本發(fā)明涉及微生物應(yīng)用領(lǐng)域，具體地說，涉及一株產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182、w182溶胞物以及二者的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、隨著人們生活水平的提高，人們越來越注重自身的健康狀況以及精神面貌。

2、首先，黑色素廣泛存在于人的皮膚、粘膜、視網(wǎng)膜、軟腦膜及膽囊與卵巢等處，也是皮膚中的主要色素，有助于保護(hù)皮膚免受紫外線輻射以及氧化應(yīng)激造成的損害，但過量的黑色素生成可引起皮膚色素沉著障礙、日光性雀斑和炎癥后色素沉著過度，甚至過度分化、增殖的黑色素細(xì)胞還會引起惡性的黑色素瘤，危害人體健康?，F(xiàn)有的常見的可改變黑色素生成途徑的、以及抑制黑色素細(xì)胞形成的物質(zhì)包括熊果葉苷、維生素c、β-胡蘿卜素、綠茶、曲酸等。

3、其次，自由基與多種疾病之間存在一定關(guān)系，機(jī)體產(chǎn)生大量自由基如果未能被及時(shí)清除，會損傷蛋白質(zhì)、dna和脂質(zhì)等生物分子，引起過氧化反應(yīng)，損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)、干擾人體的正常代謝活動，從而引發(fā)相應(yīng)疾病并加速衰老進(jìn)程?？寡趸瘎┠軌虿东@并中和自由基，從而祛除自由基對人體的損害，具有廣泛用途。但現(xiàn)有技術(shù)中，抗氧化劑的主要功能性成分大多選自維生素類、β-胡蘿卜素、輔酶q10、葡萄籽、藍(lán)莓、花青素、番茄紅素、白藜蘆醇、茶多酚等物質(zhì)。

4、最后，衰老是指器官功能、機(jī)體組織隨著年齡的增長而逐漸發(fā)生的不良變化，是機(jī)體各種生化反應(yīng)的綜合表現(xiàn)，是遺傳、精神緊張、環(huán)境污染等體內(nèi)外諸多因素共同影響的結(jié)果。皮膚是人體最大和最明顯的器官，在人體衰老的過程中，皮膚的衰老最為明顯，隨著年齡的增長，身體機(jī)能下降，皮膚的會發(fā)生自然衰老變化，表現(xiàn)為干燥皮膚的細(xì)小皺紋。市面上常見的抗衰護(hù)膚品，其主要成分為維a類、多肽類以及植物提取類。其中維a類成分添加到抗衰老產(chǎn)品中若添加量控制不佳，易對皮膚產(chǎn)生刺激，引起過敏；多肽類成分滲透性不明顯，易對實(shí)際使用效果存疑；植物提取類安全性高，穩(wěn)定但其價(jià)格昂貴。

5、產(chǎn)馬乳酒乳桿菌產(chǎn)馬乳菌亞種作為我國新食品原料的新增菌種，具有多種益生功能，被廣泛應(yīng)用于乳制品、發(fā)酵果蔬制品等行業(yè)。然而目前對于產(chǎn)馬乳酒乳桿菌產(chǎn)馬乳菌亞種及其代謝產(chǎn)物在抗氧化、抑制黑色素合成及分泌方面以及抗衰老方面的應(yīng)用尚未見報(bào)道，市場上也未見到將產(chǎn)馬乳酒乳桿菌產(chǎn)馬乳菌亞種用于上述領(lǐng)域的研究成果，市場為空白，因此本技術(shù)旨在提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌產(chǎn)馬乳菌亞種溶胞物以解決上述技術(shù)問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)的局限性，本技術(shù)提供一株產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182、w182溶胞物及制備方法、以及二者的相關(guān)應(yīng)用。

2、本發(fā)明的第一目的在于提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物，產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182為產(chǎn)馬乳酒乳桿菌產(chǎn)馬乳酒亞種，分類命名為 lactobacillus?kefiranofaciens? subsp.?kefiranofaciens，于2023年4月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmcc?no.27058，w182溶胞物包括至少1.0×108cfu/ml的滅活產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182菌體及其代謝產(chǎn)物胞外多糖、黃酮、還原型谷胱甘肽（gsh）、超氧化物歧化酶（sod）、氨基酸，胞外多糖含量大于等于1.8g/l、黃酮含量大于等于0.3g/l、還原型谷胱甘肽（gsh）活性大于100μmol/g?prot、超氧化物歧化酶（sod）活性大于27μ/mg?prot、氨基酸含量大于等于299mmol/l。

3、本發(fā)明的第二目的在于提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物的制備方法，包括：將保藏編號為cgmcc?no.27058的產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182接種于mrs培養(yǎng)基中、37℃靜置培養(yǎng)至活菌數(shù)達(dá)到108cfu/ml以上，得到w182菌液；將w182菌液經(jīng)80℃-105℃高溫滅菌5min-10min，冰浴超聲破碎，得到產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物。該w182溶胞物的制備方法不同于常見的現(xiàn)有技術(shù)，對菌體完整性未作過多要求，通過超聲破碎的方式使菌體裂解，使w182溶胞物同時(shí)包括滅活的w182菌體、分泌到細(xì)胞內(nèi)外的代謝產(chǎn)物、細(xì)胞內(nèi)容物等等有益成分，提高了w182溶胞物的使用效果，且制備方法簡單、可控性高，便于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

4、本發(fā)明的第三目的在于提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182和/或產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物在制備美白產(chǎn)品中的應(yīng)用。

5、在一些具體實(shí)施方式中，至少滿足以下一項(xiàng)：（1）美白為抗氧化；（2）美白為抑制酪氨酸酶活性；（3）美白為抑制黑色素生成；（4）產(chǎn)品為護(hù)膚品，護(hù)膚品包括精華產(chǎn)品、身體乳產(chǎn)品、面霜產(chǎn)品、防曬霜、面膜產(chǎn)品；（5）產(chǎn)品為化妝品，化妝品包括粉餅、粉底液。

6、在一些具體實(shí)施方式中，以質(zhì)量百分比計(jì)，w182溶胞物的添加量為1%-10%。

7、本發(fā)明的第四目的在于提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182和/或產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物在制備具有抗氧化功能和/或具有抗衰老功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8、在一些具體實(shí)施方式中，抗衰老至少滿足以下一項(xiàng)：（1）抗衰老為降低丙二醛（mda）含量；（2）抗衰老為恢復(fù)總抗氧化能力（t-aoc）；（3）抗衰老為提高體內(nèi)超氧化物歧化酶（sod）、過氧化氫酶（cat）、谷胱甘肽過氧化物酶（gsh-px）活性；（4）抗衰老為補(bǔ)充皮膚含水量；抗衰老為補(bǔ)充皮膚中膠原蛋白和/或神經(jīng)酰胺；（5）抗衰老為調(diào)節(jié)皮膚菌群、改善皮膚微生態(tài)。

9、在一些具體實(shí)施方式中，產(chǎn)品至少包括以下一項(xiàng)：（1）產(chǎn)品為抗氧化劑；（2）產(chǎn)品為自由基清除劑；（3）產(chǎn)品為食品和/或飲品，食品為復(fù)合乳飲料、復(fù)合益生菌固體飲料中的一種；（4）產(chǎn)品為藥品；（5）產(chǎn)品為護(hù)膚品、化妝品、美容產(chǎn)品、醫(yī)美用品中的一種及以上，產(chǎn)品的形態(tài)為液體制劑、凝露劑、霜?jiǎng)?、面膜中的一種及以上。

10、在一些具體實(shí)施方式中，一種抗衰老護(hù)膚品，包括1%-10%抗衰活性物質(zhì)，抗衰活性物質(zhì)選自產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182和/或產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物。

11、在一些具體實(shí)施方式中，一種抗衰老護(hù)膚品，包括3%-10%抗衰活性物質(zhì)，抗衰活性物質(zhì)選自產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182和/或產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物。

12、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

13、（1）本發(fā)明提供一種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182、以及w182溶胞物，該w182溶胞物包括至少1.0×108cfu/ml的滅活產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182菌體及其代謝產(chǎn)物胞外多糖、黃酮、氨基酸等，該w182溶胞物在一定濃度條件下不僅具有很好的酪氨酸酶抑制能力、抑制黑色素生成的能力，能有效抑制斑馬魚中和色素的形成、抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞黑色素生成，而且具有一定的超氧化物歧化酶活性，對于dpph自由基具有很好的清除能力，具有保護(hù)細(xì)菌免受氧化應(yīng)激的功能，具有強(qiáng)抗氧化功能抗衰老功能，還能夠提高皮膚中膠原蛋白、神經(jīng)酰胺含量、維持皮膚組織結(jié)構(gòu)完整性，具有補(bǔ)水、抗衰老、調(diào)節(jié)皮膚菌群、改善皮膚微生態(tài)等作用。該w182溶胞物的制備方法操作簡單且成本低廉，易于產(chǎn)業(yè)化實(shí)施，有利于大規(guī)模推廣應(yīng)用。

14、（2）本發(fā)明提供多種產(chǎn)馬乳酒乳桿菌w182溶胞物的應(yīng)用，首先包括在制備美白產(chǎn)品中的應(yīng)用，主要利用w182溶胞物對酪氨酸酶的活性抑制能力、抑制黑色素合成的能力，能夠有效的抑制黑色素的形成，可用于防止皮膚常見的雀斑、黃褐癍、日曬斑等常見皮膚色素沉積問題，且w182溶胞物為純天然物質(zhì)，應(yīng)用于美白產(chǎn)品中綠色安全，在不同存儲環(huán)境中均能維持較好的穩(wěn)定性和抑制酪氨酸酶活性的效果，且優(yōu)于目前市場上化妝品中常用美白原料煙酰胺和vc乙基醚的酪氨酸酶抑制活性；其次，還包括在制備抗氧化劑中的應(yīng)用、在制備自由基清除劑中的應(yīng)用，合理利用到w182溶胞物對dpph自由基的清除能力、抗氧化能力，為抗氧化劑和自由基清除劑的開發(fā)提供新思路；最后，包括在制備食品和/或藥品中的應(yīng)用，可通過內(nèi)服的方式起到抑制黑色素生長、防治黑色素瘤等作用。

15、（3）本發(fā)明還提供一種w182溶胞物在抗衰老方面的應(yīng)用，將該w182溶胞物與其他添加物配伍調(diào)和，制作形成水劑、乳液、膏霜等不同劑型護(hù)膚品，具有很好的抗氧化作用、抗衰老作用和調(diào)節(jié)皮膚菌群、改善以及平衡皮膚微生態(tài)的效果，具體可提高皮膚角質(zhì)層含水量、降低水分散失量、升高皮膚彈性和緊致度，有明顯的保濕、緊致、舒緩的功效，且安全性好、穩(wěn)定性高，與多種功效原料通過科學(xué)的調(diào)配后得到的產(chǎn)品具有優(yōu)異的協(xié)同抗氧化、抗衰老效果，且能維持較長時(shí)間的穩(wěn)定性，預(yù)期在化妝品領(lǐng)域?qū)⒕哂袕V泛的用途。

16、（4）本發(fā)明的抗衰老面霜連續(xù)使用28天能夠提高志愿者角質(zhì)層含水量和皮膚彈性，且由于w182溶胞物具有改善菌群環(huán)境的功能，將該w182溶胞物應(yīng)用于制備抗衰老面霜后，志愿者皮膚表面的有益菌如惰性乳桿菌、表皮葡萄球菌含量均有所增加，而有害菌如嗜麥芽窄食單胞菌和痤瘡丙酸桿菌含量顯著降低，說明該抗衰老護(hù)膚品具有調(diào)節(jié)皮膚菌群、改善皮膚微生態(tài)、建立微生態(tài)平衡、促進(jìn)皮膚對活性營養(yǎng)成分的有效吸收、保濕、抗衰老等效果，且制備工藝簡單。