本技術(shù)享有作為在先日本技術(shù)的日本特愿2022-162824(申請(qǐng)日：2022年10月7日)的優(yōu)先權(quán)利益，其全部公開內(nèi)容通過(guò)引用而成為本說(shuō)明書的一部分。本發(fā)明涉及核酸構(gòu)建物以及其設(shè)計(jì)方法及制造方法。

背景技術(shù)：

1、許多抗體藥物在慢性疾病、疑難病的治療中顯示出優(yōu)異的治療效果，但其靶分子多為自身蛋白質(zhì)(例如，自身免疫疾病中作為病因物質(zhì)的炎癥性細(xì)胞因子等)。另一方面，疫苗誘導(dǎo)針對(duì)病毒等外源性抗原的有效抗體，適應(yīng)癥主要為感染癥。然而，現(xiàn)有的疫苗技術(shù)存在下述這樣的問(wèn)題：由于免疫耐受，無(wú)法誘導(dǎo)針對(duì)自身蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生，無(wú)法應(yīng)用于慢性疾病、疑難病的治療(非專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)2、非專利文獻(xiàn)3及非專利文獻(xiàn)4)。

2、現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

3、非專利文獻(xiàn)

4、非專利文獻(xiàn)1：c?a?janeway?jr.,immunol?today；13(1):11-6(1992).

5、非專利文獻(xiàn)2：adag.,n?engl?j?med；345(14):1042-53(2001).

6、非專利文獻(xiàn)3：adagl.,lancet；335(8688):523-6(1990).

7、非專利文獻(xiàn)4：anderson?rm等人,lancet；350(9089):1466-70(1997).

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、發(fā)明所要解決的課題

2、本發(fā)明的目的在于提供誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生的新型核酸構(gòu)建物以及其設(shè)計(jì)方法及制造方法。

3、用于解決課題的手段

4、本技術(shù)的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，利用包含編碼2種以上的t細(xì)胞表位的多核苷酸和編碼1種或2種以上的前述靶蛋白質(zhì)的b細(xì)胞表位的多核苷酸的核酸構(gòu)建物，能夠誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生。本技術(shù)的發(fā)明人還通過(guò)將該核酸構(gòu)建物向動(dòng)物施予的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其作為疫苗是有效的。本發(fā)明是基于上述見解而得的發(fā)明。

5、根據(jù)本發(fā)明，提供以下的方案。

6、[1]核酸構(gòu)建物，其為誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物，所述核酸構(gòu)建物包含：編碼2種以上的t細(xì)胞表位的多核苷酸；和編碼1種或2種以上的前述靶蛋白質(zhì)的b細(xì)胞表位的多核苷酸。

7、[2]如上述[1]所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述2種以上的t細(xì)胞表位包含選自由序列號(hào)1～82表示的氨基酸序列組成的組中的氨基酸序列或與該氨基酸序列實(shí)質(zhì)上相同的氨基酸序列。

8、[3]如上述[1]或[2]所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述靶蛋白質(zhì)是在自身體內(nèi)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。

9、[4]如上述[1]～[3]中任一項(xiàng)所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述靶蛋白質(zhì)為il-17a及/或il-23。

10、[5]如上述[1]～[4]中任一項(xiàng)所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述靶蛋白質(zhì)是作為疾病原因的蛋白質(zhì)或因疾病產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，前述疾病為自身免疫疾病或變態(tài)反應(yīng)疾病(allergydisease)。

11、[6]如上述[5]所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述自身免疫疾病為選自由銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、巴塞杜氏病(basedow?disease)、慢性甲狀腺炎、1型糖尿病、血管炎、阿狄森病(addison’s?disease)、多發(fā)性肌炎、干燥綜合征、系統(tǒng)性硬化癥及腎小球腎炎組成的組中的1種或2種以上的自身免疫疾病。

12、[7]如上述[5]所述的核酸構(gòu)建物，其中，前述變態(tài)反應(yīng)疾病為選自由特應(yīng)性皮炎、支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻炎、花粉癥、食物過(guò)敏及過(guò)敏性結(jié)膜炎組成的組中的1種或2種以上的變態(tài)反應(yīng)疾病。

13、[8]如上述[1]～[7]中任一項(xiàng)所述的核酸構(gòu)建物，其為dna或rna。

14、[9]疾病的預(yù)防劑或治療劑，其包含上述[1]～[8]中任一項(xiàng)所述的核酸構(gòu)建物作為有效成分。

15、[10]如上述[9]所述的預(yù)防劑或治療劑，其中，前述疾病為自身免疫疾病或變態(tài)反應(yīng)疾病。

16、[11]如上述[9]或[10]所述的預(yù)防劑，其為泛hla型疫苗(pan-hla?typevaccine)。

17、[12]疾病的預(yù)防劑或治療劑的制造方法，其包括使用誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物作為有效成分的工序，前述核酸構(gòu)建物包含：編碼2種以上的t細(xì)胞表位的多核苷酸；和編碼1種或2種以上的前述靶蛋白質(zhì)的b細(xì)胞表位的多核苷酸。

18、[13]如上述[12]所述的制造方法，其中，前述疾病為自身免疫疾病或變態(tài)反應(yīng)疾病。

19、[14]設(shè)計(jì)方法，其為誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的設(shè)計(jì)方法，包括將2種以上的t細(xì)胞表位與1種或2種以上的前述靶蛋白質(zhì)的b細(xì)胞表位組合的工序。

20、[15]疾病的預(yù)防劑或治療劑的制造方法，其包括下述的工序：

21、(p)實(shí)施權(quán)利要求14所述的設(shè)計(jì)方法來(lái)設(shè)計(jì)誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的工序；及

22、(q)制備由工序(p)設(shè)計(jì)的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的工序。

23、[101]設(shè)計(jì)方法，其為誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的設(shè)計(jì)方法，包括將2種以上的t細(xì)胞表位與1種或2種以上的前述靶蛋白質(zhì)的b細(xì)胞表位組合的工序。

24、[102]如上述[101]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，t細(xì)胞表位與mhc?ii類分子的結(jié)合能力高。

25、[103]如上述[101]或[102]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，靶蛋白質(zhì)是作為疾病原因的蛋白質(zhì)或因疾病產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。

26、[104]如上述[101]～[103]中任一項(xiàng)所述的設(shè)計(jì)方法，其中，靶蛋白質(zhì)是在自身體內(nèi)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。

27、[105]如上述[103]或[104]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，疾病為選自由自身免疫疾病、變態(tài)反應(yīng)疾病、癌、神經(jīng)退行性疾病、感染癥及自身炎癥性疾病組成的組中的1種或2種以上的疾病。

28、[106]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，自身免疫疾病為選自由銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、巴塞杜氏病、慢性甲狀腺炎、1型糖尿病、血管炎、阿狄森病、多發(fā)性肌炎、干燥綜合征、系統(tǒng)性硬化癥及腎小球腎炎組成的組中的1種或2種以上的自身免疫疾病。

29、[107]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，變態(tài)反應(yīng)疾病為選自由特應(yīng)性皮炎、支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻炎、花粉癥、食物過(guò)敏及過(guò)敏性結(jié)膜炎組成的組中的1種或2種以上的變態(tài)反應(yīng)疾病。

30、[108]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，癌為選自由皮膚癌、大腸癌、乳腺癌、胃癌、白血病、惡性淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤組成的組中的1種或2種以上的癌。

31、[109]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，神經(jīng)退行性疾病為阿爾茨海默病。

32、[110]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，感染癥為選自由寨卡熱、sars-cov-2感染癥及流感感染癥組成的組中的1種或2種以上的感染癥。

33、[111]如上述[105]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，自身炎癥性疾病為選自由家族性地中海熱、冷吡啉相關(guān)周期性綜合征(cryopyrin-associated?periodic?syndromes)、tnf受體相關(guān)周期性綜合征、甲羥戊酸激酶缺乏癥、blau綜合征、周期性發(fā)熱-阿弗他口炎(aphthousulcer)-咽炎及頸部淋巴結(jié)炎綜合征組成的組中的1種或2種以上的自身炎癥性疾病。

34、[112]如上述[103]所述的設(shè)計(jì)方法，其中，疾病為選自由多發(fā)性硬化癥、視神經(jīng)脊髓炎、重癥肌無(wú)力癥、天皰瘡及自身免疫性溶血性貧血組成的組中的1種或2種以上的疾病。

35、[113]如上述[101]～[112]中任一項(xiàng)所述的設(shè)計(jì)方法，其中，靶蛋白質(zhì)為選自由il-17a、il-23、il-1β、il-13、il-13r、il-4rα、tnf-α、il-6、il-6r、ige、il-5、il-5rα、fcrn、pd-1、pd-l1、ctla-4、her2、egfr、cd22、cd20、rankl、c5、ifnγ、β-淀粉樣蛋白、rs病毒抗原蛋白質(zhì)、寨卡病毒抗原蛋白質(zhì)、sars-cov-2病毒抗原蛋白質(zhì)及流感病毒抗原蛋白質(zhì)組成的組中的1種或2種以上的蛋白質(zhì)。

36、[114]如上述[101]～[112]中任一項(xiàng)所述的設(shè)計(jì)方法，其中，靶蛋白質(zhì)為il-17a及/或il-23。

37、[115]如上述[101]～[114]中任一項(xiàng)所述的設(shè)計(jì)方法，其中，核酸構(gòu)建物為dna或mrna。

38、[116]疾病的預(yù)防劑或治療劑的制造方法，其包括下述的工序：

39、(p)實(shí)施上述[101]～[115]中任一項(xiàng)所述的設(shè)計(jì)方法來(lái)設(shè)計(jì)誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體產(chǎn)生的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的工序；及

40、(q)制備由工序(p)設(shè)計(jì)的核酸構(gòu)建物或蛋白復(fù)合體的工序。

41、根據(jù)本發(fā)明，能夠在對(duì)象體內(nèi)強(qiáng)效誘導(dǎo)針對(duì)靶蛋白質(zhì)的抗體，因此在不僅能夠針對(duì)細(xì)菌、病毒等外源性抗原誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生，而且針對(duì)在自身體內(nèi)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)(自身蛋白質(zhì))(例如，在患有自身免疫疾病等的對(duì)象體內(nèi)產(chǎn)生的炎癥性細(xì)胞因子等)也能夠誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生這一點(diǎn)上是有利的。