本發(fā)明屬于節(jié)肢動(dòng)物解剖學(xué)，更具體地說(shuō)，特別涉及一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法。

背景技術(shù)：

1、大蠟螟屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)昆蟲(chóng)綱鱗翅目昆蟲(chóng)。顏色：大蠟螟的幼蟲(chóng)體色有淺黃色或灰褐色，而老熟幼蟲(chóng)的體色則呈黃褐色。大?。捍笙灻睦鲜煊紫x(chóng)體長(zhǎng)通常在18-23毫米之間，但也可能達(dá)到23-25毫米。大蠟螟的幼蟲(chóng)初孵化時(shí)似衣魚(yú)狀，體乳白色，長(zhǎng)0.8～1毫米，前胸背板棕褐色。形態(tài)：隨著幼蟲(chóng)的成長(zhǎng)，其體色和形態(tài)也會(huì)發(fā)生變化。

2、大蠟螟的幼蟲(chóng)在蜜蜂巢內(nèi)取食蜂巢的蠟質(zhì)，并吐絲造巢擾亂蜜蜂在蜂巢內(nèi)的正?；顒?dòng)，嚴(yán)重破壞蜂巢的結(jié)構(gòu)，以致迫使蜂群逃逸。因此，大蠟螟幼蟲(chóng)對(duì)養(yǎng)蜂業(yè)具有一定的危害性。以其腸道為研究材料，對(duì)養(yǎng)蜂業(yè)的防治及新型生物農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)具有重要意義。

3、大蠟螟幼蟲(chóng)腸道解剖是研究其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的重要技術(shù)，是進(jìn)行大蠟螟幼蟲(chóng)腸道與其生理生化反應(yīng)和生長(zhǎng)發(fā)育之間聯(lián)系的前提基礎(chǔ)。然而大蠟螟幼蟲(chóng)體型較小，7齡幼蟲(chóng)的體長(zhǎng)約18-23毫米，由于其腸道細(xì)長(zhǎng)且脆弱；幼蟲(chóng)腸道內(nèi)的微生物群落復(fù)雜，在解剖過(guò)程中，如何保持微生物群落的完整性，避免污染和變化，這都是現(xiàn)有技術(shù)所面臨的技術(shù)難題。

4、經(jīng)過(guò)檢索國(guó)內(nèi)外現(xiàn)有文獻(xiàn)，目前尚未有分離大蠟螟幼蟲(chóng)腸道的方法報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，該方法能夠高效獲得完整的大蠟螟幼蟲(chóng)腸道，避免了常規(guī)解剖方法所造成的機(jī)械損傷，減少了實(shí)驗(yàn)材料的污染和浪費(fèi)，為后續(xù)腸道組織特異性和腸道微生物分析等研究提供了良好的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)材料。

2、本發(fā)明一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法的目的與功效，由以下具體技術(shù)手段所達(dá)成：

3、一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，所述方法步驟為：一、將待解剖的大蠟螟幼蟲(chóng)放入酒精中浸泡，進(jìn)行體表消毒；二、取上述步驟一處理后的一只大蠟螟，頭前尾后，背面向上置于蠟盤(pán)中央，頭尾釘昆蟲(chóng)針，使其在蠟盤(pán)中充分舒展開(kāi)；三、在尾端背面做橫向小切口，沿背中線剪到頭端，利用昆蟲(chóng)解剖刀在其尾部1.8-2.2m處隔開(kāi)一個(gè)直徑為0.5-1mm的小口，露出黃綠色腸道；四、打開(kāi)體壁并用昆蟲(chóng)針固定；五、往蠟盤(pán)中加入解剖操作液，用鑷子取下整個(gè)消化道，清理脂肪、絲腺、肌肉即可獲得完整的大蠟螟腸道，完整的大蠟螟腸道呈透明或淺綠色。

4、所述步驟一中的消毒方法為：用75％酒精浸泡3min。

5、所述步驟二中的頭尾釘昆蟲(chóng)中的方法為：蠟盤(pán)用75％的酒精消毒，且在超凈臺(tái)上工作，昆蟲(chóng)針斜向外插。

6、所述步驟三中：剪開(kāi)體壁時(shí)剪刀頭上挑不要剪破消化道。

7、所述步驟五中，解剖操作液為昆蟲(chóng)生理鹽水或ph7.2-ph7.4的1*pbs緩沖液。

8、本發(fā)明至少包括以下有益效果：

9、在不破壞大蠟螟表皮和其他組織的情況下，以其尾部為突破口，并尋找著力點(diǎn)，快速抽拽出大蠟螟幼蟲(chóng)完整的腸道組織，能夠最大限度保證幼蟲(chóng)腸道的完整性，避免機(jī)械損傷造成腸道內(nèi)容物外泄和體內(nèi)其他組織的污染。與傳統(tǒng)解剖手段相比，整個(gè)解剖過(guò)程只需30-60s，大幅度縮短了解剖時(shí)間，且能減少材料的污染和浪費(fèi)，避免組織的降解，為后續(xù)腸道組織特異性和腸道微生物分析等研究提供了良好的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)材料。

技術(shù)特征：

1.一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，其特征在于：所述方法步驟為：一、將待解剖的大蠟螟幼蟲(chóng)放入酒精中浸泡，進(jìn)行體表消毒；二、取上述步驟一處理后的一只大蠟螟，頭前尾后，背面向上置于蠟盤(pán)中央，頭尾釘昆蟲(chóng)針；三、在尾端背面做橫向小切口，沿背中線剪到頭端；四、打開(kāi)體壁并用昆蟲(chóng)針固定；五、往蠟盤(pán)中加入解剖操作液，用鑷子取下整個(gè)消化道，清理脂肪、絲腺、肌肉即可。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，其特征在于：所述步驟一中的消毒方法為：用75％酒精浸泡3min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，其特征在于：所述步驟二中的頭尾釘昆蟲(chóng)中的方法為：蠟盤(pán)用75％的酒精消毒，且在超凈臺(tái)上工作，昆蟲(chóng)針斜向外插。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，其特征在于：所述步驟三中：剪開(kāi)體壁時(shí)剪刀頭上挑不要剪破消化道。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，其特征在于：所述步驟五中，解剖操作液為昆蟲(chóng)生理鹽水或ph7.2-ph7.4的1*pbs緩沖液。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種分離大蠟螟幼蟲(chóng)完整腸道的方法，所述方法步驟為：一、將待解剖的大蠟螟幼蟲(chóng)放入酒精中浸泡，進(jìn)行體表消毒；二、取上述步驟一處理后的一只大蠟螟，頭前尾后，背面向上置于蠟盤(pán)中央，頭尾釘昆蟲(chóng)針；三、在尾端背面做橫向小切口，沿背中線剪到頭端；四、打開(kāi)體壁并用昆蟲(chóng)針固定；五、往蠟盤(pán)中加入解剖操作液，用鑷子取下整個(gè)消化道，清理脂肪、絲腺、肌肉即可。本方法在不破壞大蠟螟表皮和其他組織的情況下，以其尾部為突破口，并尋找著力點(diǎn)，快速抽拽出大蠟螟幼蟲(chóng)完整的腸道組織，能夠最大限度保證幼蟲(chóng)腸道的完整性，避免機(jī)械損傷造成腸道內(nèi)容物外泄和體內(nèi)其他組織的污染。大幅度縮短了解剖時(shí)間，且能減少材料的污染和浪費(fèi)，避免組織的降解。

技術(shù)研發(fā)人員：劉洋洋,李燕宏,梁夢(mèng),田洪丹,戴宇超,周紅霞
受保護(hù)的技術(shù)使用者：貴陽(yáng)學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15