0h;
[0059] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量20%(v/v)，在32°C下通氣培養(yǎng)19化，得種子液；
[0060] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中已檢測(cè)不到葡萄糖、木糖和半乳糖醒酸，甘油殘余 2.8g/l;固液分離收集菌體，得干菌體28. Ig/L，油脂量17.4g/L，油脂含量61.9%(w/w)。 [0061 ] 實(shí)施例5
[0062] 1)粗甘油和玉米忍水解液混合物的制備:稱取50g過(guò)20目篩的玉米忍，按100 % (w/ W)的固液比添加2.5%(w/w)的硫酸浸潤(rùn)24h后，190°C水蒸汽氣爆處理3min;調(diào)整固液比至 15%(w/w)，添加纖維素酶20FPU/g、β-葡萄糖巧酶40CBU/g和木聚糖酶200U/g，調(diào)整pH至 4.8，于水浴搖床中50°C、200rpm水解72h，得水解液;真空抽濾得水解上清，上清中葡萄糖和 木糖濃度分別為38. Ig/L和34.4g/L，添加粗甘油(菜巧油制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物)至終 濃度為60g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比132，調(diào)整pH至5.0后于121°C滅菌20min后備 用；
[0063] 2)白色隱球酵母Cryptococcus a化idus ATCC 56298(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏 中屯、）接種在YEPD種子培養(yǎng)基（葡萄糖20g/L，酵母粉lOg/L，蛋白腺20g/L)中，20°C，200巧m 振蕩培養(yǎng)28h;
[0064] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量12%(v/v)，在20°C下通氣培養(yǎng)240h;
[0065] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖、木糖和甘油的濃度分別為0g/L，1.5g/L和 3.4g/l;固液分離收集菌體，得干菌體36.9g/L，油脂量24.2g/L，油脂含量65.8% (w/w)。
[0066] 實(shí)施例6
[0067] 1)粗甘油和銀末水解液混合物的制備:參照文獻(xiàn)化rishnan C,et al .Biotechnol Bioeng. 2010，107:441-450),?銀末為原料，粉碎過(guò)20目篩，加水成150% (w/w)的固液比， 按2:l(w/w)混合氨水和稻草，140°C氨膨脹處理30min，冷卻至50°C時(shí)，調(diào)整固液比為2%(w/ W)，調(diào)pH 5.3，添加纖維素酶15FPU/g、β-葡萄糖巧酶30CBU/g和木聚糖酶40U/g，調(diào)整pH至 4.8，于水浴搖床中50°C、200巧m水解72h，得水解液；水解液煮沸5min，真空抽濾得水解上 清，上清中葡萄糖和木糖濃度分別為5.5g/L和4.4g/L，添加粗甘油(棟桐油制備生物柴油過(guò) 程的副產(chǎn)物)至終濃度為90g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比400，調(diào)整抑至5.0后于121°C 滅困20min后備用；
[0068] 2)圓紅冬抱酵母lihodosporidium toruloides AS 2.1389(購(gòu)自中國(guó)普通微生物 菌種保藏管理中屯、)接種在種子培養(yǎng)基(甘油20g/L，玉米漿5g/L)中，37°C，200rpm振蕩培養(yǎng) 24h；
[0069] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量20%(v/v)，在37°C下通氣培養(yǎng)19化；
[0070] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中檢測(cè)不到葡萄糖和木糖，殘余甘油為2. IgA;固液分離 收集菌體，得干菌體22.7g/L，油脂量16.5g/L，油脂含量72.8 % (w/w)。
[0071] 實(shí)施例7
[0072] 1)粗甘油和云杉水解液混合物的制備：參照文獻(xiàn)（Xie HB，et al.Green Chem. 2012,14:1202-1210)，W20g云杉為原料，粉碎過(guò)20目篩，按照10% (w/w)的固液比加 入乙基甲基咪挫醋酸液和N-甲基化咯燒酬的混合液，140°C處理60min，冷卻至50°C時(shí)，用甲 醇再生麥桿，按照固液比20%(w/w)，添加纖維素酶15FPU/g、i3-葡萄糖巧酶30CBU/g和木聚 糖酶40U/g，調(diào)整抑至4.8，于水浴搖床中50°C、200巧m水解4她，得水解液;上清中葡萄糖和 木糖濃度分別為86.5g/L和40.4g/L，添加粗甘油(棟桐油制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物)至終 濃度為31.7g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比59，調(diào)整抑至4.0后于121°C滅菌20min后備 用；
[0073] 2)深黃被抱霉Modierella isabellina ATCC 42613(購(gòu)自美國(guó)典型微生物菌種 保藏管理中屯、)接種在PDA種子培養(yǎng)基中，34°C，200巧m振蕩培養(yǎng)2地；
[0074] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量20%(v/v)，在34°C下通氣培養(yǎng)25化；
[0075] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中檢測(cè)不到葡萄糖和木糖，殘余甘油為2. IgA;固液分離 收集菌體，得干菌體44.7g/L，油脂量27.5g/L，油脂含量62.2 % (w/w)。
[0076] 實(shí)施例8
[0077] 1)粗甘油和小麥桿水解液混合物的制備:參照文獻(xiàn)(Perez JA，et al.化el ,2008， 87:3640-3647)的優(yōu)化方法，稱取50g過(guò)20目篩的小麥桿，進(jìn)行高溫水熱預(yù)處理;調(diào)整固液比 至4% (w/w)，添加纖維素酶lOFPU/g和β-葡萄糖巧酶20CBU/g，調(diào)整抑至4.8，于水浴搖床中 50°C、200rpm水解2地，得水解液；真空抽濾得水解上清，上清中葡萄糖和木糖濃度分別為 10.2g/L和6.6g/L，添加粗甘油（光皮樹(shù)果油脂制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物）至終濃度為 6〇g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比214，調(diào)整抑至5.0后于121°C滅菌20min后備用；
[0078] 2)卷枝毛霉Mucorci;rcinelloidesAS 3.2208(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管 理中屯、)接種在PDA種子培養(yǎng)基中，25°C，200巧m振蕩培養(yǎng)2她；
[0079] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量10%(v/v)，在25°C下通氣培養(yǎng)10化；
[0080] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中未檢測(cè)到葡萄糖、木糖和甘油；固液分離收集菌體，得 干菌體20.9g/L，油脂量14.2g/L，油脂含量67.9 % (w/w)。
[0081 ] 實(shí)施例9
[0082] 1)粗甘油和甜高梁渣水解液混合物的制備：參照文獻(xiàn)(Perez JA，et al.Fuel, 2008，87: 3640-3647)的優(yōu)化方法，稱取50g過(guò)40目篩的甜高梁渣，進(jìn)行高溫水熱預(yù)處理；調(diào) 整固液比至5 % (w/w)，添加纖維素酶lOFPU/g和β-葡萄糖巧酶20CBU/g，調(diào)整pH至4.8，于水 浴搖床中50°C、200rpm水解2地，得水解液;真空抽濾得水解上清，上清中葡萄糖和木糖濃度 分別為13. Ig/L和10.2g/L，添加粗甘油(彎曲隱球酵母油脂制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物)至 終濃度為25g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比68,調(diào)整pH至7.0后于121°C滅菌20min后備 用；
[0083] 2)粘紅酵母lihodotorula glutinis AS 2.703(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管 理中屯、）接種在YEPD種子培養(yǎng)基（葡萄糖20g/L，酵母粉lOg/L，蛋白腺lOg/L)中，30°C， 20化pm振蕩培養(yǎng)2她，得種子液；
[0084] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量2%(v/v)，在30°C下通氣培養(yǎng)72h;
[0085] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余木糖0.5g/M固液分離得干菌體20.1g/L，油脂量 9.6邑/1，油脂含量47.8%。
[0086] 實(shí)施例10
[0087] 1)粗甘油和柳枝稷水解液混合物的制備：參照文獻(xiàn)（Varga E，et al.Appl Biochem 81〇16^111〇1，2004，113,509-523)的氣爆方法，稱取50旨過(guò)40目篩的柳枝稷，進(jìn)行氣 爆預(yù)處理;調(diào)整固液比至2% (w/w)，添加纖維素酶lOFPU/g和β-葡萄糖巧酶20CBU/g，調(diào)整抑 至4.8,于水浴搖床中50°C、200rpm水解4她，得水解液;真空抽濾得水解上清，上清中葡萄糖 和木糖濃度分別為5.8g/L和3.2g/L，添加粗甘油(小桐子油脂制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物） 至終濃度為90g/L，得到產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比324,調(diào)整抑至8.0后于121°C滅菌20min后 備用；
[0088] 2)彎曲隱球酵母Cryptococ州S curvatus ATCC 20509(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏 中屯、）接種在種子培養(yǎng)基(甘油20g/L，酵母粉5g/L，蛋白腺3g/L)中，28°C，200rpm振蕩培養(yǎng) 24h；
[0089] 3)向步驟1)所得產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基中接入步驟2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種 量5%(v/v)，在28°C下通氣培養(yǎng)180h;
[0090] 4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余甘油1.5g/l;固液分離收集菌體，得干菌體32. Ig/ 1，油脂量18.5旨/1，油脂含量57.8%(>/訊）。
[0091] 實(shí)施例η
[0092] 1)粗甘油和芒草水解液混合物的制備：參照文獻(xiàn)（Park JY,et al .Bioresour Technol，2010，101:6805-6811)，稱取50g過(guò)40目篩的芒草進(jìn)行生石灰預(yù)處理；調(diào)整固液比 至8% (w/w)，添加纖維素酶lOFPU/g和β-葡萄糖巧酶20CBU/g，調(diào)整抑至4.8，于水浴搖床中 50°C、200rpm水解72h，得水解液；真空抽濾得水解上清，上清中葡萄糖和木糖濃度分別為 21.2g/L和13.2g/L，添加粗甘油(豬油制備生物柴油過(guò)程的副產(chǎn)物)至終濃度為30g/L，得到 產(chǎn)油微生物培養(yǎng)基，C/N比102，調(diào)整抑至4.0后于121°C滅菌20min后備用；
[0093] 2)斯達(dá)油脂酵母Lipomyces stark巧i AS 2.1560(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏 管理中屯、)接種在種子培養(yǎng)基(甘油20g/L，酵母粉5g