本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺的新應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、鈉鉀atp酶(na+,k+-atpase)是一種主要由?α?亞基和?β?亞基組成的哺乳動物細(xì)胞膜離子轉(zhuǎn)運泵，通過介導(dǎo)跨細(xì)胞膜na+/k+離子轉(zhuǎn)運來維持細(xì)胞內(nèi)外恒定的na+/k+濃度差，滲透壓平衡與促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收等功能。研究表明，na+,k+-atpase不僅僅是一種消耗atp的離子轉(zhuǎn)運泵，也是一個重要的參與信號傳導(dǎo)的膜蛋白。na+,k+-atpase的功能異常與很多疾病密切相關(guān)，如高血壓、腫瘤與諸多神經(jīng)系統(tǒng)疾病，因此na+,k+-atpase被越來越多的證據(jù)表明是一種潛在的藥物作用靶點?；趎a+,k+-atpase結(jié)構(gòu)與功能進(jìn)行藥物研發(fā)是相關(guān)研究領(lǐng)域的熱點，其中地高辛是最成功的例子，地高辛廣泛用于臨床心衰等心血管疾病治療已經(jīng)有200多年的歷史(woods,?k.?l.?et?al.,?journal?of?clinical?and?hospital?pharmacy,11(1),?11-13)。

2、研究表明，強心甾化合物（如地高辛）是一類na+,k+-atpase的天然配體化合物，這類化合物具有結(jié)構(gòu)相似的強心甾結(jié)構(gòu)母核，廣泛分布于夾竹桃科、玄參科等藥用植物（如毛花洋地黃）與動物藥蟾酥中，具有顯著的生理活性和藥用價值。強心甾化合物通過結(jié)合na+,k+-atpase的功能α?亞基，能抑制或激活na+,k+-atpase的離子泵與信號傳導(dǎo)功能，產(chǎn)生復(fù)雜與廣泛的藥理活性。哇巴因與地高辛是研究最深入，最具有代表性的強心甾化合物。在心肌細(xì)胞中，治療劑量的哇巴因與地高辛均能夠顯著抑制心肌細(xì)胞膜na+,k+-atpase的離子轉(zhuǎn)運活性，進(jìn)而升高細(xì)胞內(nèi)[ca2+]，產(chǎn)生正性心肌力作用。地高辛是臨床心血管疾病治療一線藥物，而哇巴因也因其對心臟的特殊保護(hù)作用，在上世紀(jì)70-80年代被歐洲藥典收載為心臟疾病治療藥物，并被譽為心臟的胰島素(fürstenwerth,h.?et?al.,?international?journalof?clinical?practice,?64(12),?1591-1594)。?除了具有顯著的心血管藥理活性，強心甾化合物也具有很強的抗腫瘤活性，很多化合物在世界各國進(jìn)入臨床抗腫瘤評價階段，但由于這類化合物治療窗口較窄、體內(nèi)療效有限等缺陷，目前尚未有強心甾化合物進(jìn)入臨床抗腫瘤應(yīng)用(nabil,?w.?n.?n.?et?al.,?drug?discovery?today,?29(10).?104129)。對現(xiàn)有化合物結(jié)構(gòu)改造，進(jìn)而篩選出活性更強、安全性更高的化合物是相關(guān)研究領(lǐng)域的重要研究方向。

3、二十世紀(jì)末，美國hamlyn?jm教授在nature雜志發(fā)表研究論文，證明了在人體體液中存在內(nèi)源性強心甾化合物，如內(nèi)源性哇巴因（endogenous?ouabain,?eo）。研究人員從300l人體混合血漿中，通過分離純化與質(zhì)譜檢測確認(rèn)了eo具有與植物來源的哇巴因具有相同的化學(xué)結(jié)構(gòu)(hamlyn,?j.?m.?et?al.,?proceedings?of?the?national?academy?ofsciences?of?the?united?states?of?america,?88(14),6259-6263)。進(jìn)一步研究表明eo是一種內(nèi)分泌激素樣物質(zhì)，主要由腎上腺分泌產(chǎn)生，進(jìn)入循環(huán)后在調(diào)節(jié)動脈壓、心臟以及腎臟功能中發(fā)揮重要作用(blaustein,?m.?p.?et?al.,?american?journal?of?physiology-cell?physiology,?326(4),?c1120-c1177)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)eo的血漿濃度很低（范圍從低納摩爾到皮摩爾，不同細(xì)胞類型而異），生理濃度的eo與受體?na+,k+-atpase結(jié)合后對該酶的na+/k+轉(zhuǎn)運活性并不產(chǎn)生顯著的影響，但是能促進(jìn)na+,k+-atpase招募其它信號分子形成信號傳導(dǎo)體，介導(dǎo)egfr、src等多種激酶的激活與下游信號通路的激活，進(jìn)而廣泛參與生理與病理調(diào)節(jié)(jansson,?k.?et?al.,?american?journal?of?physiology-renalphysiology,?303(7),?f982-f990)。研究表明eo在高血壓患者血液中異常高表達(dá)，是高血壓潛在生物標(biāo)志物；eo在慢性腎病中高表達(dá)，與腎臟功能受損和衰退相關(guān)(hamlyn,j.?m.et?al.,?advances?in?chronic?kidney?disease,?22(3),?232-244)；在最近的一項研究中，eo在非小細(xì)胞肺癌患者血液中高表達(dá)，且eo能促進(jìn)肺癌細(xì)胞免疫逃逸與轉(zhuǎn)移，可能是表征肺腺癌轉(zhuǎn)移的潛在生物標(biāo)志物之一(yang,?k.?y.?et?al.,?science?advances,?9(6).eade5393)。?綜上，研發(fā)eo的拮抗劑對治療相關(guān)疾病具有廣闊應(yīng)用前景。

4、1998年，意大利bianchi?教授團(tuán)隊開發(fā)了一種可以拮抗eo的小分子藥物rostafuroxin，該化合物能夠拮抗eo與na+,k+-atpase結(jié)合，進(jìn)而抑制eo誘導(dǎo)的高血壓，對部分高血壓人群顯示了較好的降壓治療效果，已經(jīng)完成了?ii期臨床試驗，但由于其安全性等多種因素，最終該藥物并沒有被批準(zhǔn)上市(ferrari,?p.?et?al.,?biochimica?etbiophysica?acta-molecular?basis?of?disease,?1802(12),?1254-1258)。因此，研發(fā)用于治療高血壓、慢性腎病、腫瘤轉(zhuǎn)移等相關(guān)疾病的藥理活性強、安全性更高的新型eo拮抗劑是有必要的。

5、本發(fā)明通過分子對接、結(jié)構(gòu)預(yù)測等人工智能藥物設(shè)計手段，發(fā)現(xiàn)新型na+,k+-atpase配體與內(nèi)(外)源性哇巴因拮抗劑，評價其在腫瘤轉(zhuǎn)移與腎臟纖維化等疾病治療中的應(yīng)用價值，為臨床相關(guān)疾病治療提供候選化合物。通過篩選與活性驗證，該化合物為n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺，英文名為n-{4-[(4-methylbenzyl)oxy]benzyl}-n-(4-piperidinylmethyl)amine，分子式：c21h28n2o，分子量324.47，smiles:cc1ccc(cc1)coc2ccc(cc2)cncc3ccncc3，其結(jié)構(gòu)式如下式ⅰ所示，現(xiàn)有技術(shù)中，該化合物被報道可能作為c-myc/c-kit?g-四鏈體的新型雙結(jié)合劑用于胃癌及肥大細(xì)胞白血病的治療中。

6、

7、式i

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺作為一種新型的na+,k+-atpase配體的應(yīng)用，該配體可作為內(nèi)(外)源性哇巴因拮抗劑，也可以在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移和慢性腎臟病藥物中發(fā)揮作用。

2、本發(fā)明提供了n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺作為鈉鉀atp酶配體的應(yīng)用。

3、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺在制備哇巴因抑制劑中的應(yīng)用。

4、基于作為哇巴因抑制劑的應(yīng)用，本發(fā)明進(jìn)一步提供了n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺及其光學(xué)異構(gòu)體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用，尤其是抗乳腺癌轉(zhuǎn)移。

5、基于作為哇巴因抑制劑的應(yīng)用，本發(fā)明進(jìn)一步還提供了n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺及其光學(xué)異構(gòu)體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥在制備抗慢性腎臟病藥物中的應(yīng)用。

6、本發(fā)明的上述應(yīng)用中，所述的抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物、抗慢性腎臟病藥物，可以是一種藥物組合物，其中包含n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺及其光學(xué)異構(gòu)體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物以及前藥或可作為唯一的藥物單獨使用，或者可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤轉(zhuǎn)移、抗慢性腎臟病藥物?(如抗體類藥物伊匹木單抗、腎素-血管緊張素系統(tǒng)抑制劑等)聯(lián)合使用。聯(lián)合治療通過將各個治療組分同時、順序或隔開給藥來實現(xiàn)。

7、本發(fā)明的n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺及其光學(xué)異構(gòu)體、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、前藥或其藥物組合物可以與藥學(xué)上可接受的載體制備成口服制劑或者注射制劑。

8、所述的口服制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、丸劑；所述的注射劑為注射劑或冷凍干燥粉針劑。

9、本發(fā)明以na+,k+-atpase為靶點，根據(jù)已報道的哇巴因拮抗劑rostafuroxin的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其與na+,k+-atpase的結(jié)合信息，通過分子對接、自由能計算等虛擬篩選技術(shù)，篩選出與na+,k+-atpase具有良好結(jié)合能力的小分子候選化合物，結(jié)合體外實驗對獲得的候選化合物進(jìn)行藥理活性測試和功能評價，發(fā)現(xiàn)了一種新型的na+,k+-atpase配體n-{4-[（4-甲基芐基）氧基]芐基}-n-（4-哌啶基甲基）胺，該化合物與na+,k+-atpase有著較高的親和力，可競爭性阻斷哇巴因與受體na+,k+-atpase的結(jié)合，達(dá)到封閉內(nèi)(外)源性哇巴因的作用。