酵母中海藻糖含量的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種酵母中海藻糖含量的測定方法，屬于食品添加劑及其檢測方法領(lǐng)域。所述的酵母中海藻糖含量的測定方法,包括以下步驟：(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然后稀釋至質(zhì)量濃度分別為3.00g/100ml、1.50g/100ml、1.00g/100ml、0.50g/100ml、0.10g/100ml、0.05g/100ml和0.01g/100ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。(2)樣品準(zhǔn)備：取膏狀酵母抽提物5g，加水定容至100ml，3000r/min離心分離10min，上清液用0.45μm膜過濾后，備用。(3)分析過程：在一定的色譜條件下分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Y與色譜峰面積x的關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品峰面積計(jì)算樣品的濃度。本發(fā)明所述的測定方法采用高效液相色譜法，本方法具有簡單快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)。因此，本發(fā)明所述的測定方法適用于生產(chǎn)過程及其應(yīng)用廠家的監(jiān)測及檢測。
【專利說明】酵母中海藻糖含量的測定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種酵母中海藻糖含量的測定方法，屬于食品添加劑及其檢測方法領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002]海藻糖是廣泛存在于動植物體內(nèi)的一種非還原性雙糖，它是一種優(yōu)良保鮮劑和防腐劑，已被廣泛用于食品、化妝品、藥品、保健品、酶和疫苗等的穩(wěn)定保存。海藻糖對生物體組織和生物大分子具有的非特異性保護(hù)作用，即生物體在極端干燥條件下可將體內(nèi)99%的水脫去而不死亡，并能將生命保持?jǐn)?shù)年乃至數(shù)十年以上，一旦條件適宜又可復(fù)活過來。20世紀(jì)90年代以來，隨著對海藻糖特異性認(rèn)識的逐步深入，有關(guān)其生物學(xué)功能、生產(chǎn)方法及應(yīng)用的研究報(bào)道和專利不斷涌現(xiàn)，已逐漸成為國際上研究和開發(fā)的熱點(diǎn)。測定酵母中海藻糖的主要方法有蒽酮比色法和酶水解法兩種，蒽酮法基于糖和蒽酮的顯色反應(yīng)原理，但在遇到能與蒽酮反應(yīng)的其他物質(zhì)時，常使測定值偏大；有人采用海藻糖酶水解法測定海藻糖含量，但也有一定的限制。因此，建立一種簡便、快速、準(zhǔn)確測定酵母中海藻糖含量的方法很有必要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明旨在提供一種簡便、快速、準(zhǔn)確測定酵母中海藻糖含量的方法。
[0004]本發(fā)明所述的酵母中海藻糖含量的測定方法，包括以下步驟:
(I)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然后稀釋至質(zhì)量濃度分別為3.00g/100mlU.50g/100ml、l.00g/100mU0.50g/100ml、0.lOg/lOOmU0.05g/100ml 和0.0lg/lOOml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
[0005](2)樣品準(zhǔn)備:
取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml, 3000r/min離心分離1min,上清液用
0.45 μ m膜過濾后,備用。
[0006](3)分析過程:
在一定的色譜條件下分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Y與色譜峰面積X的關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品峰面積計(jì)算樣品的濃度。
[0007]優(yōu)選的，本發(fā)明所述的色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型，8mmIDX300mmL，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細(xì)微顆粒雜質(zhì)和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min,柱溫70°C，進(jìn)樣量20 μ L。
[0008]本發(fā)明所述的檢測方法采用高效液相色譜法，經(jīng)測定，海藻糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度在
0.01-3.00g/100ml范圍內(nèi)，Y=98.623Χ-0.4041，濃度與峰面積呈較好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)為0.9995，該KS-801柱可作為標(biāo)準(zhǔn)曲線對酵母抽提物中的海藻糖組分進(jìn)行色譜分析。
[0009]本發(fā)明所述的測定方法采用高效液相色譜法，本方法具有簡單快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)。因此，本發(fā)明所述的測定方法適用于生產(chǎn)過程及其應(yīng)用廠家的監(jiān)測及檢測。

【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例一:
(I)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然后稀釋至質(zhì)量濃度分別為3.00g/100mlU.50g/100ml、l.00g/100mU0.50g/100ml、0.lOg/lOOmU0.05g/100ml 和0.0lg/lOOml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
[0011](2)樣品準(zhǔn)備:
取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml, 3000r/min離心分離1min,上清液用0.45 μ m膜過濾后,備用。
[0012](3)分析過程:
在一定的色譜條件下(色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型(8mmIDX300mmL)，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細(xì)微顆粒雜質(zhì)和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min，柱溫70°C，進(jìn)樣量20 μ L)分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Y與色譜峰面積X的關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)測定，海藻糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度在
0.01-3.00g/100ml范圍內(nèi)，Y=98.623Χ-0.4041，濃度與峰面積呈較好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)為0.9995。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品峰面積計(jì)算樣品的濃度。
[0013]通過對本發(fā)明所述的檢測方法，檢測由安琪酵母公司提供的酵母抽提物(含約10 %的海藻糖)進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果為酵母中海藻糖純度為10.25 %，海藻糖在酵母中含量為7.16% (折干)。
【權(quán)利要求】
1.酵母中海藻糖含量的測定方法，包括以下步驟: (1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:精確稱量分析級海藻糖3g，溶解定容至100ml，然后稀釋至質(zhì)量濃度分別為 3.00g/100ml、l.50g/100ml、l.00g/100ml、0.50g/100ml、0.10g/100ml、0.05g/100ml和0.0lg/lOOml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用； (2)樣品準(zhǔn)備:取膏狀酵母抽提物5g,加水定容至100ml,3000r/min離心分離1min,上清液用0.45 μ m膜過濾后,備用； (3)分析過程:在一定的色譜條件下分析標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Y與色譜峰面積X的關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線； 再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品峰面積計(jì)算樣品的濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的酵母中海藻糖含量的測定方法，其特征在于所述的色譜條件為色譜柱為KS-801鈉型，8mmIDX300mmL，流動相為純水；先真空泵抽濾通過0.45 μ m合成纖維素酯膜，起到除去細(xì)微顆粒雜質(zhì)和脫氣作用，流速選用為0.8ml/min，柱溫70°C，進(jìn)樣量 20 μ L。
【文檔編號】G01N30/02GK104316612SQ201410574056
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月24日
【發(fā)明者】李勇, 劉文斌 申請人:西安米億生物科技有限公司