本發(fā)明涉及于面向環(huán)境分析，具體是指一種鈣質土壤中有機磷提取及液相31p-nmr檢測的方法。
背景技術：
1、土壤中含有無機磷和有機磷，其中有機磷占土壤總磷的35-65％，了解土壤有機磷的變化動態(tài)對深入理解土壤磷的生物地球化學循環(huán)過程，以及建立高效的可持續(xù)農(nóng)業(yè)管理措施具有重要意義。
2、土壤中的無機磷主要以正磷酸鹽為主，其含量可以通過分光光度法和icp-oes法進行測定，土壤中有機磷的含量可通過酸提取的無機磷與消解后提取的總磷含量進行差減估算，同時，也可針對特定土壤有機磷形態(tài)進行提取，采用色譜法進行分析，例如使用氯仿、甲醇和水或二氯甲烷和甲醇提磷脂，隨后進行色譜分離和含量測定，但是，這種方法不能確定有機磷形態(tài)，只能確定某種特定形態(tài)有機磷的含量。土壤中有機磷分子形態(tài)種類繁多，有必要在分子水平上分析土壤有機磷的形態(tài)及其組成。
3、當前應用最廣泛的提取方法是edta-naoh一步提取法，堿性溶劑中edta通過螯合金屬陽離子提高了土壤有機磷的提取率。但對于鈣質土壤，其含有大量可溶性鈣離子，在用堿溶液進行提取時易生成鈣鹽沉淀，進而導致有機磷固定而降低有機磷提取率。因此，有必要改進鈣質土的有機磷提取率方法，這對準確的評估鈣質土中磷儲量、形態(tài)及其生物有效性具有重要的實際意義。
技術實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明要解決上述技術問題，提供一種鈣質土壤中有機磷提取及液相31p-nmr檢測的方法。
2、為解決上述技術問題，本發(fā)明提供的技術方案為：
3、一種鈣質土壤中有機磷的提取方法，包括以下步驟：
4、s1、土壤預處理：
5、將土壤挑除雜物，冷凍干燥后，制備自然顆粒度，然后篩并充分混勻，裝入瓶內，置于20-30℃下遮光培養(yǎng)8-15d，得到土壤樣品，
6、s2、取樣：
7、取土壤樣品加入10％的hcl靜置20min令caco3充分反應，得到沉淀物一，沉淀物一離子水清洗3次，到沉淀物二；
8、取土壤樣品用naoh-edta混合液進行提取，得到上清液一和沉淀物三；
9、s4、提?。?/p>
10、沉淀物二用naoh-edta混合液進行提取，得到上清液二，進行冷凍干燥，在進行nmr測試。
11、優(yōu)選的，所述的離心采用離心機且參數(shù)為7000-8000r·min-1離心8-10min。
12、一種堿性鈣質土壤中有機磷的液相31p-nmr檢測方法，包括如下步驟：所述鈣質土壤中有機磷的提取方法得到的上清液三、上清液一或上清液二的其中一種或者兩種混合，放入核磁共振儀中，即可進行液相31p-nmr檢測。
13、優(yōu)選的，所述核磁共振儀的運行條件為溫度20-25℃，共振頻率120-135mhz，脈沖為10-12usec，脈沖功率2.5-3db,循環(huán)延遲2-4s,掃描5000-9000次。
14、采用以上方法后，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：
15、本發(fā)明通過從多次和多級的提取液中檢測磷，從沉淀物二用naoh-edta混合液進行提取，得到上清液二，進行冷凍干燥，再進行nmr測試；沉淀物三加入10％的hci靜置20min令caco3充分反應，得到沉淀物四，沉淀物四用naoh-edta混合液進行提取得到上清液三，上清液三和上清液一混合冷凍干燥進行nmr測試，可準確的檢測出鈣質土壤的有機磷提取量，土壤有效磷主要來自自由擴散的無機磷和易礦化的有機磷。
16、上述概述僅僅是為了說明書的目的，并不意圖以任何方式進行限制。除上述描述的示意性的方面、實施方式和特征之外，通過參考以下的詳細描述，本發(fā)明進一步的方面、實施方式和特征將會是容易明白的。
1.一種鈣質土壤中有機磷的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權利要求1所述的一種鈣質土壤中有機磷的提取方法，其特征在于：所述的離心采用離心機且參數(shù)為7000-8000r·min-1離心8-10min。
3.一種堿性鈣質土壤中有機磷的液相31p-nmr檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：采用權利要求1中任一項所述鈣質土壤中有機磷的提取方法得到的上清液三、上清液一或上清液二的其中一種或者多種混合，放入核磁共振儀中，即可進行液相31p-nmr檢測。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種堿性鈣質土壤中有機磷的液相31p-nmr檢測方法，其特征在于：所述核磁共振儀的運行條件為溫度20-25℃，共振頻率120-135mhz，脈沖為10-12usec，脈沖功率2.5-3db,循環(huán)延遲2-4s,掃描5000-9000次。