本發(fā)明涉及生物檢驗，特別涉及一種傳染性疾病標志物復(fù)合質(zhì)控品及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、乙型肝炎是一種損害肝臟的病毒感染，可引起急性或慢性疾病。乙肝是一個主要全球衛(wèi)生問題。肝炎病毒感染者包括肝炎病毒攜帶者和肝炎患者，乙型肝炎(hbv)是主要肝炎類型。丙型肝炎（hcv）是由丙型肝炎病毒所引起的。梅毒是由于梅毒螺旋體（treponemapallidum?,tp）感染所致的一種性傳播性疾病，以性接觸傳染為主，少部分可通過胎盤、產(chǎn)道、輸血非性接觸間接解觸而感染。艾滋病（aids），中文全稱為獲得性免疫缺陷綜合征，是一種由人類免疫缺陷病毒(hiv)所引起的慢性傳染病。自1981年發(fā)現(xiàn)艾滋病以來，艾滋病以驚人的速度在全球蔓延，嚴重威脅著人類的健康并影響社會的發(fā)展；更為嚴重的是，全球艾滋病流行的勢頭還在迅猛上升。上述四種感染性疾病是醫(yī)院術(shù)前必查的指標，旨在手術(shù)過程中防范、減少和避免這些病毒在院內(nèi)的交叉感染和傳播以及防范醫(yī)療風(fēng)險和醫(yī)療糾紛的發(fā)生，而室內(nèi)質(zhì)控的目的就在于檢測和控制本實驗室常規(guī)工作的精密度及檢測其準確度的改變，以提高本實驗室常規(guī)工作中標本檢測的一致性，從而保證檢驗報告的準確發(fā)出，因此室內(nèi)質(zhì)控品的品質(zhì)是醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量管理的基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

2、然而現(xiàn)有質(zhì)控品在實際應(yīng)用中存在以下技術(shù)缺點：穩(wěn)定性不足：許多質(zhì)控品在存儲和運輸過程中容易降解，導(dǎo)致成分和濃度變化，影響檢測結(jié)果的可靠性。適用范圍有限：一些質(zhì)控品僅適用于特定的檢測儀器或方法，缺乏廣泛的適配性，限制了其在不同實驗室和檢測系統(tǒng)中的應(yīng)用。復(fù)雜的操作流程：現(xiàn)有質(zhì)控品的使用過程可能涉及多個步驟，增加了操作的復(fù)雜性和人為錯誤的風(fēng)險?；|(zhì)效應(yīng)：某些質(zhì)控品可能存在基質(zhì)效應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果受到樣本基質(zhì)的干擾，從而產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果。保存條件要求嚴格：許多質(zhì)控品需要在特定的溫度和濕度條件下保存，這對實驗室的存儲條件提出了挑戰(zhàn)。缺乏多標志物組合：許多質(zhì)控品只針對單一標志物，無法滿足同時檢測多種病原體的需求，降低了操作效率。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明提出一種高效、穩(wěn)定且適用范圍廣的傳染病標志物復(fù)合質(zhì)控品。

2、本發(fā)明提供了一種傳染性疾病標志物復(fù)合質(zhì)控品，包括如下組分：

3、基質(zhì)液、0.1~1?v/v?%表面活性劑、0.1~1?v/v?%防腐劑、1~5g/l蛋白氨基酸穩(wěn)定劑、1~10g/l海藻糖、1~10g/l(nh4)2so4和傳染病標志物；

4、所述基質(zhì)液包括25~50v/v%人源血清和緩沖液；基質(zhì)液提供了支持標志物穩(wěn)定性和活性的基本環(huán)境，模擬生物體內(nèi)的體液環(huán)境，確保復(fù)合質(zhì)控品的結(jié)構(gòu)和功能在體外應(yīng)用中接近真實生物體環(huán)境。人源血清為復(fù)合質(zhì)控品提供了含有天然蛋白質(zhì)、免疫球蛋白等生物分子的復(fù)雜基質(zhì)。而本發(fā)明的質(zhì)控品各組分復(fù)配避免了人源血清基質(zhì)中的成分與傳染病復(fù)合質(zhì)控品的非特異性結(jié)合，提供保護作用，減少蛋白質(zhì)變性或聚集。

5、所述防腐劑為pc300和肉桂醛的組合；本發(fā)明通過長期的篩選工作發(fā)現(xiàn)，在質(zhì)控品中添加一定量的肉桂醛能夠有效提高五種傳染病復(fù)合標志物復(fù)配的穩(wěn)定性，延緩標志物的降解過程，從而延長其有效期，確保標志物在質(zhì)控品中的表現(xiàn)一致；肉桂醛與廣譜防腐劑pc300復(fù)配時，能夠幫助延長質(zhì)控品的保質(zhì)期、確保質(zhì)控品在長期存儲中的穩(wěn)定性。

6、所述蛋白氨基酸穩(wěn)定劑包括bsa、丙氨酸和甘氨酸中的任意多種。蛋白氨基酸穩(wěn)定劑在復(fù)合質(zhì)控品中起到保護作用，防止標志物蛋白的變性和降解。bsa（牛血清白蛋白）具有防止蛋白質(zhì)吸附和穩(wěn)定蛋白結(jié)構(gòu)的作用，丙氨酸和甘氨酸等氨基酸能夠通過與蛋白分子形成氫鍵或通過與水分子的相互作用，減緩蛋白質(zhì)的降解和失活，增強其穩(wěn)定性。

7、所述傳染病標志物為乙型肝炎病毒表面抗原（hbsag）、乙型肝炎病毒e抗原（hbeag）、丙型肝炎病毒抗體（anti-hcv）、人類免疫缺陷病毒抗體（anti-hiv）和梅毒螺旋體抗體（anti-tp）的組合。

8、本發(fā)明在質(zhì)控品中添加量一定量的(nh4)2so4可幫助調(diào)節(jié)溶液的滲透壓和離子強度，進一步復(fù)合傳染病標志物，并有助于保持傳染病標志物的溶解度和活性。此外，硫酸銨可以通過控制蛋白質(zhì)的溶解性，減少蛋白質(zhì)的降解和非特異性結(jié)合。

9、在一些實施方式中，所述表面活性劑為tween-20或trixon-100。

10、在一些實施方式中，所述緩沖液為氨基甲烷緩沖液、pbs緩沖液和hepes緩沖液中的任意一種。

11、在一些實施方式中，所述pc300和肉桂醛的體積比為1：1。

12、在一些實施方式中，所述傳染病標志物與基質(zhì)液體積比：

13、乙型肝炎病毒表面抗原標志物與基質(zhì)液：1/4000000～1/40000000；

14、乙型肝炎病毒e抗原標志物與基質(zhì)液：1/7500～1/75000；

15、人類免疫缺陷病毒抗體標志物與基質(zhì)液：1/200～1/2000；

16、丙型肝炎病毒抗體標志物與基質(zhì)液：1/1500～1/15000；

17、梅毒螺旋體抗體標志物與基質(zhì)液：1/200～1/2000。

18、本發(fā)明的標志物濃度需要模擬實際臨床樣本中的濃度范圍，以便進行驗證測試時能夠評估檢測試劑的準確性、靈敏度和特異性。上述比例范圍可以模擬各種檢測靈敏度和特異性要求，確保不同傳染性疾病的標志物能夠在一個標準化、可靠的范圍內(nèi)進行檢測驗證，幫助驗證檢測系統(tǒng)在各個靈敏度范圍內(nèi)的精度和穩(wěn)定性。

19、在一些實施方式中，所述基質(zhì)液的基質(zhì)液的梅毒螺旋體抗體、人類免疫缺陷病毒抗體、丙型肝炎病毒抗體、乙型肝炎病毒e抗原和乙型肝炎病毒表面抗原5項檢測結(jié)果均為陰性。確保在實際測試中，不會出現(xiàn)由基質(zhì)液自身的非特異性物質(zhì)引起的交叉反應(yīng)或假陽性反應(yīng)。檢測系統(tǒng)和試劑能專一地識別和檢測目標標志物（如乙型肝炎病毒表面抗原、梅毒螺旋體抗體等），從而確保檢測方法的特異性。

20、本發(fā)明還提供所述的傳染性疾病標志物復(fù)合質(zhì)控品的制備方法，包括如下步驟：

21、s1：配制基質(zhì)液，加入表面活性劑、防腐劑、蛋白氨基酸穩(wěn)定劑、海藻糖和(nh4)2so4，得到溶液1；；

22、s2：在s1所述溶液1中添加傳染病標志物，得到所述傳染性疾病標志物復(fù)合質(zhì)控品。

23、本發(fā)明還提供所述的傳染性疾病標志物復(fù)合質(zhì)控品在制備傳染性疾病標志物檢測試劑盒中的應(yīng)用。

24、綜上，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明達到了以下技術(shù)效果：

25、1、本技術(shù)通過將五種傳染病標志物復(fù)合，減少實驗室的操作步驟，從而提高檢測效率，降低人為錯誤的可能性。復(fù)合質(zhì)控品能夠適配多種主流檢測儀器，滿足不同實驗室的質(zhì)量控制需求，產(chǎn)品的市場競爭力強。

26、2、本技術(shù)通過使用人源血清和驗證多種穩(wěn)定劑的配比，尤其是防腐劑的選擇，確保質(zhì)控品的均勻性和穩(wěn)定性，從而提高檢測結(jié)果的可靠性。設(shè)計的質(zhì)控品能夠在-15℃以下保存36個月，延長使用周期，減少實驗室的更換頻率和成本。質(zhì)控品在檢測中無基質(zhì)效應(yīng)，減少因基質(zhì)干擾導(dǎo)致的假陽性或假陰性結(jié)果，提高檢測的準確性。