一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種分析檢測方法，具體地說是一種以四氮雜十四環(huán)二烯鎳配合物[nil](clo4)2催化的非線性振蕩體系對對香豆酸的檢測方法。

二、

背景技術(shù)：

對香豆酸，又稱對羥基肉桂酸，其結(jié)構(gòu)如式（?。┧荆瑥V泛存在于自然植物中，尤其是以豆科植物含量居多。對羥基肉桂酸廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥食品日用品飼料化工等領(lǐng)域。在醫(yī)藥方面，大量研究表明，對羥基肉桂酸有很強(qiáng)的生物活性，如抗氧化抗腫瘤抗化療升白等作用，同時(shí)還是利膽的有效成分，其利膽作用與等量去氫氧酸相近，而且具有作用緩和持久的優(yōu)點(diǎn)，還可用作生產(chǎn)冠心病治療藥物可心定的中間體，以及用于制造局部麻醉劑殺菌劑和止血藥等。在農(nóng)藥方面，它用于生產(chǎn)植物生長促進(jìn)劑長效殺菌劑和果蔬保鮮防用劑等。在化工方面的應(yīng)用，對羥基肉桂酸是很重要的香精香料，同時(shí)還是一種強(qiáng)效的導(dǎo)電材料。在將來，對羥基肉桂酸會(huì)越來越多的應(yīng)用到我們的生活中。

目前，國內(nèi)有很多種檢測對香豆酸的方法，超高效液相色譜法，反相高效液相色譜法，高效液相色譜（hplc）等儀器分析檢測對香豆酸。這些方法具有操作復(fù)雜、成本較高的缺點(diǎn)。

（?。?/p>

三、

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在為對香豆酸提供一種新的檢測方法，即以四氮雜十四環(huán)二烯鎳配合物[nil](clo4)2催化的非線性振蕩體系對對香豆酸的檢測方法，本方法是基于該配合物催化的非線性體系（即振蕩體系）對對香豆酸的敏銳響應(yīng)而開發(fā)的一種電化學(xué)振蕩體系法。具體地說，對對香豆酸而言，就是將同一種類的不同濃度對香豆酸加入到非線性化學(xué)振蕩體系中，利用同一種類的不同濃度的對香豆酸對振蕩圖譜的特征響應(yīng)（抑制時(shí)間）不同，從而實(shí)現(xiàn)對對香豆酸的定量分析。

本發(fā)明所稱四氮雜十四環(huán)二烯鎳配合物是5，7，7，12，14，14-六甲基-1，4，8，11-四氮雜大環(huán)-4，11-二烯為配體的四氮雜大環(huán)鎳配合物，其化學(xué)式為nil](clo4)2，其結(jié)構(gòu)如式（ⅱ）所示。

（ⅱ）

本配合物的結(jié)構(gòu)與生命體里肌紅蛋白，血紅蛋白，葉綠素和一些酶的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)卟啉環(huán)很相似，這種以[nil](clo4)2催化的化學(xué)振蕩反應(yīng)和植物和動(dòng)物細(xì)胞體內(nèi)的生化振蕩類似，因此，該體系具有穩(wěn)定的振幅，較長的振蕩壽命，及對對香豆酸的敏銳響應(yīng)。

[nil](clo4)2的制備分兩步：1)制備l?2hclo4；2)由l?2hclo4制備[nil](clo4)2。

1)制備l?2hclo4：

將98.5ml乙二胺裝入一只500ml三頸瓶中，在冰浴條件下，120分鐘內(nèi)攪拌下緩慢滴加126ml70%高氯酸。最初的反應(yīng)劇烈并伴有白煙產(chǎn)生，所以滴加速度控制在每5秒鐘l滴。隨著反應(yīng)進(jìn)行可以適當(dāng)加快滴加速度，直到滴加完為止，得到透明的溶液。仍然在冰水浴的條件下，向該透明溶液加入224ml無水丙酮并劇烈攪拌，溶液很快變渾濁同時(shí)形成非常粘稠混合物。仍然在冰水浴的條件下保持2-3小時(shí)以便充分反應(yīng)。將所得產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到布氏漏斗進(jìn)行抽濾分離，并用丙酮充分洗滌，可得純白色固體。將此純自色固體在熱的甲醇-水溶液中重結(jié)晶，用硅膠干燥劑真空干燥，得80g白色晶體，此白色晶體為l?2hclo4。

參考文獻(xiàn)：

1.curtis,n.f.andhay,r.w.,j.chem.soc.,chem.commun.,1966,p.534.

2.ganghu,panpanchen,weiwang,linhu,jimeisong,lingguangqiu,juansong,e1ectrochimicaacta,2007,vol.52,pp.7996-8002.

3.linhu,ganghu,han-hongxu,j.ana1.chem.,2006,vol.61,no.10,pp.1021-1025.

4.胡剛,中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士論文,p25-27，合肥，2005年。

2)由l?2hclo4制備[nil](clo4)2：

將11gni(ac)24h2o與21g的l?2hclo4置于500ml三頸瓶中，使其溶于250ml甲醇，熱水浴加熱回流3小時(shí)，最后出現(xiàn)黃色沉淀，過濾、將濾液在熱水浴中濃縮至原體積l/2，放置過夜，充分結(jié)晶，得到黃色晶體。將黃色晶體轉(zhuǎn)移至布氏漏斗并用甲醇洗滌，在熱的乙醇-水溶液中重結(jié)晶，真空干燥，可得8g[nil](clo4)2亮黃色晶體。

參考文獻(xiàn)：

1.n.f.curtis,j.chem.soc.doltontran.,1972,vol.13,1357.

2.胡剛,中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士論文,p42-43,合肥,2005年。

本檢測方法與現(xiàn)有技術(shù)的區(qū)別是應(yīng)用“h2so4-kio3-[nil](clo4)2-ma（丙二酸）-h2o2”briggs-rauscher非線性振蕩體系作為檢測溶液，以及該溶液對對香豆酸的振蕩響應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)對對香豆酸的定量分析。檢測溶液中各組分的濃度如表1所示：

表1briggs-rauscher振蕩反應(yīng)溶液中各組分的濃度范圍

具體操作如下：

1、按表1配制檢測溶液，并記錄該溶液電位(potential)隨時(shí)間(time)變化的曲線即化學(xué)電位振蕩圖譜。

配制好的檢測溶液加入50ml小燒杯中并放入大小合適的磁子，放在恒溫磁力加熱攪拌器上，保持?jǐn)嚢杷俣仍?00轉(zhuǎn)/分鐘，在冰浴條件下使燒杯里的溫度維持在-2~2℃。然后，把準(zhǔn)備好的工作電極（鉑電極）和參比電極（雙鹽橋甘汞電極）插入溶液中，準(zhǔn)備對溶液進(jìn)行電位監(jiān)測。工作電極和參比電極的另一端通過放大器(instrumentamplifier)連接到數(shù)據(jù)采集器(go!link)再連接至計(jì)算機(jī)。打開計(jì)算機(jī)中l(wèi)oggerlite程序?qū)Σ杉瘯r(shí)間和取樣速度進(jìn)行設(shè)置后，迅速點(diǎn)擊開始鍵從而對溶液進(jìn)行電位監(jiān)測。計(jì)算機(jī)記錄所采集的電位值隨時(shí)間變化的曲線，即化學(xué)電位振蕩圖譜。當(dāng)需要檢測某種物質(zhì)的時(shí)候，在振蕩圖譜達(dá)到振蕩體系穩(wěn)定時(shí)迅速加入，通常在第6次到第8次振蕩電位處于最低電位時(shí)迅速加入。

振蕩圖譜的基本參數(shù)包括：

誘導(dǎo)時(shí)間：加入最后一種物質(zhì)到溶液起振前所需要的時(shí)間

振蕩振幅：在振蕩過程中從一個(gè)最低電位到下一個(gè)最高點(diǎn)位之間的電位差值。

振蕩周期：在振蕩過程中從一個(gè)最低（高）點(diǎn)位到下一個(gè)最低（高）點(diǎn)位所需時(shí)間。

最高電位：穩(wěn)定振蕩時(shí)體系出現(xiàn)的電位最高點(diǎn)。

最低電位：穩(wěn)定振蕩時(shí)體系出現(xiàn)的電位最低點(diǎn)。

振蕩壽命：自振蕩開始到振蕩結(jié)束所需要的時(shí)間。

平衡電位：體系達(dá)到熱力學(xué)平衡狀態(tài)時(shí)的電位。此刻，電位不隨時(shí)間的變化而變化。

抑制時(shí)間（tin）：從加入對香豆酸溶液振蕩受到抑制開始，到重新恢復(fù)振蕩所需的時(shí)間。

2、建立對香豆酸樣本濃度與振蕩特征響應(yīng)參數(shù)（抑制時(shí)間）之間關(guān)系的工作曲線

配制系列濃度為1.375×10^-5mol/l-1.75×10^-4mol/l的對香豆酸溶液作為樣本溶液。將配制的樣本溶液加入已穩(wěn)定的振蕩體系中，并固定在第6次到第8次振蕩、電位處于最低電位時(shí)時(shí)加入。加入的對香豆酸會(huì)暫時(shí)抑制振蕩一段時(shí)間，然后振蕩恢復(fù)，也即產(chǎn)生了抑制時(shí)間tin，并使振蕩周期和振蕩振幅不規(guī)則的變化。振蕩特征響應(yīng)參數(shù)為抑制時(shí)間（tin）。

以抑制時(shí)間tin為縱坐標(biāo)，對香豆酸樣本溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，得到工作曲線。

3、對香豆酸的定量分析

將待測試樣加入已穩(wěn)定振蕩的振蕩體系中，(待測試樣均在第6次到第8次振蕩、電位處于最低電位時(shí)加入)，振蕩響應(yīng)為產(chǎn)生了抑制時(shí)間，得到tin值，根據(jù)工作曲線可求得待測試樣中的對香豆酸的濃度。

本方法可以方便快捷地檢測出食品或藥品中的對香豆酸的含量，實(shí)驗(yàn)表明，試樣中的其他物質(zhì)對檢測無干擾。

四、附圖說明

圖1是實(shí)施例1中檢測溶液（未加入樣本）的化學(xué)電位振蕩圖譜。

圖2、圖3是實(shí)施例1中加入5×10^-5mol/l、1.25×10^-4mol/l對香豆酸后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

圖4是實(shí)施例1中對香豆酸濃度與振蕩響應(yīng)變化量的工作曲線圖。

圖5是實(shí)施例2中檢測溶液（未加入樣本）的化學(xué)電位振蕩圖譜。

圖6、圖7是實(shí)施例2中加入1.75×10^-5mol/l、7.5×10^-5mol/l對香豆酸溶液后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

圖8是實(shí)施例2中對香豆酸濃度與振蕩響應(yīng)變化量的工作曲線圖。

圖9是實(shí)施例3中檢測溶液（未加入樣本）的化學(xué)電位振蕩圖譜。

圖10、圖11是實(shí)施例3中加入1.375×10^-5mol/l、1.25×10^-4mol/l對香豆酸溶液后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

圖12是實(shí)施例3中對香豆酸濃度與振蕩響應(yīng)變化量的工作曲線圖。

五、具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

應(yīng)用h2so4-kio3-[nil](clo4)2-ma（丙二酸）-h2o2的briggs-rauscher振蕩體系作為檢測溶液，對對香豆酸進(jìn)行定量分析。加入不同濃度的對香豆酸樣本溶液到振蕩體系中，建立起被測物濃度與抑制時(shí)間之間關(guān)聯(lián)的工作曲線（如線性關(guān)系圖），達(dá)到檢測試樣中對香豆酸含量的目的。

（1）配制h2so4-kio3-[nil](clo4)2-ma（丙二酸）-h2o2檢測溶液

首先用98%的濃硫酸配制0.025mol/l的硫酸溶液作為溶劑；然后用0.025mol/l的硫酸溶劑分別配制0.14mol/l的碘酸鉀溶液，2.0mol/l的丙二酸溶液，4.0mol/l的過氧化氫溶液和0.0173mol/l的[nil](clo4)2溶液。然后，向50ml燒杯的開放體系中逐次加入14.5ml,0.025mol/l的硫酸溶液;6.5ml,0.14mol/l的碘酸鉀溶液；1.5ml,0.0173mol/l的催化劑；2.5ml,2.0mol/l的丙二酸溶液；15ml,4.0mol/l的過氧化氫溶液。最后，體系中硫酸的濃度為0.025mol/l,碘酸鉀的濃度為0.02275mol/l,催化劑的濃度為6.4875×10^-4mol/l,丙二酸的濃度為0.125mol/l，過氧化氫的濃度為1.5mol/l。

同時(shí)配制系列不同濃度的對香豆酸樣本溶液。

（2）獲得振蕩圖譜

配制好的檢測溶液（振蕩體系）的振蕩圖譜用計(jì)算機(jī)記錄。如圖1所示。在配制好的振蕩溶液中分別加入微量不同濃度的對香豆酸樣本溶液，每次加入的時(shí)間都是第7次振蕩開始、電位處于最低電位時(shí)，加入的對香豆酸會(huì)暫時(shí)抑制振蕩一段時(shí)間，然后振蕩恢復(fù)，也即產(chǎn)生了抑制時(shí)間tin，并使振蕩周期和振蕩振幅不規(guī)則的變化。圖2、圖3分別是加入5×10^-5mol/l、1.25×10^-4mol/l對香豆酸后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

（3）分析

根據(jù)對香豆酸的加入濃度與抑制時(shí)間tin之間的關(guān)系建工作曲線，如圖4所示，其中橫坐標(biāo)是被加入到振蕩溶液中的對香豆酸的濃度，縱坐標(biāo)是抑制時(shí)間tin，當(dāng)對香豆酸的濃度在5×10^-5mol/l到1.5×10^-4mol/l之間時(shí)，抑制時(shí)間tin與對香豆酸溶液的濃度成一次線性關(guān)系，據(jù)此可以實(shí)現(xiàn)對試樣中對香豆酸的定量分析。

實(shí)施例2

（1）配制h2so4-kio3-[nil](clo4)2-ma（丙二酸）-h2o2檢測溶液

首先用98%的濃硫酸配制0.025mol/l的硫酸溶液作為溶劑；然后用0.025mol/l的硫酸溶劑分別配制0.14mol/l的碘酸鉀溶液，2.0mol/l的丙二酸溶液，4.0mol/l的過氧化氫溶液和0.0173mol/l的[nil](clo4)2溶液。然后，向50ml燒杯的開放體系中逐次加入14.7ml,0.025mol/l的硫酸溶液;6ml,0.14mol/l的碘酸鉀溶液；2ml,0.0173mol/l的催化劑；3.3ml,2.0mol/l的丙二酸溶液；14ml,4.0mol/l的過氧化氫溶液。最后，體系中硫酸的濃度為0.025mol/l,碘酸鉀的濃度為0.021mol/l,催化劑的濃度為8.65×10^-4mol/l，丙二酸的濃度為0.165mol/l，過氧化氫的濃度為1.4mol/l。

同時(shí)配制系列不同濃度的對香豆酸樣本溶液。

（2）獲得振蕩圖譜

配制好的檢測溶液（振蕩體系）的振蕩圖譜用計(jì)算機(jī)記錄。如圖5所示。在配制好的振蕩溶液中分別加入微量不同濃度的對香豆酸樣本溶液，每次加入的時(shí)間都是第7次振蕩開始、電位處于最低電位時(shí)，加入對香豆酸會(huì)暫時(shí)抑制振蕩一段時(shí)間，然后振蕩恢復(fù)，也即產(chǎn)生了抑制時(shí)間tin，并使振蕩周期和振蕩振幅不規(guī)則的變化。圖6、圖7分別是加入1.75×10^-5mol/l、7.5×10^-5mol/l對香豆酸溶液后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

（3）分析

根據(jù)對香豆酸的加入濃度與抑制時(shí)間tin之間的關(guān)系建工作曲線，如圖8所示，其中橫坐標(biāo)是被加入到振蕩溶液中的對香豆酸的濃度，縱坐標(biāo)是抑制時(shí)間tin，當(dāng)對香豆酸的濃度在1.5×10^-5mol/l到7.5×10^-5mol/l之間時(shí)，抑制時(shí)間tin與對香豆酸溶液的濃度成一次線性關(guān)系，據(jù)此可以實(shí)現(xiàn)對試樣中對香豆酸的定量分析。

實(shí)施例3

1）配制h2so4-kio3-[nil](clo4)2-ma（丙二酸）-h2o2檢測溶液

首先用98%的濃硫酸配制0.025mol/l的硫酸溶液作為溶劑；然后用0.025mol/l的硫酸溶劑分別配制0.14mol/l的碘酸鉀溶液，2.0mol/l的丙二酸溶液，4.0mol/l的過氧化氫溶液和0.0173mol/l的[nil](clo4)2溶液。然后，向50ml燒杯的開放體系中逐次加入14ml,0.025mol/l的硫酸溶液;0.5ml蒸餾水；6ml,0.14mol/l的碘酸鉀溶液；2ml,0.0173mol/l的催化劑；3ml,2.0mol/l的丙二酸溶液；14.5ml,4.0mol/l的過氧化氫溶液。最后，體系中硫酸的濃度為0.0246875mol/l,碘酸鉀的濃度為0.021mol/l,催化劑的濃度為8.65×10^-4mol/l，丙二酸的濃度為0.15mol/l，過氧化氫的濃度為1.45mol/l。

同時(shí)配制系列不同濃度的對香豆酸樣本溶液。

（2）獲得振蕩圖譜

配制好的檢測溶液(振蕩體系)的振蕩圖譜用計(jì)算機(jī)記錄。如圖9所示。在配制好的振蕩溶液中分別加入微量不同濃度的對香豆酸樣本溶液，每次加入的時(shí)間都是第7次振蕩開始、電位處于最低電位時(shí)，加入對香豆酸會(huì)暫時(shí)抑制振蕩一段時(shí)間，然后振蕩恢復(fù)，也即產(chǎn)生了抑制時(shí)間tin，并使振蕩周期和振蕩振幅不規(guī)則的變化。圖10、圖11分別是加入1.375×10^-5mol/l、1.25×10^-4mol/l對香豆酸溶液后振蕩體系的振蕩響應(yīng)圖譜。

（3）分析

根據(jù)對香豆酸的加入濃度與抑制時(shí)間tin之間的關(guān)系建工作曲線，如圖12所示，其中橫坐標(biāo)是被加入到振蕩溶液中的對香豆酸的濃度，縱坐標(biāo)是抑制時(shí)間tin，當(dāng)對香豆酸的濃度在1.375×10^-5mol/l到1.75×10^-4mol/l之間時(shí)，抑制時(shí)間tin與對香豆酸溶液的濃度成一次線性關(guān)系，據(jù)此可以實(shí)現(xiàn)對試樣中對香豆酸的定量分析。