含有稠李多糖的抗喉癌保健品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種含有稠李多糖的抗喉癌保健品。按重量百分比組成如下：稠李多糖30％-50％，稠李花色苷20％-40％，高粱米多肽5％-10％，板栗多肽5％-10％，僵蠶提取物5％-10％、桔梗提取物5％-10％、薏苡仁提取物5％-10％、白花蛇舌草提取物5％-10％。本發(fā)明具開創(chuàng)性的技術(shù)是將稠李多糖及稠李花色苷作為抗喉癌的核心功能性原料，根據(jù)現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)模型合理搭配、科學(xué)組合應(yīng)用，形成具有顯著抗喉癌的多糖、花色苷、多肽類、中草藥混合保健品。本發(fā)明通過對體外人喉癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)稠李多糖的組合物對體外腫瘤細(xì)胞具有較好的抑制作用，對于喉癌的防治有著非常顯著的效果。
【專利說明】
含有稠李多糖的抗喉癌保健品

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于保健品領(lǐng)域，具體的涉及一種具有抗喉癌功能的含有稠李多糖的保健品O

【背景技術(shù)】
[0002]喉癌是我國常見的頭頸部惡性腫瘤之一，約占所有腫瘤的3?5%，在耳鼻喉科領(lǐng)域中僅次于鼻咽癌和鼻腔，鼻竇癌，居第三位。好發(fā)年齡為50?70歲。男性較女性多見，約為8:1，以東北、華北和華東地區(qū)發(fā)病率最高。喉癌大多數(shù)為鱗狀細(xì)胞癌，占全部喉癌的93?99% )。由于喉部是人體的發(fā)聲器官，如果早期診斷和治療不及時(shí)，會嚴(yán)重影響病人的語言表達(dá)和生活質(zhì)量，甚至危及生命。喉鱗狀細(xì)胞癌的主要治療方法是手術(shù)，通常首選全喉切除手術(shù)，其次是放射治療，這些會嚴(yán)重?fù)p害患者的喉功能和生活質(zhì)量。鑒于上述原因，人們把目光轉(zhuǎn)向天然抗腫瘤藥物的研發(fā)上。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是以東北地區(qū)觀賞性植物稠李屬稠李出發(fā)，制備稠李多糖、稠李花色苷，和其他活性物質(zhì)混合，提供一種抗喉癌的天然保健品。
[0004]本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:含有稠李多糖的抗喉癌保健品，由以下原料按重量百分比組成:
[0005]稠李多糖30% -50%，稠李花色苷20% -40 %，高粱米多肽5% _10%，
[0006]板栗多肽5%-10%，僵蠶提取物5%-10%，桔梗提取物5%-10%，
[0007]薏苡仁提取物5% -10%，白花蛇舌草提取物5% -10%。
[0008]本發(fā)明涉及的稠李多糖是由稠李提取的，采用超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的工藝組合提取稠李多糖。稠李花色苷也是由稠李提取的，采用復(fù)合酶酶解-微波-超聲波分步法的工藝組合提取稠李花色苷。
[0009]采用超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的工藝組合提取稠李多糖的并通過Sephadex G-200層析純化的步驟如下:
[0010]I)超聲浸提:將稠李果實(shí)去柄，破碎，去核，放入零下80°C冰箱冷凍過夜，在冷凍干燥機(jī)中干燥，待干燥之后取出，研磨成粉。將稠李凍干粉溶于水中，料液比按質(zhì)量比1:10-1:50，控制溫度為50-90 0C, pH值5.0-9.0，超聲波功率為100W-500W，超聲時(shí)間為10min-50min,離心,收集提取液繼續(xù)進(jìn)行微波提取；
[0011]2)微波輔助提取:取提取液，微波功率300W-500W，微波時(shí)間為20min_60min，離心，收集提取液繼續(xù)進(jìn)行復(fù)合酶酶解；
[0012]3)復(fù)合酶酶解提取:取提取液，加入提取液重量1.0% -5.0 %的復(fù)合酶，控制溫度為30-60°C，pH3.0-6.0，酶解時(shí)間為30min_60min，離心，抽濾，取濾液，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加入4倍體積的95%乙醇沉淀多糖，3000r/min離心后去除上清液，沉淀冷凍干燥，得稠李粗多糖。所述的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:0.5?2的混合；
[0013]4)將冷凍干燥的稠李粗多糖加入適量蒸餾水重新溶解，Sephadex G-200層析進(jìn)行分離純化，用蒸餾水洗脫，流速為lml/min，每2ml收集一試管，用硫酸-蒽酮法跟蹤檢測至無糖，收集含量最多的多糖組分在蒸餾水中透析24h，冷凍干燥，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。用DEAE-32進(jìn)一步純化，磷酸鹽緩沖液-水作為流動相，梯度模式進(jìn)行洗脫，流速為0.8ml/min,每2ml收集一試管，用硫酸-蒽酮法跟蹤檢測至無糖，收集含量最多的多糖組分。
[0014]采用復(fù)合酶酶解-微波-超聲波分步法的工藝組合提取稠李花色苷并用AB-8大孔樹脂進(jìn)行靜態(tài)純化的步驟如下:
[0015]I)復(fù)合酶酶解提取:將稠李果實(shí)去柄，破碎，去核，放入零下80°C冰箱冷凍過夜，在冷凍干燥機(jī)中干燥，待干燥之后取出，研磨成粉。料液比按質(zhì)量比1:10-1:50,將稠李凍干粉溶于水，復(fù)合酶加入量為稠李凍干粉的總重量的1.0% _5.0%，進(jìn)行熱水浸提，控制溫度為30-70°C，pH范圍值3.0-6.0酶解時(shí)間為30min_60min，離心，過濾，提取液備用，沉淀物繼續(xù)進(jìn)行微波提??；所用的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:0.5?2的混合；
[0016]2)微波輔助提取:料液比按質(zhì)量比1:10-1:15，將酶解后的沉淀物溶于水，微波功率300W-500W，微波時(shí)間為20min-60min，離心，過濾，提取液備用，沉淀物繼續(xù)進(jìn)行超聲浸提;
[0017]3)超聲浸提:料液比按質(zhì)量比1:10-1:15，將微波后的沉淀物溶于乙醇中，超聲波功率為100W-500W，超聲時(shí)間為10min-50min，pH值為2_6，抽濾，提取液備用；
[0018]4)合并復(fù)合酶酶解的提取液、微波輔助的提取液和超聲浸提的提取液，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后得到粗稠李花色苷干粉；
[0019]5)大孔樹脂靜態(tài)純化:粗稠李花色苷干粉配成8mg/ml的水溶液，靜態(tài)吸附條件是:溫度20°C，樹脂的添加量為0.16g/ml ;解析條件是:解吸劑70%乙醇，pH值為3，溫度為60°C，得稠李花色苷干粉。
[0020]本發(fā)明的有益效果是:首次采用天然植物稠李果實(shí)提取的多糖、花色苷作為活性物質(zhì)，制備抗喉癌保健品或藥品，不存在合成藥劑的毒副作用，而且服用和攜帶十分的方便，吸收快速且效果好，因此擁有十分廣闊市場前景。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1是稠李多糖組合物對人喉癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞生長影響。
[0022]圖2是稠李多糖組合物抑制Hep-2細(xì)胞集落形成的集落試驗(yàn)結(jié)果。
[0023]圖3是稠李多糖組合物抑制ifep-2細(xì)胞遷移試驗(yàn)結(jié)果。

【具體實(shí)施方式】
[0024]實(shí)施例1含有稠李多糖的抗喉癌保健品
[0025](一)稠李多糖的制備
[0026]采用超聲波-微波-復(fù)合酶酶解分步法的工藝組合提取稠李多糖并通過SephadexG-200層析純化的步驟如下:
[0027]I)超聲浸提:將稠李果實(shí)去柄，破碎，去核，放入零下80°C冰箱冷凍過夜，在冷凍干燥機(jī)中干燥，待干燥之后取出，研磨成粉。將稠李凍干粉溶于水中，料液比按質(zhì)量比1:30，控制溫度為60°C，pH值7.0，超聲波功率為400W，超聲時(shí)間為40min，3000r/min進(jìn)行離心15min，收集提取液繼續(xù)進(jìn)行微波提?。?br> [0028]2)微波輔助提取:取超聲后的提取液，微波功率400W，微波時(shí)間為40min，3000r/min進(jìn)行離心15min，收集提取液繼續(xù)進(jìn)行復(fù)合酶酶解；
[0029]3)復(fù)合酶酶解提取:取微波后的提取液，加入其總重量4.0%的復(fù)合酶，控制溫度為5(TC,pH4.0,酶解時(shí)間為40min,3000r/min進(jìn)行離心15min,抽濾,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,力口入4倍體積的95%乙醇沉淀多糖，3000r/min離心后去除上清液，冷凍干燥，得稠李粗多糖。所述的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:1的混合；
[0030]4)將冷凍干燥的稠李粗多糖加入適量蒸餾水重新溶解，Sephadex G-200層析進(jìn)行分離純化，用蒸餾水洗脫，流速為lml/min，每2ml收集一試管，用硫酸-蒽酮法跟蹤檢測至無糖，收集含量最多的多糖組分在蒸餾水中透析24h，冷凍干燥，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。用DEAE-32進(jìn)一步純化，磷酸鹽緩沖液-水作為流動相，梯度模式進(jìn)行洗脫，流速為0.8ml/min,每2ml收集一試管，用硫酸-蒽酮法跟蹤檢測至無糖，收集含量最多的多糖組分。
[0031]( 二)稠李花色苷的制備
[0032]本實(shí)施例采用超聲波-微波-混合酶酶解分步法的工藝組合提取稠李花色苷并用AB-8大孔樹脂進(jìn)行靜態(tài)純化，步驟如下:
[0033]I)復(fù)合酶酶解提取:將稠李果實(shí)去柄，破碎，去核，放入零下80°C冰箱冷凍過夜，在冷凍干燥機(jī)中干燥，待干燥之后取出，研磨成粉。將稠李凍干粉溶于水，料液比按質(zhì)量比1:30，所用的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:1的混合，復(fù)合酶加入量為稠李凍干粉的總重量的3.0%，進(jìn)行熱水浸提，控制溫度為50°C，pH范圍值5.0酶解時(shí)間為50min，6000r/min進(jìn)行離心1min,過濾,提取液備用，沉淀物繼續(xù)進(jìn)行微波提取；
[0034]2)微波輔助提取:料液比按質(zhì)量比1:10，將酶解后的沉淀物溶于水中，微波功率400W,微波時(shí)間為40min, 6000r/min進(jìn)行離心1min,過濾,提取液備用，沉淀物繼續(xù)進(jìn)行超聲浸提；
[0035]3)超聲浸提:料液比按質(zhì)量比1:10，將微波后的沉淀物溶于60%乙醇中，超聲波功率為400W，超聲時(shí)間為30min，pH值為4，抽濾，提取液備用；
[0036]4)合并復(fù)合酶酶解的提取液、微波輔助的提取液和超聲浸提的提取液，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后得到粗稠李花色苷干粉；
[0037]5)大孔樹脂靜態(tài)純化:粗稠李花色苷干粉配成8mg/ml的水溶液，靜態(tài)吸附條件是:溫度20°C，樹脂的添加量為0.16g/ml ;解析條件是:解吸劑70%乙醇，pH值為3，溫度為60°C，得稠李花色苷干粉。
[0038](三)高粱米多肽的制備
[0039]木瓜蛋白酶提取聞梁米多妝步驟如下:
[0040]I)將高粱米粉碎，按料液比為1:15，在pH為10的氫氧化鈉溶液中浸泡3h，提取溫度為50°C，5000r/min離心20min，取上清液，用90 %硫酸銨進(jìn)行沉淀，再次離心，分離得到沉淀，進(jìn)行冷凍干燥得到高粱米蛋白；
[0041]2)將高粱米蛋白配成8%的水溶液，pH調(diào)節(jié)為6.5，酶活添加量為6000u/g料，溫度為60°C，提取時(shí)間為3h，然后沸水浴1min滅酶，3500r/min離心15min，取上清，純凈水透析、采用截留分子量為1kDa超濾板超濾后進(jìn)行冷凍干燥，得到高粱米多肽粉末。
[0042](四)板栗多肽的制備
[0043]I)板栗去皮干燥后，用粉碎機(jī)粉碎，按料液比為1:10，加入pHll的NaOH，提取溫度為50°C，時(shí)間為3h，離心收集沉淀，冷凍干燥制備板栗蛋白。
[0044]2)復(fù)合酶分步水解:首先，以復(fù)合風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行水解，然后再以堿性蛋白酶分步水解制備板栗多肽，復(fù)合風(fēng)味蛋白酶酶解條件為:pH6，酶活添加量為6000u/g料，時(shí)間lh，溫度55°C，堿性蛋白酶酶解條件為:pH8，酶活添加量為6000u/g料，時(shí)間3h，溫度50°C ；將水解液加熱到100°C，保持1min殺滅酶的活力；采用截留分子量為1kDa超濾板超濾得到的酶解液，收集分子量為1kDa以下的酶解液；將酶解液用低溫冷凍干燥機(jī)制得板栗多肽粉末。
[0045](五)僵蠶提取物的制備
[0046]在室溫條件下，稱量粉碎成200目的僵蠶固體粉末；按質(zhì)量比1:10比例稱取僵蠶固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得僵蠶提取物。
[0047](六)桔梗提取物的制備
[0048]在室溫條件下，稱量粉碎成200目的桔梗固體粉末；按質(zhì)量比1:10比例稱取桔梗固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得桔梗提取物。
[0049](七)薏苡仁提取物的制備
[0050]在室溫條件下，稱量粉碎成200目的薏苡仁固體粉末；按質(zhì)量比1:10比例稱取薏苡仁固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得薏苡仁提取物。
[0051](八)白花蛇舌草提取物的制備
[0052]在室溫條件下，稱量粉碎成200目的白花蛇舌草固體粉末；按質(zhì)量比1:10比例稱取白花蛇舌草固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得白花蛇舌草提取物。
[0053](九)含有稠李多糖的抗喉癌保健品組合物
[0054]由以下原料按重量百分比組成:
[0055]稠李多糖40 %，稠李花色苷30 %，高粱米多肽5 %，板栗多肽5 %，
[0056]僵蠶提取物5%，桔梗提取物5%，薏苡仁提取物5%，白花蛇舌草提取物5%。
[0057](十)MTT實(shí)驗(yàn)
[0058]本實(shí)施例使用人喉癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞，采用MTT法檢測稠李多糖組合物體外抗癌活性，實(shí)驗(yàn)步驟如下:
[0059]I)取對數(shù)生長期的喉癌細(xì)胞系Ofep-2)細(xì)胞接種于96孔板，過夜培養(yǎng)使其貼壁；
[0060]2)稠李多糖組合物的濃度(25、50、100、150和200 μ g/ml)；
[0061 ] 3)分別在 24，48，or 72h 后加入 MTT (5mg/ml)；
[0062]4)然后將96孔板放在37 °C恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h ；
[0063]5)處理結(jié)束后，將MTT吸出，加入150 μ I的DMS0，使甲瓚晶體完全溶解；
[0064]6)通過測量每個(gè)孔在490nm處的吸光度值來評估Hep_2細(xì)胞的增值；結(jié)果如圖1所示。
[0065]如圖1所示，不同濃度的稠李多糖組合物(25、50、100、150和200 μ g/ml)分別孵育H印-2細(xì)胞24、48和72h，然后利用MTT比色法檢測。結(jié)果顯示，LMP2處理H印-2細(xì)胞一段時(shí)間后，濃度為50、100、150和200 μ g/ml的稠李多糖組合物均表現(xiàn)出顯著的抑制作用，最高濃度為200 μ g/ml組抑制率在72h后達(dá)到了 37.2 %，結(jié)果表明，稠李多糖組合物在體外可抑制人喉癌細(xì)胞生長。
[0066]( i^一 )集落形成實(shí)驗(yàn)
[0067]不同的處理組的H印-2細(xì)胞以每孔1000個(gè)細(xì)胞的密度接種于孔板上，培養(yǎng)過夜使其貼壁。分別加入100和200 μ g/ml的稠李多糖組合物培養(yǎng)10d，吸出培養(yǎng)基，每孔用PBS仔細(xì)洗兩次。使用甲醇將集落固定20min，然后用0.5%結(jié)晶紫染色15min，用清水沖洗并拍照，結(jié)果如圖2所示。
[0068]如圖2所示，稠李多糖組合物抑制Hep-2細(xì)胞集落形成的集落試驗(yàn)結(jié)果。稠李多糖組合物孵育H印-2細(xì)胞一段時(shí)間后，集落數(shù)量與對照組相比明顯降低。濃度為10yg/ml LMP2能夠顯著減少Hep-2細(xì)胞形成的集落，濃度為200 μ g/ml的LMP2在72h時(shí)集落數(shù)量顯著減少。
[0069](十二)Transwell實(shí)驗(yàn)
[0070]腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)采用直徑為6.5mm的transwell小室,其中內(nèi)孔大小為8.0 μ m。將H印-2細(xì)胞血清饑餓24h，然后使用胰蛋白酶消化，計(jì)數(shù)，并用無血清1640培養(yǎng)基重懸。大約IX 15細(xì)胞被接種到上層小室，下層小室加入含有10%胎兒牛血清的1640培養(yǎng)基。細(xì)胞放在37°C培養(yǎng)24h。培養(yǎng)后，上層小室內(nèi)表面的細(xì)胞被遷移。將穿過小室的細(xì)胞固定和染色并在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組做三個(gè)平行取其平均值，結(jié)果如圖3所示。
[0071]由圖3可見，腫瘤細(xì)胞的一個(gè)重要特點(diǎn)是他們具有入侵和遷移到遠(yuǎn)端器官的能力，這是幾乎所有癌癥死亡的主要原因，利用Transwell實(shí)驗(yàn)分析稠李多糖組合物對Hep2細(xì)胞的遷移影響。如圖3所示，與對照組相比，稠李多糖組合物處理組Hep-2細(xì)胞跨膜遷移的數(shù)量大幅下降，結(jié)果顯示稠李多糖組合物可以顯著抑制Hep-2細(xì)胞遷移。
[0072]實(shí)施例2含有稠李多糖的抗喉癌保健品
[0073]含有稠李多糖的抗喉癌保健品，由以下原料按重量百分比組成:
[0074]稠李多糖30%，稠李花色苷20%，高粱米多肽5%，板栗多肽5%，
[0075]僵蠶提取物10%，桔梗提取物10%，薏苡仁提取物10%，白花蛇舌草提取物10%。
[0076]實(shí)施例3含有稠李多糖的抗喉癌保健品
[0077]含有稠李多糖的抗喉癌保健品，由以下原料按重量百分比組成:
[0078]稠李多糖50%，稠李花色苷20%，高粱米多肽5%，板栗多肽5%，
[0079]僵蠶提取物5%，桔梗提取物5%，薏苡仁提取物5%，白花蛇舌草提取物5%。
【權(quán)利要求】
1.含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于由以下原料按重量百分比組成: 稠李多糖30%-50%，稠李花色苷20%-40%，高粱米多肽5%-10%， 板栗多肽5 % -10 %， 僵蠶提取物5 % -10 %， 桔梗提取物5 % -10 %， 薏苡仁提取物5% -10%，白花蛇舌草提取物5% -10%。
2.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:稠李多糖的制備方法如下: 1)超聲浸提:料液比按質(zhì)量比1:10-1:50，將稠李凍干粉溶于水中，控制溫度為50-90°C, pH值5.0-9.0，超聲波功率為100W-500W，超聲時(shí)間為10min-50min，離心，取提取液繼續(xù)進(jìn)行微波提??； 2)微波輔助提取:取提取液，微波功率300W-500W，微波時(shí)間為20min-60min，離心，取提取液繼續(xù)進(jìn)行復(fù)合酶酶解； 3)復(fù)合酶酶解提取:取提取液，復(fù)合酶加入量為提取液重量的1.0% -5.0%，控制溫度為30-60°C，pH 3.0-6.0，酶解時(shí)間為30min_60min ;抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加入4倍體積的95%乙醇沉淀多糖，離心，去除上清液，冷凍干燥。
3.如權(quán)利要求2所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:0.5?2的混合。
4.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的稠李花色苷的制備方法如下: 1)復(fù)合酶酶解提取:料液比按質(zhì)量比1:10-1:50，將稠李凍干粉溶于水，復(fù)合酶加入量為稠李凍干粉的總重量的1.0% -5.0%，進(jìn)行熱水浸提，控制溫度為30-70°C，pH范圍值3.0-6.0,酶解時(shí)間為30min-60min,離心,過濾,提取液備用,沉淀物繼續(xù)進(jìn)行微波提?。? 2)微波輔助提取:料液比按質(zhì)量比1:10-1:15，將沉淀物溶于水，微波功率3001-500評，微波時(shí)間為20min-60min，離心，過濾，提取液備用，沉淀物繼續(xù)進(jìn)行超聲浸提； 3)超聲浸提:料液比按質(zhì)量比1:10-1:15，將沉淀物溶于乙醇中，超聲波功率為100W-500W，超聲時(shí)間為10min-50min，pH值為2-6，抽濾，提取液備用； 4)合并復(fù)合酶酶解的提取液、微波輔助的提取液和超聲浸提的提取液，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后得到粗稠李花色苷干粉； 5)大孔樹脂靜態(tài)純化:粗稠李花色苷干粉配成8mg/ml的水溶液，靜態(tài)吸附條件是:溫度20°C，樹脂的添加量為0.16g/ml ;解析條件是:解吸劑70%乙醇，pH值為3，溫度為60°C，得稠李花色苷干粉。
5.如權(quán)利要求4所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的復(fù)合酶是纖維素酶與果膠酶按質(zhì)量比1:0.5?2的混合。
6.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的僵蠶提取物的制備方法:在室溫條件下，稱量粉碎成200目的僵蠶固體粉末；分別按質(zhì)量比1:10比例稱取僵蠶固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得僵蠶提取物。
7.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的桔梗提取物的制備方法:在室溫條件下，稱量粉碎成200目的桔梗固體粉末；分別按質(zhì)量比1:10比例稱取桔梗固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得桔梗提取物。
8.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的薏苡仁提取物的制備方法:在室溫條件下，稱量粉碎成200目的薏苡仁固體粉末；分別按質(zhì)量比1:10比例稱取薏苡仁固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得薏苡仁提取物。
9.如權(quán)利要求1所述的含有稠李多糖的抗喉癌保健品，其特征在于:所述的白花蛇舌草提取物的制備方法:在室溫條件下，稱量粉碎成200目的白花蛇舌草固體粉末；分別按質(zhì)量比1:10比例稱取白花蛇舌草固體粉末和去離子水，超聲破碎30min，室溫浸提3h，濾紙初過濾、超濾膜超濾，超濾液無菌冷凍干燥，得白花蛇舌草提取物。
【文檔編號】C07H17/065GK104366192SQ201410679878
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】劉劍利, 曹向宇, 楊威, 孫宇航, 于慧, 楊思敏, 劉曉 申請人:遼寧大學(xué)