本發(fā)明屬于羊肚菌栽培領(lǐng)域，涉及一種羊肚菌單孢菌株采用“人工授粉”進(jìn)行栽培的方法。

背景技術(shù)：

羊肚菌是子囊菌中的一種美味食用菌。羊肚菌營(yíng)養(yǎng)豐富，具有養(yǎng)胃、護(hù)肝的滋補(bǔ)療效，廣受消費(fèi)者歡迎，在菌類市場(chǎng)上供不應(yīng)求。隨著羊肚菌的市場(chǎng)需求量快速增長(zhǎng)，靠采集野生羊肚菌已無(wú)法滿足需求。因此，近年來(lái)出現(xiàn)了一批人工栽培羊肚菌的技術(shù)，例如授權(quán)公告號(hào)CN103583232B、CN103202177B、CN101628834B的專利和申請(qǐng)公布號(hào)CN103782802A、CN103583240A、CN101053302所述的栽培方法。羊肚菌的出菇依靠其有性生殖的過(guò)程，而羊肚菌有性生殖的機(jī)理長(zhǎng)期未研究清楚。

本專利發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)自然狀態(tài)下的羊肚菌菌絲分為X型、Y型、XY型三種菌絲。X型菌絲是由X型單孢子發(fā)育而來(lái)，只具有MAT1-1-1交配型基因。Y型菌絲是由Y型單孢子發(fā)育而來(lái)，只具有MAT1-2-1交配型基因。X型、Y型菌絲又被稱為單孢菌絲或同核菌絲。XY型菌絲是由X、Y型菌絲在羊肚菌生命周期的某一階段融合后產(chǎn)生，同時(shí)具有MAT1-1-1和MAT1-2-1兩個(gè)交配型基因，又叫異核菌絲或雙核菌絲。

X型、Y型菌絲均可以產(chǎn)生白粉狀的“小分生孢子”。只有Y型的小分生孢子與X型菌絲融合后，才能產(chǎn)生可出菇的XY型菌絲。X型小分生孢子與Y型菌絲之間可融合產(chǎn)生XY型菌絲，但該菌絲的出菇能力很弱。X型小分生孢子與X型菌絲之間、Y型小分生孢子與Y型菌絲之間、任何類型的小分生孢子與小分生孢子之間、任何類型的菌絲與菌絲之間，都無(wú)法融合產(chǎn)生可出菇的XY型菌絲。因此，在羊肚菌的有性生殖過(guò)程中，只有X型的菌絲和Y型的小分生孢子是需要的，而Y型的菌絲和X型的小分生孢子都是不必要的。

進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，羊肚菌在出菇過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)主要是由存儲(chǔ)在X型菌絲細(xì)胞中的油滴提供的，因此在栽培過(guò)程中需要給X型菌絲供給充足的營(yíng)養(yǎng)才能提高子實(shí)體的產(chǎn)量。而X、Y型菌絲均在營(yíng)養(yǎng)缺乏的條件下更容易產(chǎn)生小分生孢子，因此需要讓Y型菌絲處于營(yíng)養(yǎng)缺乏的條件下以促進(jìn)Y型小分生孢子的形成，同時(shí)應(yīng)避免讓X型菌絲產(chǎn)生小分生孢子以免浪費(fèi)營(yíng)養(yǎng)。

在所有現(xiàn)有的羊肚菌栽培技術(shù)中，所用的菌株都源自組織分離或多孢子分離，是X型、Y型的菌絲的混合物。在栽培過(guò)程中，X型、Y型菌絲混在一起栽培，處于同一環(huán)境條件下。在放置營(yíng)養(yǎng)袋前，X型、Y型菌絲均產(chǎn)生小分生孢子，而X型的小分生孢子是一種浪費(fèi)。在放置營(yíng)養(yǎng)袋對(duì)菌絲進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)供給后，X型、Y型菌絲均獲得了營(yíng)養(yǎng)供給，不利于Y型菌絲繼續(xù)高效率地產(chǎn)生小分生孢子，同時(shí)被Y型菌絲吸收儲(chǔ)藏在細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)于出菇是沒(méi)有意義的，卻分走了本該被X型菌絲吸收的營(yíng)養(yǎng)，也是一種浪費(fèi)。綜上所述，現(xiàn)有的羊肚菌栽培方式需要改進(jìn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種新的羊肚菌栽培方法。通過(guò)在栽培開(kāi)始階段將X型、Y型菌株分別栽培的方式，采用只對(duì)X型菌絲提供營(yíng)養(yǎng)袋中的營(yíng)養(yǎng)，而通過(guò)薄層土層架栽培的方式創(chuàng)造最適合Y型菌絲產(chǎn)生Y型小分生孢子的環(huán)境。創(chuàng)造了給羊肚菌單孢菌株采用“人工授粉”的方法，將含有Y型小分生孢子的培養(yǎng)土播撒到X型菌絲的菌床上，促進(jìn)XY型菌絲的高效形成，利于最終出菇，起到提高栽培效率，提升產(chǎn)量的作用。

本發(fā)明羊肚菌單孢菌株采用“人工授粉”進(jìn)行催菇出菇的栽培方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、備種：取羊肚菌屬中同一個(gè)種的X型菌株和Y型菌株，在培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)，使得X型菌株的菌絲和Y型菌株的菌絲分別蔓延至培養(yǎng)基中，分別得到X型菌種和Y型菌種；

B、X型菌種播種：

1)栽培地預(yù)處理：栽培地采用高箱壟作、雙溝條播的方法，制成作為母菌床；

2)培養(yǎng)基下地：在栽培地的母菌床中，平均每平方米菌床播種500-1400ml步驟A備種所得X型菌種(優(yōu)選菌種采用菌種瓶裝)；

3)補(bǔ)水：保持土壤表層1-3cm含水量60-80％；

4)補(bǔ)營(yíng)養(yǎng)袋：在地表形成大量羊肚菌菌絲后3-7天，放置營(yíng)養(yǎng)袋；

C、Y型孢子育粉：采用室內(nèi)層架方式培育Y型小分生孢子：

1)將步驟A備種所得Y型菌種與土壤按照5000ml-14000mlY型菌種混合1立方米土壤的比例混合，鋪在層架上，形成厚度1-4厘米的土層；

2)補(bǔ)水控溫：保持土壤含水量45-60％，溫度10-20℃；

3)護(hù)理至土壤表明產(chǎn)生大量白色的小分生孢子，該小分生孢子稱為粉土；

D、人工授粉：在X型菌絲的母菌床放置營(yíng)養(yǎng)袋15-25天后，將粉土播撒在母菌床上，其中，優(yōu)選每平方米母菌床播撒0.005-0.01立方米粉土；

E、管理，采收：按照常規(guī)條件管理直至采收。

上述技術(shù)方案中：

步驟A的備種中：采用的培養(yǎng)容器為玻璃瓶菌種瓶、聚丙烯塑料菌種瓶或聚丙烯塑料袋等培養(yǎng)容器中的任意一種。

本發(fā)明中發(fā)明人為了便于操作，采用了最常見(jiàn)的玻璃瓶菌種瓶。

所述菌種瓶是容量800毫升、高與直徑比例為1-1～2:1的玻璃瓶，裝有3/4-4/5體積的麩皮培養(yǎng)基。

所述麩皮培養(yǎng)基為：麩皮加水至濕度為60-70％，再加入生石灰調(diào)節(jié)pH值至8.0-8.5。

培養(yǎng)條件為：在15-25℃培養(yǎng)16-20天，使羊肚菌菌絲蔓延到大部分麩皮培養(yǎng)基中。

步驟B的X型菌種播種中：

步驟1)栽培地預(yù)處理：母菌床的壟高為20-40cm，壟寬為60-150cm；壟之間的溝寬20-50cm。

步驟4)所述營(yíng)養(yǎng)袋為常用營(yíng)養(yǎng)袋。

如可采用的營(yíng)養(yǎng)袋填料是由下述重量百分比的組分制成：為麥粒70-80％，谷殼20-30％，用生石灰調(diào)pH至8.5-9.5，每袋裝750g填料，外皮為聚丙烯塑料膜，滅菌即得。

步驟4)放置營(yíng)養(yǎng)袋前，先在營(yíng)養(yǎng)袋的一面打3-4排小孔，每排8-10個(gè)小孔，每個(gè)小孔直徑1-3mm。

步驟4)放置營(yíng)養(yǎng)袋為每畝放置1500-2200個(gè)營(yíng)養(yǎng)袋，每壟橫向2袋，縱向間隔20-45cm。小孔朝下擺放。

步驟4)放置營(yíng)養(yǎng)袋后搭建遮陽(yáng)棚，控制透光率2-10％，優(yōu)選透光率5％。具體的，搭建遮陽(yáng)棚的棚高2-3米，通過(guò)覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)實(shí)現(xiàn)控制透光率。

步驟C的Y型孢子育粉中：

所述層架又稱為育粉床，層架的每層長(zhǎng)度2-20米，寬度1-2米，層高30-60厘米。

本發(fā)明的關(guān)鍵步驟在于步驟A-D：步驟A、備種；步驟B、X型菌種播種；步驟C、Y型孢子育粉；步驟D、人工授粉，之后的步驟E的管理，采收按照現(xiàn)有已報(bào)道的條件管理即可。步驟E的管理，采收的方法參見(jiàn)《四川羊肚菌高效栽培模式與技術(shù)》(《食藥用菌》2016年第24卷第3期，151～154頁(yè)的記載，具體的管理?xiàng)l件為保持母菌床土壤表層1-3cm含水量50-70％，溫度為2-15℃；40-60天后(優(yōu)選50天后)，溫度達(dá)到12-15℃，噴霧補(bǔ)水催菇：噴霧補(bǔ)水控制使空氣濕度為60-90％，土壤表層1-3cm的含水量50-70％；出菇后控制溫度8-20℃至采收結(jié)束。

當(dāng)羊肚菌子實(shí)體成熟，菌蓋長(zhǎng)度達(dá)到3-6cm，顏色由深灰色轉(zhuǎn)為棕色時(shí)，即可采收。具體的，采用刀片輕輕橫切斷菌柄，將子實(shí)體輕放入采收容器中即可。

本發(fā)明栽培方法的主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)和有益點(diǎn)：

(1)相比傳統(tǒng)羊肚菌栽培方法使用X型、Y型菌絲的混合物作為栽培菌種，本發(fā)明栽培方法是將X型、Y型菌株分別置于不同的環(huán)境下培養(yǎng)。

(2)“人工授粉”本是糧食、蔬菜、果樹(shù)等高等植物栽培領(lǐng)域的概念，本發(fā)明栽培方法第一次給食用菌栽培領(lǐng)域引入了“人工授粉”的概念和方法，將Y型的小分生孢子授給X型菌絲。

(3)使X型菌株專注于從營(yíng)養(yǎng)袋中吸收和儲(chǔ)藏營(yíng)養(yǎng)，使Y型菌株專注于產(chǎn)生小分生孢子，減少了營(yíng)養(yǎng)浪費(fèi)，提升了轉(zhuǎn)化效率，從而有利于提高產(chǎn)量。

(4)本發(fā)明栽培方法使用X型、Y型兩個(gè)獨(dú)立的菌株作為菌種，因此，只要將帶有不同優(yōu)良性狀的X型菌株和Y型菌株用本方法栽培出菇，就可從實(shí)質(zhì)上實(shí)現(xiàn)菌株雜交，為羊肚菌雜交育種提供了一種新的栽培方法。

名詞解釋：

羊肚菌：指真菌中屬于羊肚菌屬(Morchella genus)的所有食用菌，包括但不限于梯棱羊肚菌(Morchella importuna)、六妹羊肚菌(Morchella sextelata)、七妹羊肚菌(Morchella septimelata)、尖頂羊肚菌(Morchella conica)、黃羊肚菌(Morchella esculenta)、高羊肚菌(Morchella elata)、粗腿羊肚菌(Morchella crassipes)等。最常見(jiàn)的用于人工栽培的羊肚菌包括梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌、七妹羊肚菌。

菌種：是指食用菌、工業(yè)菌、農(nóng)用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。

單孢菌絲：由單個(gè)子囊孢子萌發(fā)形成的菌絲，只含有一種交配型的細(xì)胞核，因此又稱為單核菌絲。

小分生孢子：一些子囊真菌可以產(chǎn)生兩種分生孢子，分別是大分生孢子(macroconidium)和小分生孢子(microconidium)。大分生孢子一般直徑較大，有多個(gè)細(xì)胞核，有較多的細(xì)胞器，很容易萌發(fā)成菌絲，主要用于真菌的無(wú)性繁殖。小分生孢子是出現(xiàn)在有性繁殖過(guò)程中的分生孢子，通常只有一個(gè)細(xì)胞核且細(xì)胞器較少，一般不容易獨(dú)立萌發(fā)成菌絲。在有性繁殖開(kāi)始時(shí)，一種交配型的單孢菌絲產(chǎn)生的小分生孢子與另一種交配型的單孢菌絲發(fā)生融合，形成異核菌絲，這個(gè)過(guò)程是細(xì)胞質(zhì)的交配，又稱為質(zhì)配。異核菌絲中，兩種不同交配型的細(xì)胞核尚未發(fā)生融合。在異核菌絲生長(zhǎng)一段時(shí)間后，兩種不同交配型的細(xì)胞核發(fā)生融合，這個(gè)過(guò)程是細(xì)胞核的交配，又稱為核配。核配后形成的融合細(xì)胞核隨后發(fā)生減數(shù)分裂，形成4個(gè)或8個(gè)子囊孢子。每個(gè)子囊孢子中僅含有一種交配型的細(xì)胞核，由單個(gè)子囊孢子萌發(fā)成的菌絲再次成為單孢菌絲。

人工授粉：人工授粉原是用于糧食、蔬菜、果樹(shù)等開(kāi)花的高等植物的概念，是指將從雄蕊中獲得的花粉撒在雌蕊的柱頭上，促進(jìn)花粉中的精細(xì)胞與雌蕊子房中的卵細(xì)胞結(jié)合，使植物結(jié)出果實(shí)的步驟。本發(fā)明中第一次定義了食用菌的“人工授粉”的概念：是指將Y型菌株產(chǎn)生的小分生孢子撒在X型菌株的菌絲上，促進(jìn)X型、Y型菌株進(jìn)行質(zhì)配，開(kāi)啟有性生殖過(guò)程，促進(jìn)食用菌產(chǎn)生子實(shí)體(即出菇)的步驟。與高等植物人工授粉的原理和步驟有類似性但又有所不同。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明羊肚菌單孢菌株采用“人工授粉”進(jìn)行催菇出菇的栽培方法，所需的單孢菌株是由羊肚菌的子囊中挑取的單孢子萌發(fā)而成。單孢菌株可經(jīng)由PCR鑒定法、全基因組測(cè)序法、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序法、核酸雜交法或蛋白質(zhì)免疫印跡雜交法鑒定為X型菌株或Y型菌株。本發(fā)明栽培方法的備種、X型菌種播種、Y型孢子育粉、人工授粉、授粉后管理、采用的步具體如下：

備種：取羊肚菌屬(genus)中同一個(gè)種(species)的X型菌株和Y型菌株，分別接入菌種瓶。菌種瓶是容量800毫升、高與直徑比例為1-1～2:1的玻璃瓶，裝有3/4-4/5體積的麩皮培養(yǎng)基。麩皮培養(yǎng)基的制備方法是往干麩皮中噴水至60-70％濕度，再逐漸加入生石灰調(diào)節(jié)pH值到8.0-8.5。菌種瓶在15-25℃培養(yǎng)16-20天，使羊肚菌菌絲蔓延到大部分麩皮培養(yǎng)基中，分別得到X型菌種和Y型菌種。

X型菌種播種：栽培地采用高箱壟作、雙溝條播的方法，制成壟高20-40cm、壟寬60-150cm的母菌床，壟之間的溝寬20-50cm。平均每平方米菌床播種1-2個(gè)X型的菌種瓶(換算后，按照菌種瓶容量800毫升、裝有3/4-4/5體積培養(yǎng)基換算，菌種瓶中X型菌種約為500-700ml，則1-2個(gè)菌種為500-1400ml)。播種第3天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤表層1-3cm含水量60-80％。在地表形成大量羊肚菌菌絲后3-7天，放置營(yíng)養(yǎng)袋。營(yíng)養(yǎng)袋填料配方為麥粒70-80％，谷殼20-30％，用生石灰調(diào)pH至8.5-9.5，每袋裝750g填料，外皮為聚丙烯塑料膜，經(jīng)121℃滅菌2小時(shí)。放置前用釘板或螺絲刀在營(yíng)養(yǎng)袋的一面打3-4排小孔，每排8-10個(gè)小孔，每個(gè)小孔直徑1-3mm。每畝放置1500-2200個(gè)營(yíng)養(yǎng)袋，每壟橫向2袋，縱向間隔20-45cm。小孔朝下擺放。隨后搭建遮陽(yáng)棚，棚高2-3米，所覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)透光率5％。

Y型孢子育粉：采用室內(nèi)層架方式培育Y型小分生孢子。層架又稱育粉床，層架的每層長(zhǎng)度2-20米，寬度1-2米，層高30-60厘米。按照10-20個(gè)Y型菌種瓶加入1立方米土壤的比例(換算后，按照菌種瓶容量800毫升、裝有3/4-4/5體積培養(yǎng)基換算，菌種瓶中Y型菌種約為500-700ml，則10-20個(gè)菌種為5000-14000ml)，將Y型菌種與土壤混合均勻，鋪在層架上，形成厚度1-4厘米的土層。播種第2天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤含水量45-60％，室內(nèi)溫度10-20℃之間，持續(xù)5-15天直至土壤表明產(chǎn)生大量白色的小分生孢子，稱為粉土。此過(guò)程不能放置任何營(yíng)養(yǎng)袋。為了配合X型菌株菌絲的生長(zhǎng)，一般在X型菌種播種后10-15天，開(kāi)始進(jìn)行Y型孢子育粉，

人工授粉：在X型菌絲的母菌床放置營(yíng)養(yǎng)袋后15-25天，且Y型分生孢子布滿育粉床后，從育粉床上鏟起含有小分生孢子的粉土，均勻播撒在母菌床上，按照每平方米母菌床播撒0.005-0.01立方米粉土的比例。

授粉后管理：授粉后始終保持母菌床土壤表層1-3cm含水量50-70％，大棚中的溫度在2-15℃之間。50天后，待自然升溫或人工加溫使大棚中的溫度達(dá)到12-15℃，噴霧補(bǔ)水催菇，使大棚內(nèi)空氣濕度60-90％，土壤表層1-3cm的含水量50-70％，即開(kāi)始大量出菇。出菇后大棚內(nèi)氣溫維持在8-20℃之間，直至采收結(jié)束。

采收：當(dāng)羊肚菌子實(shí)體成熟，菌蓋長(zhǎng)度達(dá)到3-6cm，顏色由深灰色轉(zhuǎn)為棕色時(shí)，既可采摘。用刀片輕輕橫切斷菌柄，將子實(shí)體輕放入采收容器中。

具體實(shí)例和實(shí)施效果

以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，說(shuō)明但不限制本發(fā)明。

實(shí)施例1：

時(shí)間：2014年9月開(kāi)始

地點(diǎn)：四川省成都市雙流縣

備種：取梯棱羊肚菌3號(hào)(Morchella importuna M3#)的X型菌株和Y型菌株，分別接入菌種瓶。菌種瓶是容量800毫升、高與直徑比例為1.5:1的玻璃瓶，裝有3/4體積的麩皮培養(yǎng)基。麩皮培養(yǎng)基的制備是往干麩皮中噴水至60％濕度，再逐漸加入生石灰調(diào)節(jié)pH值到8.4。菌種瓶在18℃培養(yǎng)17天，使羊肚菌菌絲蔓延到大部分麩皮培養(yǎng)基中，分別得到X型菌種和Y型菌種。

X型菌種播種：栽培地采用高箱壟作、雙溝條播的方法，制成壟高30cm、壟寬100cm的母菌床，壟之間的溝寬30cm。每平方米菌床播種一個(gè)X型的菌種瓶。播種第3天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤表層1-3cm含水量70％左右。在地表形成大量羊肚菌菌絲后5天，放置營(yíng)養(yǎng)袋。營(yíng)養(yǎng)袋填料配方為麥粒80％，谷殼20％，用生石灰調(diào)pH至9.5，每袋裝750g填料，外皮為聚丙烯塑料膜，經(jīng)121℃滅菌2小時(shí)。放置前用釘板或螺絲刀在營(yíng)養(yǎng)袋的一面打4排小孔，每排10個(gè)小孔，每個(gè)小孔直徑2mm。每畝放置2000個(gè)營(yíng)養(yǎng)袋，每壟橫向2袋，縱向間隔35cm。小孔朝下擺放。隨后搭建遮陽(yáng)棚，棚高2.5米，所覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)透光率5％。

Y型孢子育粉：在X型菌種播種后12天，開(kāi)始采用室內(nèi)層架方式培育Y型小分生孢子。育粉床層架的每層長(zhǎng)度12米，寬度1.5米，層高35厘米。按照15個(gè)Y型菌種瓶加入1立方米土壤的比例，將Y型菌種瓶?jī)?nèi)容物與土壤混合均勻，鋪在層架上，形成厚度2厘米的土層。播種第2天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤含水量50％，室內(nèi)溫度控制在10-20℃之間，持續(xù)12天直至土壤表明產(chǎn)生大量白色的小分生孢子，即為粉土。

人工授粉：在X型菌絲的母菌床放置營(yíng)養(yǎng)袋后第20天，且Y型分生孢子布滿育粉床后，從育粉床上鏟起全部粉土，均勻播撒在母菌床上，按照每平方米母菌床播撒0.0075立方米粉土的比例。

授粉后管理：授粉后始終保持母菌床土壤表層1-3cm含水量50-70％，大棚中的溫度在2-15℃之間。越過(guò)冬季，第二年2月1日大棚內(nèi)的溫度自然升溫達(dá)到12-15℃，開(kāi)始噴霧補(bǔ)水催菇，使大棚內(nèi)空氣濕度80-90％，土壤表層1-3cm的含水量60-70％，即開(kāi)始大量出菇。出菇后大棚內(nèi)氣溫維持在8-20℃之間，直至采收結(jié)束。

采收：當(dāng)羊肚菌子實(shí)體成熟，菌蓋長(zhǎng)度達(dá)到3-6cm，顏色由深灰色轉(zhuǎn)為棕色時(shí)，用刀片輕輕橫切斷菌柄，將子實(shí)體輕放入采收容器中。

實(shí)施例2：

時(shí)間：2015年10月開(kāi)始

地點(diǎn)：四川省成都市新都區(qū)

備種：取六妹羊肚菌0號(hào)(Morchella sextelata M0#)的X型菌株和Y型菌株，分別接入菌種瓶。菌種瓶是容量800毫升、高與直徑比例為2:1的玻璃瓶，裝有3/4體積的麩皮培養(yǎng)基。麩皮培養(yǎng)基的制備是往干麩皮中噴水至60％濕度，再逐漸加入生石灰調(diào)節(jié)pH值到8.1。菌種瓶在20℃培養(yǎng)14天，使羊肚菌菌絲蔓延到大部分麩皮培養(yǎng)基中，分別得到X型菌種和Y型菌種。

X型菌種播種：栽培地采用高箱壟作、雙溝條播的方法，制成壟高35cm、壟寬120cm的母菌床，壟之間的溝寬25cm。平均每平方米菌床播種1.25個(gè)X型的菌種瓶。播種第3天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤表層1-3cm含水量65％左右。在地表形成大量羊肚菌菌絲后4天，放置營(yíng)養(yǎng)袋。營(yíng)養(yǎng)袋填料配方為麥粒75％，谷殼25％，用生石灰調(diào)pH至9.2，每袋裝750g填料，外皮為聚丙烯塑料膜，經(jīng)121℃滅菌2小時(shí)。放置前用釘板或螺絲刀在營(yíng)養(yǎng)袋的一面打3排小孔，每排10個(gè)小孔，每個(gè)小孔直徑3mm。每畝放置1800個(gè)營(yíng)養(yǎng)袋，每壟橫向2袋，縱向間隔40cm。小孔朝下擺放。隨后搭建遮陽(yáng)棚，棚高2米，所覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)透光率5％。

Y型孢子育粉：在X型菌種播種后12天，開(kāi)始采用室內(nèi)層架方式培育Y型小分生孢子。育粉床層架的每層長(zhǎng)度12米，寬度1.5米，層高35厘米。按照18個(gè)Y型菌種瓶加入1立方米土壤的比例，將Y型菌種瓶?jī)?nèi)容物與土壤混合均勻，鋪在層架上，形成厚度2.5厘米的土層。播種第2天后開(kāi)始補(bǔ)水，始終保持土壤含水量55％，室內(nèi)溫度控制在10-20℃之間，持續(xù)14天直至土壤表明產(chǎn)生大量白色的小分生孢子，即為粉土。

人工授粉：在X型菌絲的母菌床放置營(yíng)養(yǎng)袋后第22天，且Y型分生孢子布滿育粉床后，從育粉床上鏟起全部粉土，均勻播撒在母菌床上，按照每平方米母菌床播撒0.01立方米粉土的比例。

授粉后管理：授粉后始終保持母菌床土壤表層1-3cm含水量50-70％，大棚中的溫度在3-13℃之間。越過(guò)冬季，第二年2月8日大棚內(nèi)的溫度自然升溫達(dá)到12-15℃，開(kāi)始噴霧補(bǔ)水催菇，使大棚內(nèi)空氣濕度85-90％，土壤表層1-3cm的含水量60-70％，即開(kāi)始大量出菇。出菇后大棚內(nèi)氣溫維持在8-20℃之間，直至采收結(jié)束。

采收：當(dāng)羊肚菌子實(shí)體成熟，菌蓋長(zhǎng)度達(dá)到3-6cm，顏色由深灰色轉(zhuǎn)為棕色時(shí)，用刀片輕輕橫切斷菌柄，將子實(shí)體輕放入采收容器中。

對(duì)照例：

在實(shí)施例1和實(shí)施例2的同樣栽培地點(diǎn)，采用授權(quán)號(hào)或公布號(hào)CN103202177B、CN101628834B、CN103583240A的發(fā)明提供的羊肚菌栽培方法進(jìn)行栽培。

方案實(shí)施效果

表1不同專利中提供的菌種的每畝成本投入，含地租、原料成本和人力成本(單位：元/畝)

表2采用不同專利中提供的菌種的羊肚菌畝產(chǎn)(單位：kg每畝，重量為干重)

以上結(jié)果表明，采用本發(fā)明提供的栽培方法，雖然由于將X型、Y型菌株分開(kāi)培育并引入“人工授粉”過(guò)程，略微增加了栽培操作的復(fù)雜程度從而導(dǎo)致每畝成本上浮27％-37％不等。但是每畝產(chǎn)量提升320％-660％，使得羊肚菌的栽培產(chǎn)出/投入比更加高效，同時(shí)用更少的耕地達(dá)成了更高的產(chǎn)量，對(duì)于現(xiàn)代化高效農(nóng)業(yè)是一種值得推廣的模式。