專利名稱：一種制備南大戟內(nèi)酯b的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學領域，特別是涉及一種采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜分離技術制備南大戟內(nèi)酯B的方法。
背景技術：
南大戟內(nèi)酯B為二萜類化合物，mp. 212V (分解)，呈白色針晶狀，分子式C2tlH26O4,分子量330. 42。南大戟內(nèi)酯B在天然植物中廣泛存在，主要從大戟科植物中分離得到。藥理研究表明，南大戟內(nèi)酯B具有促進神經(jīng)生長因子形成的作用，可用于治療脊柱損傷、末梢神經(jīng)損傷、糖尿病性神經(jīng)病和肌萎縮外側(cè)變硬。另外，還具有抗癌活性，動物體內(nèi)抗癌活性試驗表明，南大戟內(nèi)酯B有明顯的抑制S180、艾氏腹水癌、肝癌腹水等細胞生長的活性。其抑制血管細胞粘附分子-I的形成，IC50為O. 2 μ g/mL，可用作轉(zhuǎn)移抑制劑，用于治療動脈硬化、移植排異、慢性風濕性關節(jié)炎和結(jié)節(jié)病等。目前尚未見大量制備南大戟內(nèi)酯B的方法報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備南大戟內(nèi)酯B的方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術方案如下
一種制備南大戟內(nèi)酯B的方法，其特征在于包括以下步驟取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內(nèi)酯B。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為43-56°C，萃取壓力為25_34MPa，分離釜I溫度為35-45°C，壓力為8-10MPa，分離釜II溫度為25-38°C，壓力為4_7MPa，夾帶劑用量為原料的1-2倍量。所述庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水溶劑系統(tǒng)比例為(4-7) :(2-5) :(3-4) :(1-2)。本發(fā)明中超臨界CO2萃取時間控制在2-4小時，CO2流量控制在15_22L/h。本發(fā)明在高速逆流色譜分離萃取物時，是以溶劑上相為固定相，下相為流動相，乙酸乙酯溶解萃取物，設備轉(zhuǎn)速控制在700-900 rpm，流動相流速為I. 5-3. Oml/min。本發(fā)明優(yōu)勢在于工藝采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜分離南大戟內(nèi)酯B，分離過程無產(chǎn)品損失，制備周期短，試劑可以重復利用，制備量大，無廢棄物產(chǎn)生，克服了傳統(tǒng)硅膠柱分離過程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現(xiàn)性差的技術缺陷。
具體實施例方式 下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
取南大戟根粉碎過60目，取3kg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調(diào)整設備參數(shù)萃取溫度為56°C，萃取壓カ為33. 6MPa，分離釜I溫度為45°C，壓カ為9MPa，分離釜II溫度為37°C，壓カ為7MPa。通入CO2流體，達到上述參數(shù)后，以CO2液體20L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液6L，動態(tài)萃取4h，收集萃取液，回收こ醇，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為4:5:3:1混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉(zhuǎn)速為850rpm，同時將下相以6ml/min的流速泵入，待流動相從出液端流出且兩相建立動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)節(jié)為2. Oml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集南大戟內(nèi)酯B流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得南大戟內(nèi)酯B，高效液相檢測，含量94. 2%。
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實施例2:
取南大戟根粉碎過40目，取5kg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調(diào)整設備參數(shù)萃取溫度為49°C，萃取壓カ為28MPa，分離釜I溫度為40°C，壓カ為lOMPa，分離釜II溫度為32°C，壓カ為7MPa。通入CO2流體，達到上述參數(shù)后，以CO2液體16L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液8L，動態(tài)萃取3h，收集萃取液回收こ醇，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為7:3:4:2混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉(zhuǎn)速為700rpm，同時將下相以4ml/min的流速泵入，待流動相從出液端流出且兩相建立動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)節(jié)為3. Oml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集南大戟內(nèi)酯B流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得南大戟內(nèi)酯B，高效液相檢測，含量92. Tl。實施例3
取南大戟根粉碎過60目，取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調(diào)整設備參數(shù)萃取溫度為43°C，萃取壓カ為25MPa，分離釜I溫度為35°C，壓カ為8MPa，分離釜II溫度為25°C，壓カ為4MPa。通入CO2流體，達到上述參數(shù)后，以CO2液體15L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液10L，動態(tài)萃取2h，收集萃取液，回收75%こ醇水溶液，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為5:2:3:2混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉(zhuǎn)速為900rpm,同時將下相以5ml/min的流速泵入,待流動相從出液端流出且兩相建立動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)節(jié)為I. 5ml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集南大戟內(nèi)酯B流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得南大戟內(nèi)酯B產(chǎn)品，高效液相檢測，含量93. 6%。
權利要求
1.一種制備南大戟內(nèi)酯B的方法，其特征在于包括以下步驟取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內(nèi)酯B。
2.根據(jù)權利要求I所述制備南大戟內(nèi)酯B的方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為43-56°C，萃取壓力為25-34MPa，分離釜I溫度為35_45°C，壓力為8_10MPa，分離釜II溫度為25-38°C，壓力為4-7MPa，夾帶劑用量為原料的1_2倍量。
3.根據(jù)權利要求I所述制備南大戟內(nèi)酯B的方法，其特征在于所述的庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水溶劑系統(tǒng)比例為(4-7) :(2-5) :(3-4) :(1-2)。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然藥物化學領域，涉及一種制備南大戟內(nèi)酯B的方法。方法步驟如下取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內(nèi)酯B。采用本發(fā)明制備南大戟內(nèi)酯B產(chǎn)品，具有無污染、收率高的優(yōu)點，適用于南大戟內(nèi)酯B的工業(yè)化制備。
文檔編號C07D493/20GK102850374SQ20121036301
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月26日 優(yōu)先權日2012年9月26日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司