì)包括木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂。本發(fā)明提供的培養(yǎng)基能夠提高菌種中菌絲的生長速率，從而縮短菌種制備時間，且該培養(yǎng)基質(zhì)能夠適應(yīng)大規(guī)模的菌種培養(yǎng)。實驗表明，以本發(fā)明培養(yǎng)基制備菌種，能夠?qū)崿F(xiàn)一次性發(fā)酵3500kg的菌種，且能夠在10～15天內(nèi)完成菌種的制備，縮短了菌種的制備時間。具體實施方式本發(fā)明提供了一種培養(yǎng)基及其在制備銀耳菌種中的應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文的方法和應(yīng)用進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。本發(fā)明采用的試材、試劑、儀器皆為普通市售品，皆可于市場購得。下面結(jié)合實施例，進一步闡述本發(fā)明：實施例1～3以表1配方配制培養(yǎng)基質(zhì)：表1培養(yǎng)基質(zhì)配方木屑麥麩玉米粉米糠蛋白粉蔗糖石膏磷酸二氫鉀硫酸鎂實施例178kg9kg5kg5kg1kg1kg1kg0.1kg0.05kg實施例278kg5kg10kg10kg5kg1kg1kg0.1kg0.05kg實施例378kg10kg7kg7kg3kg1kg1kg0.1kg0.05kg青岡木屑粉碎至粒徑為2～3mm。按照配方將青岡木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、昆蟲蛋白粉、磷酸二氫鉀和硫酸鎂混勻，123℃，滅菌150min，制得培養(yǎng)基質(zhì)。對比例1～3以表2配方配制培養(yǎng)基質(zhì)：表2培養(yǎng)基質(zhì)配方青岡木屑粉碎，蛋白粉為昆蟲蛋白粉。按照配方將各組分混勻，123℃，滅菌150min，制得培養(yǎng)基質(zhì)。實施例4將滅菌后的實施例1～3和對比例1～3的培養(yǎng)基，分別與原種混勻(培養(yǎng)基與原種的質(zhì)量比為1:15)制備銀耳菌種，各組處理如表3，分別記為實驗組1～6：表3實驗組1～6菌種制備方法實施例5主要以將青岡段木截斷到更適宜大小，通過高壓滅菌，既保留了青岡段木的有效成分，模擬自然生長；又縮短了段木出耳的生長周期，對驗證新品種和新工藝的開發(fā)效果，具有快速有效的特點。以經(jīng)過石灰水浸泡的段高10cm、電鉆打孔的短段，高壓滅菌的熟料，即短段熟料為銀耳出耳率測試載體。實驗組1～6制備的栽培種為實驗對象，接入短段熟料的接種孔中，以觀察記錄出耳率，和銀耳性狀的室內(nèi)測試。以上每個處理3個重復(fù)(即3袋栽培種)，每袋點種20個短段熟料。溫室培養(yǎng)條件為恒溫22℃，濕度為70％，每天通風3次，每次30分鐘。培養(yǎng)20天后將熟料短段的塑料袋口打開，用棉沙布蓋上袋口保濕，每天澆水3-5次。培養(yǎng)30天及30天起每5天觀察記錄出耳、污染情況，和采摘鮮耳稱重至培養(yǎng)50天烘干測產(chǎn)量，并通過對比分析不同處理銀耳的生長指標來評估其提高出耳率的能力和在短段熟料中的生長情況。出耳是指接種孔出耳；污染是指整個短段的污染；空穴是指接種孔正常生長，結(jié)果如表4：表4室內(nèi)培養(yǎng)銀耳的出耳情況由表3可知，采用本發(fā)明提供的菌種，能夠顯著提高出耳率，(p<0.05)，進而提高產(chǎn)量，增加種植戶的收入。實施例6以通江段木銀耳主產(chǎn)區(qū)陳河鄉(xiāng)砍伐的段木為出耳率室外測試。以實施例1～3的栽培種和對比例1～3的栽培種為實驗對象，在陳河鄉(xiāng)按照當?shù)剞r(nóng)事安排，春節(jié)后砍伐青岡樹，晾曬20天左右，待驚蟄節(jié)氣時截成1米的均勻段木。運回生產(chǎn)產(chǎn)地后鉆孔2cm～3cm深，待接種后發(fā)菌40天～60天，根據(jù)當年氣候條件決定，5月底6月初進入事先準備好的出耳耳堂中進行出耳管理；根據(jù)銀耳生長狀況適時噴水防蟲。9月中下旬，統(tǒng)計出耳情況。以上每個處理3個重復(fù)(即3袋栽培種)，每袋點種100斤耳棒。結(jié)果如表5：表5室外培養(yǎng)銀耳的出耳情況表中產(chǎn)量合計是按3個重復(fù)×20個短段熟料得出的數(shù)據(jù)結(jié)果，以干品計。由表4可知，采用本發(fā)明提供的菌種，能夠顯著提高出耳率，(p<0.05)，減少耳棒空穴的現(xiàn)象，提高耳棒的生物轉(zhuǎn)化率，增加種植戶的收入。以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁1 2 3