本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，尤其是指基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物及其用途。

背景技術(shù)：

1、病毒感染與多種疾病相關(guān)，對(duì)人類的生命健康和財(cái)產(chǎn)安全造成了巨大的威脅。病毒感染導(dǎo)致的疾病在人群中十分常見(jiàn)例如：?jiǎn)渭儼捳畈《?型(herpes?simplex?virus?1，hsv-1)感染可導(dǎo)致各種癥狀和體征，包括：皮膚黏膜病變，皰疹性角膜炎，復(fù)發(fā)性口腔或口周病變；冠狀病毒(sars，mers，sars-cov-2)等引起的肺炎；人乳頭狀瘤病毒(hpv)導(dǎo)致的宮頸癌；eb病毒(epstein-barr?virus，ebv)導(dǎo)致的b淋巴瘤，鼻咽癌，系統(tǒng)性紅斑狼瘡等；卡波氏肉瘤病毒(kaposi’s?sarcoma-associated?herpesvirus,kshv)導(dǎo)致的原發(fā)滲出性淋巴瘤，卡波氏肉瘤及多發(fā)性卡斯特曼病等。在治療病毒導(dǎo)致的疾病的過(guò)程中，抗病毒是最為重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。

2、固有免疫在抗病毒感染的過(guò)程中扮演著十分重要的角色，一方面其依賴于模式識(shí)別受體對(duì)病毒的入侵迅速產(chǎn)生免疫應(yīng)答，促進(jìn)干擾素的產(chǎn)生來(lái)發(fā)揮抗病毒的效果；另一方面它可以通過(guò)分泌的干擾素等細(xì)胞因子，來(lái)激活或者增強(qiáng)適應(yīng)性免疫以達(dá)到抗病毒的效果。因此深入探究固有免疫的機(jī)制，為抗病毒提供潛在的治療策略就顯得尤為重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物及其用途。

2、本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，所述短肽衍生物由穿膜肽和短肽組成，所述短肽為基于三基序家族類蛋白2多肽ub修飾相關(guān)k391位點(diǎn)的短肽；所述穿膜肽鏈接在所述短肽的n末端。

3、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述k391位點(diǎn)的短肽的氨基酸序列如seq?id?no：1所示(具體氨基酸序列為：flekkld)。所述k391位點(diǎn)的短肽與短肽衍生物trl2-k391的氨基酸序列對(duì)應(yīng)。

4、進(jìn)一步地，所述k391位點(diǎn)的短肽的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

5、

6、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述穿膜肽的氨基酸序列如seq?id?no：2所示(具體氨基酸序列為：ygrkkrrqrrrm)。

7、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物的氨基酸序列如seq?id?no：3(具體序列為ygrkkrrqrrrmflekkld)，命名為trl2-k391。

8、在本發(fā)明中，所述k391位點(diǎn)的短肽通過(guò)固相合成法制備得到(本領(lǐng)域常規(guī)的固相合成法所得)。

9、在本發(fā)明中，通過(guò)triml2的基因序列和特異性u(píng)b修飾位點(diǎn)，確定肽段序列與長(zhǎng)度；通過(guò)cck8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)多肽化合物對(duì)細(xì)胞活力和毒性的影響；通過(guò)細(xì)胞和動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)確定多肽化合物對(duì)干擾素β的表達(dá)和hsv-1感染和復(fù)制的影響；利用小鼠荷瘤模型，進(jìn)一步驗(yàn)證多肽化合物對(duì)kshv病毒相關(guān)腫瘤生長(zhǎng)的作用，為dna病毒感染的疾病的治療提供新策略。

10、本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供所述的短肽衍生物的核苷酸序列。

11、本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供所述編碼核苷酸序列的重組載體。

12、本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供表達(dá)所述短肽衍生物的重組微生物細(xì)胞。

13、本發(fā)明的第五個(gè)目的在于提供一種藥物制劑，包括所述短肽衍生物、所述核苷酸序列、所述重組載體或所述重組微生物細(xì)胞。

14、本發(fā)明的第六個(gè)目的在于提供所述藥物制劑在制備抗病毒感染藥物或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

15、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述病毒為dna病毒；

16、進(jìn)一步地，dna病毒為單純皰疹病毒hsv-1；所述短肽衍生物可以抑制hsv-1等dna病毒的感染和復(fù)制。

17、所述腫瘤為卡波式肉瘤病毒kshv導(dǎo)致。

18、進(jìn)一步地，所述短肽衍生物能抑制kshv導(dǎo)致的腫瘤的生長(zhǎng)。

19、在本發(fā)明中，細(xì)胞感受胞質(zhì)dsdna(dna病毒核酸等)刺激可誘導(dǎo)triml2的表達(dá)和修飾水平上調(diào)，進(jìn)而通過(guò)抑制dsdna感受器ddx41的isg15修飾來(lái)促進(jìn)i型干擾素的產(chǎn)生。而ddx41是一種dna感受器，識(shí)別結(jié)合dsdna和sting發(fā)生互作是其發(fā)揮抗病毒固有免疫的關(guān)鍵過(guò)程。triml2通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制下調(diào)ddx41的isg15修飾，進(jìn)而促進(jìn)其抗病毒的功能。通過(guò)系列實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)了triml2發(fā)生ub修飾的位點(diǎn)，并篩選出k391位點(diǎn)相關(guān)多肽，該肽段可競(jìng)爭(zhēng)性抑制triml2的ub修飾和ddx41的isg15修飾，從而增強(qiáng)i型干擾素β的表達(dá)，進(jìn)而發(fā)揮抗hsv-1等dna病毒以及抗dna病毒導(dǎo)致的腫瘤的作用。

20、本發(fā)明的上述技術(shù)方案相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：

21、本發(fā)明提供了一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，即trl2-k391。這種短肽衍生物不影響細(xì)胞活力，且無(wú)細(xì)胞毒性，并且本發(fā)明以hsv-1和kshv為研究模型，從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)反復(fù)確證這種短肽衍生物對(duì)i型干擾素β的促進(jìn)，進(jìn)而對(duì)hsv-1等dna病毒感染和kshv感染導(dǎo)致的腫瘤的細(xì)胞增殖具有一定抑制作用，為dna病毒感染及病毒感染導(dǎo)致的疾病的治療奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，其特征在于，所述短肽衍生物由穿膜肽和短肽組成，所述短肽為基于三基序家族類蛋白2多肽ub修飾相關(guān)k391位點(diǎn)的短肽；所述穿膜肽鏈接在所述短肽的n末端。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，其特征在于，所述k391位點(diǎn)的短肽的氨基酸序列如seq?id?no：1所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，其特征在于，所述穿膜肽的氨基酸序列如seq?id?no：2所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物，其特征在于，所述基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物的氨基酸序列如seq?id?no：3。

5.編碼權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述的短肽衍生物的核苷酸序列。

6.攜帶權(quán)利要求5所述編碼核苷酸序列的重組載體。

7.表達(dá)權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述短肽衍生物的重組微生物細(xì)胞。

8.一種藥物制劑，其特征在于，包括權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述短肽衍生物、權(quán)利要求5中所述核苷酸序列、權(quán)利要求6所述重組載體、權(quán)利要求7中所述重組微生物細(xì)胞。

9.權(quán)利要求8中所述藥物制劑在制備抗病毒感染藥物或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9中所述的應(yīng)用，其特征在于，所述病毒為dna病毒。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明中公開(kāi)了一種基于三基序家族類蛋白2的短肽衍生物及其用途。本發(fā)明中的短肽衍生物為T(mén)RL2?K391，其氨基酸序列為YGRKKRRQRRRMFLEKKLD。所述短肽衍生物由穿膜肽和短肽組成，所述短肽為基于三基序家族類蛋白2多肽Ub修飾相關(guān)K391位點(diǎn)的短肽，其氨基酸序列為FLEKKLD；所述穿膜肽連接在短肽的N末端，所述穿膜肽的氨基酸序列為YGRKKRRQRRRM。本發(fā)明中短肽衍生物不影響細(xì)胞活力，且無(wú)細(xì)胞毒性，在體內(nèi)穩(wěn)定的多肽化合物，具有增強(qiáng)抗病毒天然免疫，促進(jìn)I型干擾素β的分泌，進(jìn)而抑制HSV?1等DNA病毒的感染和復(fù)制，以及對(duì)KSHV等相關(guān)腫瘤的生長(zhǎng)增殖具有顯著的抑制效率?？捎糜诳笵NA病毒感染導(dǎo)致的疾病治療的相關(guān)藥物的制備，對(duì)預(yù)防和治療DNA病毒感染相關(guān)疾病具有重要應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)研發(fā)人員：蔡啟良,董中偉,張玉林,黃慶燁,魏芳,朱彩霞,王玉燕
受保護(hù)的技術(shù)使用者：復(fù)旦大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15