技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種結(jié)直腸癌易感基因變異文庫(kù)構(gòu)建方法,包括以下步驟:A.根據(jù)結(jié)直腸癌相關(guān)基因的變異區(qū)域,設(shè)計(jì)能夠檢測(cè)這些變異區(qū)域的引物對(duì);B.計(jì)算得到各引物對(duì)的判斷參數(shù)R,將判斷參數(shù)R的值小于或等于1的引物對(duì),歸為第一組引物組合液,將判斷參數(shù)R的值大于1的引物對(duì),歸為第二組引物組合液;C.將待測(cè)樣品DNA抽提純化;D.分別采用第一組引物組合液和第二組引物組合液對(duì)純化后的樣品進(jìn)行初始PCR擴(kuò)增;E.對(duì)所述目標(biāo)片段進(jìn)行接頭連接得到帶接頭片段;F.采用第一組引物組合液和第二組引物組合液的混合液進(jìn)行文庫(kù)PCR擴(kuò)增,得到測(cè)序文庫(kù)。本發(fā)明的結(jié)直腸癌易感基因變異文庫(kù)構(gòu)建方法所構(gòu)建的文庫(kù)測(cè)序通量高,靈敏度強(qiáng),特異性強(qiáng),能夠用于檢測(cè)游離DNA低頻突變的。
技術(shù)研發(fā)人員:王明;趙會(huì)
受保護(hù)的技術(shù)使用者:上海賽安生物醫(yī)藥科技有限公司
文檔號(hào)碼:201611187868
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.20
技術(shù)公布日:2017.05.31