本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)的方法。

背景技術(shù)：

絲狀真菌在工業(yè)化生產(chǎn)中有著廣泛的應(yīng)用，產(chǎn)品涵蓋了工業(yè)酶制劑(如淀粉酶、纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶等)、有機(jī)酸、抗生素等。在產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中，深層發(fā)酵的絲狀真菌在通常情況下存在3種形態(tài)：團(tuán)塊狀、絮狀和球狀。不同形態(tài)的絲狀真菌會(huì)直接影響發(fā)酵體系中物性參數(shù)、基質(zhì)傳遞等，所以生長(zhǎng)形態(tài)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品的生成，發(fā)酵過(guò)程的控制至關(guān)重要。絲狀真菌的生長(zhǎng)形態(tài)對(duì)細(xì)胞代謝途徑、產(chǎn)物積累及分離提取均有顯著影響，因此如何控制絲狀真菌的生長(zhǎng)形態(tài)，最大化提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量成工業(yè)生產(chǎn)研究的重點(diǎn)。

團(tuán)塊狀的菌體形態(tài)在發(fā)酵過(guò)程中接種量難于控制，且極大地限制了菌體內(nèi)部的傳氧、傳質(zhì)，產(chǎn)物產(chǎn)量明顯偏低，而且在攪拌式發(fā)酵罐發(fā)酵過(guò)程中，會(huì)纏繞在攪拌器上或者附壁，最終導(dǎo)致不能得到目標(biāo)產(chǎn)品，發(fā)酵失??；絮狀菌體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣在其內(nèi)部傳輸較為順利，但其能增加發(fā)酵液黏度，流變性相對(duì)較差，降低物質(zhì)、氧氣在發(fā)酵液中的傳遞效率，同時(shí)還極易纏繞攪拌槳，使發(fā)酵產(chǎn)物產(chǎn)量、發(fā)酵罐性能降低；球狀形態(tài)可以克服以上不足，改善發(fā)酵液的流變特性，有效提高傳質(zhì)、傳氧性能，降低能耗，但若菌球過(guò)大，菌球內(nèi)部傳質(zhì)、傳氧將發(fā)生困難，影響產(chǎn)物積累，因此規(guī)則的、適宜大小的球狀真菌則有利于酶制劑、有機(jī)酸等產(chǎn)品的生產(chǎn)。

然而，生長(zhǎng)形態(tài)發(fā)育作為絲狀真菌生命體的一種本能表現(xiàn)形式，受到影響因素多且過(guò)程復(fù)雜，比如說(shuō)菌種自身的影響、生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)環(huán)境的影響、發(fā)酵操作條件的影響等等，最終使得絲狀真菌的形態(tài)不能控制為理想的形態(tài)，或者菌球控制的重復(fù)性以及平行性不好。這就使得高效簡(jiǎn)便的形態(tài)控制技術(shù)顯得尤其重要。在絲狀真菌發(fā)酵過(guò)程中，不同代謝產(chǎn)物所適宜的形態(tài)不同，在不同形態(tài)下，代謝產(chǎn)物的積累差異明顯，球狀成為許多產(chǎn)品生產(chǎn)的首選形態(tài)，在固定化技術(shù)迅速發(fā)展的今天，控制菌體生長(zhǎng)成為菌球的自固化技術(shù)得到了巨大的發(fā)展。

環(huán)境是影響菌球形成的重要因素，不同環(huán)境條件下獲得的菌球結(jié)構(gòu)及大小各異。影響菌球形成及特性的因素一般有pH、接種孢子、培養(yǎng)基成分、攪拌轉(zhuǎn)速等，通過(guò)對(duì)這些因素的調(diào)控可以獲得產(chǎn)物積累的最佳形態(tài)。

Liu Y,Liao W,Chen SL.“Study of pellet formation of filamentous fungi Rhizopus oryzae using a multiple logistic regression model.”Biotechnol Bioeng,2008,99(1):117-128.中報(bào)道了：綜合考察了孢子濃度、葡萄糖、尿素、磷酸鹽、金屬離子的濃度、發(fā)酵體系pH、通風(fēng)攪拌對(duì)絲狀真菌生長(zhǎng)形態(tài)的影響，pH和接種量是影響絲狀真菌形態(tài)的主要原因，通過(guò)降低抱子濃度，嚴(yán)格調(diào)控范圍，有效將絲狀真菌控制為球狀。該技術(shù)方案的策略是：通過(guò)改變微生物生長(zhǎng)環(huán)境，抑制微生物的生長(zhǎng)，最終達(dá)到控制菌球形態(tài)的目的。其缺點(diǎn)在于，對(duì)pH的調(diào)節(jié)要求很高，常常要求將酸度調(diào)整精確到小數(shù)點(diǎn)后兩位，這使得難以在工業(yè)生產(chǎn)中放大。另外，一些產(chǎn)品的特性要求一定的酸度范圍，也使該技術(shù)方案的應(yīng)用受到限制。

Driouch H,Sommer B,Wittmann C.“Morphology engineering of Aspergillus niger for improved enzyme production.”Biotechnol Bioeng,2010,105(6):1058-1068.中報(bào)道了：利用微粒子在流場(chǎng)中與生產(chǎn)菌株的作用可以作為形態(tài)控制的有效策略。在利用黑曲霉產(chǎn)酶的時(shí)候，在發(fā)酵體系中加入二氧化硅等微粒子，有效將微生物體系的形態(tài)控制為絲狀，達(dá)到了高產(chǎn)的目的。其技術(shù)方案的前提是，該類型的菌種由于自身的生長(zhǎng)特性，不因?yàn)榄h(huán)境的改變而能很好的形成菌球。在不同的發(fā)酵體系中，進(jìn)行有機(jī)酸及某些酶制劑等產(chǎn)品的發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)，球狀是最佳的生產(chǎn)形態(tài)，添加微粒子的技術(shù)路線并不能有效地將絲狀真菌控制為菌球形態(tài)。

綜上所述，現(xiàn)有技術(shù)工藝條件苛刻，操作方法繁復(fù)，不能解決有效控制絲狀真菌發(fā)酵形態(tài)的問(wèn)題。因此，設(shè)計(jì)高效便捷的技術(shù)方案以控制絲狀真菌發(fā)酵生長(zhǎng)形態(tài)，成為必然需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種控制菌絲體生長(zhǎng)狀態(tài)的方法，所述方法能夠高效便捷地控制絲狀真菌發(fā)酵過(guò)程中的生長(zhǎng)形態(tài)，且該方法操作簡(jiǎn)單，普適性強(qiáng)，適宜在工業(yè)生產(chǎn)中放大。

為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供了一種控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)的方法，所述方法包括：在絲狀真菌發(fā)酵過(guò)程的菌絲體生長(zhǎng)階段，向發(fā)酵液中添加法尼醇，并繼續(xù)發(fā)酵以獲得球狀的絲狀真菌菌絲體；

其中，所述法尼醇添加的終濃度為150-1000μM。

所述法尼醇添加的終濃度為150μM、160μM、170μM、180μM、190μM、200μM、210μM、220μM、230μM、240μM、250μM、260μM、270μM、280μM、290μM、300μM、310μM、320μM、330μM、340μM、350μM、360μM、370μM、380μM、390μM、400μM、430μM、450μM、480μM、500μM、530μM、550μM、580μM、600μM、630μM、650μM、680μM、700μM、730μM、750μM、780μM、800μM、830μM、850μM、880μM、900μM、930μM、950μM、980μM或1000μM、。

本發(fā)明中，法尼醇作為真菌群體感應(yīng)系統(tǒng)中研究最廣泛的群體感應(yīng)分子，它能有效改變白色念珠菌的菌體形態(tài)，抑制其從酵母形態(tài)向菌絲形態(tài)的轉(zhuǎn)變，因此，將適當(dāng)濃度的法尼醇作為外源添加物補(bǔ)充到發(fā)酵培養(yǎng)基中可以有效控制絲狀真菌菌體形態(tài)。

本發(fā)明中，將特定濃度的法尼醇溶液加入到絲狀真菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，將絲狀真菌菌絲體形態(tài)控制為球狀。

優(yōu)選地，所述法尼醇添加的終濃度180-800μM，優(yōu)選為200-600μM。

優(yōu)選地，以法尼醇溶液的形式向發(fā)酵液中添加法尼醇，所述法尼醇溶液的配制溶劑為乙醇、正丙醇、異丙醇和正丁醇中的一種或至少兩種的混合，優(yōu)選為乙醇或異丙醇。

優(yōu)選地，所述絲狀真菌為曲霉屬、根霉屬、木霉屬或栓菌屬中的任意一種或至少兩種的組合，優(yōu)選為曲霉屬、根霉屬或木霉屬中的任意一種或至少兩種的組合。

優(yōu)選地，所述控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)的方法，具體包括如下步驟：

(1)將預(yù)培養(yǎng)的種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；

(2)在所述發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程的菌絲體生長(zhǎng)階段，向發(fā)酵液中添加法尼醇溶液；

(3)在菌絲體生長(zhǎng)結(jié)束后收集菌體，觀察菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中發(fā)酵培養(yǎng)基包括如下組分：碳源1-50g/L，氮源1-20g/L，KH₂PO₄ 0.5-5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1-2g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.01-0.1g/L，CaCl₂·2H₂O 0.01-0.1g/L。

優(yōu)選地，所述碳源為甘油、葡萄糖或蔗糖中的任意一種或至少兩種的混合。

優(yōu)選地，所述氮源為大豆蛋白胨、尿素或(NH₄)₂SO₄中的任意一種或至少兩種的混合。

優(yōu)選地，所述種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基，所述種子培養(yǎng)液按體積比的接種量為3-15％，例如可以是3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％或15％，優(yōu)選為4-12％，進(jìn)一步優(yōu)選為6-10％。

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)的pH為4.0-6.0，例如可以是4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0，優(yōu)選為4.5-5.5。

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為20-40℃，例如可以是20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃或40℃，優(yōu)選為23-36℃，進(jìn)一步優(yōu)選為26-32℃。

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)的攪拌速率為50-200rpm，例如可以是50rpm、60rpm、70rpm、80rpm、90rpm、100rpm、110rpm、120rpm、130rpm、140rpm、150rpm、160rpm、170rpm、180rpm、190rpm或200rpm，優(yōu)選為100-180rpm。

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為48-168h，例如可以是48h、50h、52h、54h、55h、58h、60h、62h、65h、68h、70h、72h、75h、78h、80h、82h、85h、88h、90h、92h、95h、98h、100h、102h、105h、108h、110h、112h、115h、118h、120h、122h、125h、128h、130h、135h、138h、140h、142h、145h、148h、150h、155h、158h、160h、162h、165h或168h。

優(yōu)選地，所述步驟(2)向發(fā)酵液中添加法尼醇溶液，所述法尼醇為一次性或分多次添加，優(yōu)選一次性添加。

所述法尼醇溶液采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。

優(yōu)選地，所述法尼醇溶液的濃度為所述添加的終濃度的200-2000倍，例如可以是如200倍、400倍、600倍、800倍、1000倍、1200倍、1400倍、1600倍、1800倍、2000倍，優(yōu)選為500-1500倍，進(jìn)一步優(yōu)選為800-1200倍。

優(yōu)選地，所述法尼醇溶液的添加時(shí)間為所述步驟(1)中發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程的第0-48h，例如可以是0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h、16h、18h、20h、22h、24h、26h、28h、30h、32h、34h、36h、38h、40h、42h、44h、46h、48h，優(yōu)選為第4-36h，更優(yōu)選為第12-24h。

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中菌絲體生長(zhǎng)的時(shí)間為0-48h，例如可以是0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h、16h、18h、20h、22h、24h、26h、28h、30h、32h、34h、36h、38h、40h、42h、44h、46h、48h，優(yōu)選為12-40h，進(jìn)一步優(yōu)選為20-36h。

作為優(yōu)選技術(shù)方案，所述控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)的方法，具體包括如下步驟：

(1’)在溫度20-40℃、pH4.0-6.0、攪拌速率50-200rpm的條件下，將預(yù)培養(yǎng)的絲狀真菌種子液以體積比3-15％接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；

(2’)在所述發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程的第0-48h，一次性向發(fā)酵液中添加法尼醇溶液至法尼醇的終濃度為110-400μM；

(3’)在菌絲體生長(zhǎng)結(jié)束后收集菌體，觀察菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)本發(fā)明提供的控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)的方法，能夠高效便捷地控制絲狀真菌發(fā)酵過(guò)程中的生長(zhǎng)形態(tài)，提高絲狀真菌的發(fā)酵產(chǎn)率，洛伐他汀含量提高了1.6倍，胞外多糖含量提高了2.1倍；

(2)本發(fā)明的方法操作簡(jiǎn)單，易于放大生產(chǎn)，適于大規(guī)模發(fā)酵，從而有效控制絲狀真菌菌體的形態(tài)，滿足規(guī)?；瘧?yīng)用的要求。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1培養(yǎng)的黑根霉的形態(tài)圖；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例2培養(yǎng)的黑曲霉的形態(tài)圖。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)具體實(shí)施方式來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，所述實(shí)施例僅僅是幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的具體限制。

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。

菌種：本實(shí)施例的菌種均是工業(yè)生產(chǎn)中常用的具有典型代表的絲狀真菌：

黑根霉(Rhizopus nigricans 41346)孢子懸浮液；

黑曲霉(Aspergillus niger 2106)孢子懸浮液；

紅曲霉(Monascus purpureus 5013)孢子懸浮液；

變色栓菌(Trametes versicolor 14001)。

實(shí)施例1

本實(shí)施例說(shuō)明利用法尼醇控制菌絲體形態(tài)的方法：

(1)培養(yǎng)基的配制：基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括，葡萄糖20g/L，(NH₄)₂SO₄ 5g/L，KH₂PO₄ 4g/L，MgSO₄·7H2O 2g/L,FeSO₄·7H2O 0.1g/L,CaCl₂·2H₂O 0.5g/L，葡萄糖分開(kāi)滅菌，115℃滅菌30min；

(2)種子培養(yǎng)：往步驟(1)所述培養(yǎng)基中加入黑根霉孢子懸浮液1mL，28℃、160rpm培養(yǎng)20小時(shí)，將培養(yǎng)物均質(zhì)后即為種子液；

(3)將法尼醇按200mM的濃度溶解于乙醇中，0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，制得法尼醇溶液；

(4)在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的第0h，加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到200μM，不加入法尼醇的培養(yǎng)基作為對(duì)照；

(5)發(fā)酵培養(yǎng)：將種子液按6％(v/v)接種量接入步驟(1)所述新鮮培養(yǎng)基，28℃、160rpm培養(yǎng)48小時(shí)，收集菌體。

結(jié)果如圖1所示，顯示加入法尼醇的培養(yǎng)基中菌絲體為表面光滑的球狀。

實(shí)施例2

本實(shí)施例說(shuō)明一種利用法尼醇控制菌絲體形態(tài)的方法：

(1)培養(yǎng)基的配制：基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括，蔗糖50g/L，尿素10g/L，KH₂PO₄1g/L，MgSO₄·7H₂O 1g/L，CaCl₂·2H₂O 0.05g/L，葡萄糖分開(kāi)滅菌，115℃滅菌30min；

(2)種子培養(yǎng)：往步驟(1)所述培養(yǎng)基中加入黑曲霉孢子懸浮液1mL，30℃、150rpm培養(yǎng)36小時(shí)，將培養(yǎng)物均質(zhì)后即為種子液；

(3)將法尼醇按200mM的濃度溶解于乙醇中，0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，制得法尼醇溶液；

(4)在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的第0h，加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到150μM，不加入法尼醇的培養(yǎng)基作為對(duì)照，用HCl調(diào)控pH為6.0；

(5)發(fā)酵培養(yǎng)：將種子液按6％(v/v)接種量接入步驟(1)所述新鮮培養(yǎng)基，30℃、200rpm培養(yǎng)72小時(shí)，收集菌體。

結(jié)果如圖2所示，顯示加入法尼醇的培養(yǎng)基中菌絲體為表面多毛的球狀。

實(shí)施例3

本實(shí)施例說(shuō)明一種利用法尼醇控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)方法進(jìn)行洛伐他汀發(fā)酵生產(chǎn)：

(1)培養(yǎng)基的配制：基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括，甘油5％，葡萄糖10g/L，大豆蛋白胨2g/L，(NH₄)₂SO₄ 2g/L，KH₂PO₄ 1.5g/L，MgSO₄·7H₂O 1g/L,FeSO₄·7H₂O0.05g/L，CaCl₂·2H₂O 0.05g/L，葡萄糖分開(kāi)滅菌，115℃滅菌30min；

(2)種子培養(yǎng)：往步驟(1)所述培養(yǎng)基中加入紅曲霉孢子懸浮液1mL，30℃、200rpm培養(yǎng)48小時(shí)，將培養(yǎng)物均質(zhì)后即為種子液；

(3)將法尼醇按200mM的濃度溶解于乙醇中，0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，制得法尼醇溶液；

(4)在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的第48h，加入步驟(3)中的法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到500μM，不加入法尼醇的培養(yǎng)基作為對(duì)照；

(4)發(fā)酵培養(yǎng)：將種子液按10％(v/v)接種量接入步驟(1)所述新鮮培養(yǎng)基，30℃、200rpm培養(yǎng)21天，獲得表面光滑的球狀菌體，該細(xì)胞菌體可以用作發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他??；

(5)洛伐他汀的提取和檢測(cè)：取1體積的勻漿發(fā)酵液與4體積的無(wú)水甲醇，30℃、200rpm搖床振蕩提取3h，12000rpm離心10min，上清液經(jīng)0.22um濾膜過(guò)濾，HPLC上樣檢測(cè)。

HPLC檢測(cè)條件：色譜柱250mm×4.6mm C18柱；紫外檢測(cè)器：檢測(cè)波長(zhǎng)237nm；流動(dòng)相為70％乙腈(色譜純磷酸調(diào)pH至2.6-2.8)；流速0.6ml/min；進(jìn)樣量10uL；

結(jié)果顯示：發(fā)酵液中的洛伐他汀含量為0.64g/L，對(duì)照組中洛伐他汀含量為0.4g/L。

實(shí)施例4

本實(shí)施例說(shuō)明一種利用法尼醇控制菌絲體生長(zhǎng)形態(tài)方法進(jìn)行胞外多糖發(fā)酵生產(chǎn)：

(1)預(yù)培養(yǎng)：采用常用土豆培養(yǎng)基配制方法配制預(yù)培養(yǎng)用的培養(yǎng)基，其中土豆200g/L、葡萄糖20g/L；將變色栓菌菌絲體接種于該培養(yǎng)基中，于26℃、150r/min條件下培養(yǎng)7天；將培養(yǎng)物均質(zhì)后按10％(v/v)接種量接入新鮮培養(yǎng)基，26℃、150r/min條件下培養(yǎng)5天，即得預(yù)培養(yǎng)的種子液。

(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配制：葡萄糖40g/L，大豆蛋白胨10g/L，KH₂PO₄ 2g/L，MgSO₄·7H₂O 2g/L，葡萄糖分開(kāi)滅菌，115℃滅菌30min；

(3)將法尼醇按200mM的濃度溶解于乙醇中，0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，制得法尼醇溶液；

(4)在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的第0h，加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到1mM，不加入法尼醇的培養(yǎng)基作為對(duì)照；

(5)發(fā)酵培養(yǎng)：將種子液按10％(v/v)接種量接入步驟(2)所述新鮮培養(yǎng)基，26℃、50rpm培養(yǎng)168小時(shí)，獲得表面毛茸茸的膨大的球狀菌體，該細(xì)胞菌體可以用作發(fā)酵生產(chǎn)胞外多糖；

(6)胞外多糖的提取和檢測(cè)：取1體積的發(fā)酵液與4體積的95％乙醇，振蕩搖勻，4℃靜止過(guò)夜，12000rpm離心10min，沉淀物經(jīng)95％乙醇、70％乙醇各洗滌兩次，即得粗胞外多糖。

檢測(cè)：苯酚-硫酸法檢測(cè)總糖含量，DNS法檢測(cè)摻雜的還原糖含量，胞外多糖含量＝總糖含量-還原糖含量；

結(jié)果顯示：發(fā)酵液中的胞外多糖含量為2.5g/L，對(duì)照組中胞外多糖含量為0.81g/L，相比提高了2.1倍。

對(duì)比例1

該對(duì)比例于實(shí)施例1的不同之處僅在于，所述加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到120μM，除此之外，其余試劑和試劑用量以及培養(yǎng)方法均與實(shí)施例1相同。

結(jié)果顯示培養(yǎng)基中菌絲體為絮狀。

對(duì)比例2

該對(duì)比例于實(shí)施例2的不同之處僅在于，所述加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到100μM，除此之外，其余試劑和試劑用量以及培養(yǎng)方法均與實(shí)施例2相同。

結(jié)果顯示培養(yǎng)基中菌絲體為團(tuán)簇狀。

對(duì)比例3

該對(duì)比例于實(shí)施例3的不同之處僅在于，所述加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到60μM，除此之外，其余試劑和試劑用量以及培養(yǎng)方法均與實(shí)施例3相同。

結(jié)果顯示：發(fā)酵液中的洛伐他汀含量為0.5g/L。

對(duì)比例4

該對(duì)比例于實(shí)施例4的不同之處僅在于，所述加入法尼醇溶液至發(fā)酵液中的濃度達(dá)到60μM，除此之外，其余試劑和試劑用量以及培養(yǎng)方法均與實(shí)施例4相同。

結(jié)果顯示：發(fā)酵液中的胞外多糖的含量為1.2g/L。

申請(qǐng)人聲明，本發(fā)明通過(guò)上述實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的工藝方法，但本發(fā)明并不局限于上述工藝步驟，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述工藝步驟才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)，對(duì)本發(fā)明所選用原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開(kāi)范圍之內(nèi)。