專利名稱：囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子的調(diào)節(jié)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(“CFTR”)的調(diào)節(jié)劑、其組合物及其方法。本發(fā)明還涉及使用CFTR調(diào)節(jié)劑治療疾病的方法。
背景技術(shù)：
ATP盒轉(zhuǎn)運體是一族膜轉(zhuǎn)運蛋白，其調(diào)節(jié)范圍廣泛的藥物、可能的毒性藥物和外源性化學(xué)物質(zhì)和陰離子的轉(zhuǎn)運。它們是同源膜蛋白，由于結(jié)合和使用細(xì)胞的三磷腺苷(ATP) 來實現(xiàn)它們的特異性活性。人們發(fā)現(xiàn)，這些轉(zhuǎn)運體中的一些是多藥抗藥性蛋白質(zhì)類(例如 MDRl-P糖蛋白，或多藥抗藥性蛋白MRP1)，保護(hù)惡性癌細(xì)胞免于化療劑的影響。迄今為止， 已經(jīng)鑒定出了 48種這樣的轉(zhuǎn)運體，基于它們的序列同一性和功能分為7族。通常與疾病有關(guān)的ATP盒轉(zhuǎn)運體家族的一個成員是cAMP/ATP-介導(dǎo)的陰離子通道，CFTR。CFTR在多種細(xì)胞類型(包括吸收和分泌上皮細(xì)胞)中表達(dá)，其中它調(diào)節(jié)跨膜的陰離子流通，并調(diào)節(jié)其他離子通道和蛋白質(zhì)的活性。在上皮細(xì)胞中，CFTR的正常功能對于維持包括呼吸和消化組織在內(nèi)的整個身體的電解質(zhì)轉(zhuǎn)運是非常關(guān)鍵的。CFTR是由約1480 個氨基酸構(gòu)成的，這些氨基酸編碼由跨膜區(qū)的串聯(lián)重復(fù)體構(gòu)成的蛋白質(zhì)，每個重復(fù)體包含6 個跨膜螺旋和1個核苷酸結(jié)合區(qū)。2個跨膜區(qū)通過一個具有多個磷酸化位點的大的、極性的、調(diào)節(jié)性(R)-區(qū)相連，所述磷酸化位點調(diào)節(jié)通道活性和細(xì)胞運輸。已經(jīng)鑒定出了編碼CFTR的基因并測定了其序列(參見Gregory，R. J.等人(1990) Nature 347 :382-386 ；Rich, D. P.等人(1990)Nature347:358-362)，Riordan，J. R.等人(1989) Science 245:1066-1073)。這個基因的缺陷引起CFTR突變，導(dǎo)致囊性纖維化 (“CF”)，是人體最常致命的遺傳性疾病。在美國，囊性纖維化影響約2，500分之一的嬰兒。 在一般的美國人口中，高達(dá)1千萬的人攜帶有單獨1份這樣的缺陷基因，但沒有明顯的不良效果。與此不同的是，具有2份與CF有關(guān)的基因的個體會發(fā)生CF的致虛弱和致命作用，包括慢性肺病。在患囊性纖維化的患者中，在呼吸上皮中內(nèi)源性表達(dá)的CFTR突變導(dǎo)致頂膜的陰離子分泌減少，使離子和液體轉(zhuǎn)運失衡。所導(dǎo)致的陰離子轉(zhuǎn)運的減少使得CF患者的肺粘液蓄積增加并伴隨最終導(dǎo)致死亡的微生物感染。除了呼吸性疾病，CF患者典型地具有胃腸方面的問題和胰功能不全，如果不治療的話，會導(dǎo)致死亡。此外，大部分患有囊性纖維化的男性都不能生育，而患囊性纖維化的女性則生育力降低。與2份和CF有關(guān)的基因所帶來的嚴(yán)重后果不同的是，攜帶有一份與CF有關(guān)的基因的個體顯示出對霍亂和腹瀉導(dǎo)致的脫水的抵抗力增強(qiáng)——可能解釋了 CF基因在這個人群中的相對高頻率出現(xiàn)。CF染色體的CFTR基因的序列分析顯示了很多導(dǎo)致疾病的突變(Cutting，G.R.等人(1990)Nature 346 :366-369 ；Dean,Μ.等人(1990) Cell 61 :863 :870 ；和 Kerem，B_S.等人(1989)kience 245 :1073-1080 ；Kerem, B-S 等人(1990) Proc. Natl. Acad. ki. USA 87 8447-8451)。迄今為止，已經(jīng)鑒定出了 1000種以上的引起疾病的CF基因突變(http //www. genet, sickkids. on. ca/cftr/)。最常見的突變是在CFTR氨基酸序列的508位上苯丙氨酸的缺失，一般稱作AF508-CFTR。這種突變在約70%的囊性纖維化病例中都會發(fā)生，與嚴(yán)重的疾病有關(guān)。AF508-CFTR中殘基508的缺失妨礙了初生蛋白正確折疊。這導(dǎo)致該突變蛋白不能退出ER，和通過質(zhì)膜。結(jié)果，膜中存在的通道數(shù)量遠(yuǎn)小于表達(dá)野生型CFTR的細(xì)胞中所觀察到的數(shù)量。除了運輸受損，該突變導(dǎo)致通道門控缺陷。這樣加起來，膜中通道數(shù)量減少和門控缺陷導(dǎo)致通過上皮的陰離子轉(zhuǎn)運減少，導(dǎo)致離子和液體轉(zhuǎn)運出現(xiàn)缺陷(Quinton， P.M. (1990), FASEB J. 4 :2709-2727)。但是，研究已經(jīng)顯示出，盡管比野生型CFTR少，膜中 Δ F508-CFTR 的數(shù)量減少是有用的。(Dolmans 等人(1991)，Nature Lond. 354 :526-528 ； Denning 等人，出處同前；Pasyk 和 Foskett (1995)，J. Cell. Biochem. 270 12347-50)。除了 AF508-CFTR、R117H-CFTR和G551D-CFTR以外，導(dǎo)致運輸、合成和/或通道門控缺陷的其他的引起疾病的CFTR突變可以被向上或向下調(diào)節(jié)，以改變陰離子分泌并改變疾病進(jìn)程和/或嚴(yán)重性。盡管除了陰離子外CFTR還轉(zhuǎn)運多種分子，但是顯然，這種作用(轉(zhuǎn)運陰離子)代表了跨上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運離子和水的重要機(jī)制中的一個要素。其他要素包括上皮Na+通道、 ENaC,Na+/2Cl7K+共轉(zhuǎn)運體、Na+-K+-ATP酶泵和基底外側(cè)膜K+通道，它們負(fù)責(zé)將氯離子吸收到細(xì)胞中。這些要素一起運作，以通過它們在細(xì)胞中的選擇性表達(dá)和定位實現(xiàn)跨上皮細(xì)胞的定向轉(zhuǎn)運。通過存在于頂膜上的ENaC和CFTR與在細(xì)胞的基底外側(cè)表面上表達(dá)的Na+-K+-ATP 酶泵和Cl通道之間的協(xié)調(diào)性活性，發(fā)生了氯離子的吸收。氯離子從腔側(cè)的繼發(fā)性主動轉(zhuǎn)運導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的氯離子蓄積，接著被動地通過Cl—通道離開細(xì)胞，導(dǎo)致矢量轉(zhuǎn)運?；淄鈧?cè)表面上的Na72Cl7K+共轉(zhuǎn)運體、Na+-K+-ATP酶泵和基底外側(cè)膜K+通道和腔側(cè)上的CFTR的排列，通過腔側(cè)上的CFTR來協(xié)調(diào)氯離子的分泌。由于水可能從不自己主動轉(zhuǎn)運，因此它依靠鈉和氯離子的總體流量產(chǎn)生的微小的跨上皮滲透梯度流過上皮。推定因CFTR中的突變導(dǎo)致的碳酸氫鹽轉(zhuǎn)運缺陷導(dǎo)致一些分泌功能缺陷。例如， 0M “Cystic fibrosis-impaired bicarbonatesecretion and mucoviscidosis", Paul M. Quinton, Lancet 2008 ；372 :415_417。與中度CFTR功能障礙相關(guān)的CFTR中的突變還在與CF共有一些疾病表現(xiàn)、但不滿足CF診斷標(biāo)準(zhǔn)的疾病的患者中明顯。它們包括先天性雙側(cè)輸精管缺失、特發(fā)性慢性胰腺炎、慢性支氣管炎和慢性鼻竇炎。認(rèn)為突變體CFTR與修飾基因或環(huán)境因素一起是危險因素的其他疾病包括原發(fā)性硬化性膽管炎、變應(yīng)性支氣管肺曲菌病和哮喘。還顯示吸香煙、缺氧和誘導(dǎo)含氧量低信號的環(huán)境因素?fù)p害CFTR功能并且可以貢獻(xiàn)一些呼吸道疾病的形式，例如慢性支氣管炎?？赡芤蛉毕菪訡FTR功能、但不滿足CF診斷標(biāo)準(zhǔn)的疾病的特征為CFTR-相關(guān)疾病。除了囊性纖維化，調(diào)節(jié)CFTR活性還有益于并非是CFTR突變直接導(dǎo)致的其他疾病， 例如CFTR介導(dǎo)的分泌性疾病和其他蛋白質(zhì)折疊性疾病。CFTR調(diào)節(jié)氯離子和碳酸氫鹽流過許多細(xì)胞上皮，以控制流體運動、蛋白質(zhì)增溶、粘液粘度和酶活性。CFTR中的缺陷可以導(dǎo)致氣道或許多器官包括肝和胰腺中的導(dǎo)管阻塞。增強(qiáng)劑是增強(qiáng)于細(xì)胞膜中存在的CFTR的門控活性的化合物。牽連粘液濃稠、流體調(diào)節(jié)受損、粘液清除受損或?qū)е卵装Y和組織破壞的阻塞導(dǎo)管的任何疾病可以是增強(qiáng)劑的候選者。這些疾病包括但不限于慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、吸煙誘發(fā)的C0PD、慢性支氣管炎、鼻竇炎、便秘、干眼病、斯耶格倫綜合征、胃食管返流病、膽石、直腸脫垂和炎性腸病。COPD的特征在于漸進(jìn)性和非完全可逆性的氣流受限。氣流受限是由于粘液分泌過多、 肺氣腫和細(xì)支氣管炎。突變體或野生型CFTR的活化劑為COPD中常見的粘液分泌過多和粘膜纖毛清除受損提供了潛在的治療。具體地，增加跨CFTR的陰離子的分泌會促進(jìn)流體轉(zhuǎn)運到氣道表面液體中，以水化粘液且優(yōu)化纖周流體粘度。這會導(dǎo)致增強(qiáng)粘膜纖毛清除并減輕與COPD有關(guān)的癥狀。此外，通過預(yù)防因氣道清除改善導(dǎo)致的進(jìn)行性感染和炎癥，CFTR調(diào)節(jié)劑可以預(yù)防或減緩特征在于肺氣腫的氣道實質(zhì)毀壞和減少或逆轉(zhuǎn)粘液細(xì)胞數(shù)量和大小增加，其以氣道疾病中的粘液分泌過多為基礎(chǔ)。干眼病的特征在于淚水產(chǎn)生減少以及淚液膜液體、蛋白質(zhì)和粘蛋白性質(zhì)異常。干眼有很多種原因，其中一些包括年齡、Lasik眼科手術(shù)、 關(guān)節(jié)炎、藥物、化學(xué)/熱灼傷、變態(tài)反應(yīng)和疾病，例如囊性纖維化和斯耶格倫綜合征。通過 CFTR的陰離子分泌增加可以增加由眼周圍的角膜內(nèi)皮細(xì)胞和分泌腺中的流體轉(zhuǎn)運，以增強(qiáng)角膜水合。這有助于減輕與干眼病有關(guān)的癥狀。斯耶格倫綜合征是一種自身免疫性疾病， 其中免疫系統(tǒng)攻擊全身的產(chǎn)生液體的腺體，包括眼、口、皮膚、呼吸組織、肝、陰道和消化道。 癥狀包括眼、口和陰道干燥，以及肺病。該病也與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化病和多肌炎/皮肌炎有關(guān)。蛋白質(zhì)運輸缺陷據(jù)認(rèn)為會導(dǎo)致該疾病，由此限制了治療選擇。CFTR活性的調(diào)節(jié)劑可以使受該疾病影響的各種器官水合并有助于緩解相關(guān)的癥狀。具有囊性纖維化的個體存在腸梗阻反復(fù)發(fā)作和直腸脫垂、膽石、胃食管返流病、GI惡性腫瘤和炎性腸病的高發(fā)病率，顯示CFTR功能可能在預(yù)防這類疾病中起重要作用。如上所述，據(jù)認(rèn)為，AF508-CFTR中殘基508的缺失會妨礙初生蛋白正確折疊， 導(dǎo)致該突變蛋白不能退出ER，并通過質(zhì)膜。結(jié)果，質(zhì)膜中存在的成熟蛋白量不足，上皮組織內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)運顯著減少。事實上，經(jīng)由ER機(jī)制加工CFTR的ER缺陷的這種細(xì)胞現(xiàn)象已經(jīng)顯示出，其不僅是CF疾病的潛在基礎(chǔ)，也是范圍廣泛的其他獨立和遺傳疾病的潛在基礎(chǔ)。導(dǎo)致ER機(jī)制障礙的兩種途徑是，通過喪失與蛋白質(zhì)的ER出口偶合而導(dǎo)致降解，或者是通過這些缺陷/錯誤折疊蛋白質(zhì)的ER蓄積[Aridor M.等人，Nature Med.，5 (7)， pp 745-751(1999) ；Shastry, B. S.等人，Neurochem. International，43，pp 1-7(2003); Rutishauser, J.等人，Swiss Med ffkly, 132, pp 211-222(2002) ；Morello，JP 等人，TIPS, 21，pp. 466-469(2000) ；Bross P.等人，Human Mut.，14，pp. 186-198(1999)]。與第一類 ER障礙有關(guān)的疾病是囊性纖維化(由如上所述的錯誤折疊的AF508-CFTR導(dǎo)致)、遺傳性肺氣腫(由α -抗胰蛋白酶；非Piz變體導(dǎo)致)、遺傳性血色病、凝血-纖溶缺陷，例如蛋白質(zhì)C缺乏癥、1型遺傳性血管性水腫、脂質(zhì)加工缺陷，例如家族性高膽固醇血癥、1型乳糜微粒血癥、無β脂蛋白血癥、溶酶體貯積癥，例如I-細(xì)胞病/假性-赫爾勒綜合癥 (pseudo-Hurler)、粘多糖癥(由溶酶體加工酶導(dǎo)致)、?；舴虿?泰-薩病(由β-氨基己糖苷酶導(dǎo)致)、克-納綜合征(Crigler-Najjar) II型(由UDP-葡糖醛酸-唾液酸-轉(zhuǎn)移酶導(dǎo)致)、多內(nèi)分泌腺病/高胰島素血癥、糖尿病(由胰島素受體導(dǎo)致)、拉倫侏儒癥(由生長激素受體導(dǎo)致)、髓過氧化物酶缺乏癥、原發(fā)性甲狀旁腺功能減退(由前甲狀旁腺激素原導(dǎo)致)，黑素瘤(由酪氨酸酶導(dǎo)致)。與后一類ER障礙有關(guān)的疾病是聚糖病(GlycanosisKDG 1型、遺傳性肺氣腫(由α -抗胰蛋白酶(PiZ變體)導(dǎo)致)、先天性甲狀腺功能亢進(jìn)癥、 成骨不全(由I、II、IV型前膠原導(dǎo)致)、遺傳性低纖維蛋白原血癥(由纖維蛋白原導(dǎo)致)、 ACT缺乏癥(由α 1-抗胰凝乳蛋白酶導(dǎo)致)、尿崩癥(DI)、神經(jīng)生長性DI (由加壓素激素/ V2-受體導(dǎo)致)、腎性DI (由水通道蛋白-II導(dǎo)致)、夏-馬-圖綜合征(由周圍髓磷脂蛋白 22導(dǎo)致)、佩-梅病、神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默病(由β APP和衰老蛋白導(dǎo)致)、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、進(jìn)行性核上性麻痹、皮克病、若干聚谷氨酰胺神經(jīng)性障礙，例如亨廷頓病、I型脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)、脊髓與延髓肌肉萎縮癥、齒狀核紅核蒼白球丘腦下部核萎縮，和肌強(qiáng)直性營養(yǎng)不良，以及海綿狀腦病，例如遺傳性克雅病(由朊病毒蛋白加工缺陷導(dǎo)致)、法布里病(由溶酶體α-半乳糖苷酶A導(dǎo)致)、格-斯-施綜合征(由Prp加工缺陷導(dǎo)致)、不育癥胰腺炎、胰腺功能不全、骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)減少、戈勒姆(Gorham)綜合征、氯化物通道病變、先天性肌強(qiáng)直(湯姆森(Thomson)和貝克爾(Becker)型)、巴特綜合征III 型、登特(Dent)病、過度驚跳癥、癲癇癥、過度驚跳癥、溶酶體貯存病、安格曼(Angelman)綜合征、原發(fā)性纖毛運動障礙(P⑶)、具有左右轉(zhuǎn)位的P⑶(也稱作卡特金納綜合征)、沒有左右轉(zhuǎn)位和纖毛發(fā)育不良的PCD和肝病。CFTR中突變牽連的其他疾病包括因輸精管先天性雙側(cè)缺失(CBAVD)導(dǎo)致的男性不育癥、輕度肺病、特發(fā)性胰腺炎和變應(yīng)性支氣管肺曲菌病(ΑΒΡΑ)。參見“CFTR-opathies disease phenotypesassociated with cystic fibrosis transmembrane regulator genemutations，，，Peader G. Noone 禾口 Michael R. Knowles, Respir. Res. 2001, 2 328-332(引入本文參考)。除了向上調(diào)節(jié)CFTR活性以外，CFTR調(diào)節(jié)劑導(dǎo)致的陰離子分泌減少對于治療分泌性腹瀉可能是有益的，其中由于促分泌性活化的氯離子轉(zhuǎn)運，上皮細(xì)胞的水轉(zhuǎn)運顯著增加。 該機(jī)制包括提高cAMP和刺激CFTR。盡管腹瀉有很多原因，但由氯離子轉(zhuǎn)運過量引起的腹瀉性疾病的主要后果是共同的，包括脫水、酸中毒、發(fā)育受損和死亡。急性和慢性腹瀉代表了世界上很多地區(qū)的主要醫(yī)學(xué)問題。腹瀉是營養(yǎng)不良的重要因素，并且是導(dǎo)致5歲以下兒童死亡的主要原因(每年死亡 5，000, 000 人)。分泌性腹瀉也是獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)和慢性炎性腸病(IBD)患者的一種危險的癥狀。每年都有1600萬從發(fā)達(dá)國家到發(fā)展中國家的旅行者會發(fā)生腹瀉，腹瀉病例的嚴(yán)重性和數(shù)量隨著所旅行的國家和地區(qū)而變化。因此，對人CFTR野生型和突變型的有效和選擇性CFTR增強(qiáng)劑存在需求，這些突變型 CFTR 包括、但不限于 AF508del、G551D、R117H、2789+5G- > A。對CFTR活性調(diào)節(jié)劑及其組合物也存在需求，它們可以用于調(diào)節(jié)哺乳動物細(xì)胞膜中的CFTR活性。對使用這種CFTR活性調(diào)節(jié)劑治療因CFTR中突變導(dǎo)致的疾病的方法存在需求。對調(diào)節(jié)哺乳動物離體細(xì)胞膜中CFTR活性的方法存在需求。發(fā)明_既述現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的組合物用作CFTR活性的調(diào)節(jié)劑。這些化合物具有式(I)
權(quán)利要求
1.式⑴的化合物
2.權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)A是
3.權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)A是
4.權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)A是
5.權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)A是
6.權(quán)利要求2-5任一項的化合物，其中R1是-CF3。
7.權(quán)利要求2-5任一項的化合物，其中R1是-CN。
8.權(quán)利要求2-5任一項的化合物，其中R1是-Cε CCH2N(CH3)2c
9.權(quán)利要求6-8任一項的化合物，其中R2是氫。
10.權(quán)利要求6-8任一項的化合物，其中R2是_CH3。
11.權(quán)利要求6-8任一項的化合物，其中R2是-CF3。
12.權(quán)利要求6-8任一項的化合物，R2是-0H。
13.權(quán)利要求6-8任一項的化合物，其中R2是-CH2OTL
14.權(quán)利要求10-13任一項的化合物，其中R3是氫。
15.權(quán)利要求9-13任一項的化合物，其中R3是_CH3。
16.權(quán)利要求9-13任一項的化合物，其中R3是-0CH3。
17.權(quán)利要求9-13任一項的化合物，其中R3是-CN。
18.化合物，所述化合物選自
19.藥物組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1-18任一項的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或佐劑。
20.權(quán)利要求19的藥物組合物，所述組合物還包含另外的活性劑，所述另外的活性劑選自溶粘蛋白劑、支氣管擴(kuò)張劑、抗生素、抗感染劑、抗炎劑、式(I)化合物以外的CFTR調(diào)節(jié)劑或營養(yǎng)劑。
21.權(quán)利要求20的藥物組合物，其中所述另外的活性劑是式⑴化合物以外的CFTR調(diào)節(jié)劑。
22.治療患者疾病或減輕所述疾病嚴(yán)重性的方法，其中所述疾病選自囊性纖維化、哮喘、吸煙誘發(fā)的C0PD、慢性支氣管炎、鼻竇炎、便秘、胰腺炎、胰腺功能不全、先天性雙側(cè)輸精管缺失(CBAVD)導(dǎo)致的男性不育癥、輕度肺病、特發(fā)性胰腺炎、變應(yīng)性支氣管肺曲菌病 (ABPA)、肝病、遺傳性肺氣腫、遺傳性血色病、凝血-纖溶缺陷，例如蛋白質(zhì)C缺乏癥、1型遺傳性血管性水腫、脂質(zhì)加工缺陷，例如家族性高膽固醇血癥、1型乳糜微粒血癥、無β脂蛋白血癥、溶酶體貯積癥，例如I-細(xì)胞病/假性赫爾勒綜合征、粘多糖癥、桑德霍夫/泰-薩克斯病、克-納綜合征II型、多內(nèi)分泌腺病/高胰島素血癥、糖尿病、拉倫侏儒癥、髓過氧化物酶缺乏癥、原發(fā)性甲狀旁腺功能減退、黑素瘤、聚糖病CDGl型、先天性甲狀腺功能亢進(jìn)癥、成骨不全、遺傳性低纖維蛋白原血癥、ACT缺乏癥、尿崩癥(DI)、神經(jīng)生長性DI、腎性DI、 夏-馬-圖綜合征、佩-梅病、神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默病、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、進(jìn)行性核上性麻痹、皮克病、若干聚谷氨酰胺神經(jīng)性障礙，例如亨廷頓病、I型脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)、脊髓與延髓肌肉萎縮癥、齒狀核紅核蒼白球丘腦下部核萎縮，和肌強(qiáng)直性營養(yǎng)不良，以及海綿狀腦病，例如遺傳性克雅病(由朊病毒蛋白加工缺陷導(dǎo)致)、法布里病、 格-斯-施綜合征、C0PD、干眼病、胰腺功能不全、骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)減少、戈勒姆綜合征、氯化物通道病變、先天性肌強(qiáng)直(湯姆森和貝克爾型)、巴特綜合征III型、登特病、過度驚跳癥、癲癇癥、過度驚跳癥、溶酶體貯存病、安格曼綜合征、原發(fā)性纖毛運動障礙(P⑶)、具有左右轉(zhuǎn)位的PCD(也稱作卡特金納綜合征)、沒有左右轉(zhuǎn)位和纖毛發(fā)育不良的PCD或斯耶格侖病，該方法包括對所述患者給予有效量的權(quán)利要求1-18任一項的化合物的步驟。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述疾病是囊性纖維化。
24.治療患者疾病或減輕所述疾病嚴(yán)重性的方法，其中所述疾病與因編碼CFTR的基因中的突變或環(huán)境因素導(dǎo)致的CFTR功能下降相關(guān)，該方法包括對所述患者給予有效量的權(quán)利要求1-18任一項的化合物的步驟。
25.權(quán)利要求對的方法，其中所述疾病是囊性纖維化、慢性支氣管炎、復(fù)發(fā)性支氣管炎、急性支氣管炎、先天性雙側(cè)輸精管缺失(CBAVD)導(dǎo)致的男性不育癥、子宮和陰道先天性缺失(CAUV)導(dǎo)致的女性不育癥、特發(fā)性慢性胰腺炎(ICP)、特發(fā)性復(fù)發(fā)性胰腺炎、特發(fā)性急性胰腺炎、慢性鼻竇炎、原發(fā)性硬化性膽管炎、變應(yīng)性支氣管肺曲菌病、糖尿病、干眼、便秘、 變應(yīng)性支氣管肺曲菌病(ΑΒΡΑ)、骨疾病和哮喘。
26.治療患者疾病或減輕所述疾病嚴(yán)重性的方法，其中所述疾病與CFTR正常功能相關(guān)，該方法包括對所述患者給予有效量的權(quán)利要求1-18任一項的化合物的步驟。
27.權(quán)利要求沈的方法，其中所述疾病是慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性支氣管炎、復(fù)發(fā)性支氣管炎、急性支氣管炎、鼻竇炎、便秘、慢性胰腺炎、復(fù)發(fā)性胰腺炎和急性胰腺炎、胰腺功能不全、先天性雙側(cè)輸精管缺失(CBAVD)導(dǎo)致的男性不育癥、輕度肺病、特發(fā)性胰腺炎、 肝病、遺傳性肺氣腫、膽石、胃食管返流病、胃腸道惡性腫瘤、炎性腸病、便秘、糖尿病、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥或骨質(zhì)減少。
28.權(quán)利要求沈的方法，其中所述疾病是遺傳性血色病、凝血-纖溶缺陷，例如蛋白質(zhì)C缺乏癥、1型遺傳性血管性水腫、脂質(zhì)加工缺陷，例如家族性高膽固醇血癥、1型乳糜微粒血癥、無β脂蛋白血癥、溶酶體貯積癥，例如I-細(xì)胞病/假性赫爾勒綜合征、粘多糖癥、 桑德霍夫/泰-薩克斯病、克-納綜合征II型、多內(nèi)分泌腺病/高胰島素血癥、糖尿病、拉
29.用于體外或體內(nèi)測定生物樣品中CFTR或其片段活性的試劑盒，所述試劑盒包括(i)包含權(quán)利要求1的式(I)化合物的組合物；( )關(guān)于下列內(nèi)容的說明書a)使該組合物與該生物樣品接觸；b)測定所述CFTR或其片段的活性。
30.權(quán)利要求四的試劑盒，所述試劑盒還包括關(guān)于如下的說明書a)使另外的組合物與該生物樣品接觸；b)測定在所述另外的化合物的存在下所述CFTR或其片段的活性；和c)比較在另外的化合物的存在下CFTR活性與在式⑴組合物的存在下CFTR的密度。
31.調(diào)節(jié)生物樣品中CFTR活性的方法，所述方法包括使所述CFTR接觸權(quán)利要求1_18 任一項的化合物的步驟。
32.式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法
33.權(quán)利要求32的方法，其中式Id的酸與式2c的胺的反應(yīng)在溶劑中、在0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N, N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)和三乙胺的存在下或在溶劑中、在丙基膦酸環(huán)酐(T 3P )和吡啶的存在下進(jìn)行。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述溶劑包括N，N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯或2-甲基四氫呋喃。
35.權(quán)利要求32的方法，其中Ra是氫或TBDMS。
36.權(quán)利要求32的方法，其中Ra是TBDMS。
37.權(quán)利要求32的方法，所述方法還包括脫保護(hù)步驟，以除去甲硅烷基保護(hù)基，此時環(huán)
38.權(quán)利要求32的方法，其中式2c的胺由式加的化合物制備，所述方法包括下列步驟(a)使式加的化合物與式3的胺反應(yīng)，得到式2b的化合物
39.權(quán)利要求38的方法，其中步驟(a)中的式3的胺在原位由胺鹽酸鹽生成。
40.權(quán)利要求38的方法，其中Ra是氫或TBDMS。
41.權(quán)利要求38的方法，其中Ra是TBDMS。
42.權(quán)利要求38的方法，其中步驟(a)在極性非質(zhì)子溶劑中、在叔胺堿的存在下進(jìn)行。
43.權(quán)利要求42的方法，其中步驟(a)在乙腈中、在三乙胺的存在下進(jìn)行。
44.權(quán)利要求38的方法，其中步驟(a)的反應(yīng)溫度是約75°C-約85°C。
45.權(quán)利要求38的方法，其中反應(yīng)時間是約2-約30小時。
46.權(quán)利要求38的方法，其中步驟(b)在極性質(zhì)子溶劑中、在鈀催化劑的存在下進(jìn)行。
47.權(quán)利要求46的方法，其中步驟(b)中的溶劑包括甲醇或乙醇。
48.權(quán)利要求38的方法，其中步驟(b)在極性質(zhì)子溶劑中、在!^e和!^eSO4或Si和AcOH 的存在下進(jìn)行。
49.權(quán)利要求48的方法，其中極性質(zhì)子溶劑是水。
50.式(Ic)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方
51.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(a)中的式3的胺在原位由胺鹽酸鹽生成。
52.權(quán)利要求51的方法，其中Ra是氫或TBDMS。
53.權(quán)利要求52的方法，其中Ra是TBDMS。
54.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(a)在極性非質(zhì)子溶劑中、在叔胺堿的存在下進(jìn)行。
55.權(quán)利要求M的方法，其中步驟(a)在乙腈中、在三乙胺的存在下進(jìn)行。
56.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(a)的反應(yīng)溫度是約75°C-約85°C。
57.權(quán)利要求50的方法，其中反應(yīng)時間是約2-約30小時。
58.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(b)在極性質(zhì)子溶劑中、在鈀催化劑的存在下進(jìn)行。
59.權(quán)利要求58的方法，其中步驟(b)中的溶劑包括甲醇或乙醇。
60.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(b)在極性質(zhì)子溶劑中、在!^e和!^eSO4或Si和AcOH 的存在下進(jìn)行。O2NH2N(c)使式2c的胺與式Id的酸反應(yīng)，得到式(Ic)的化合物
61.權(quán)利要求50的方法，其中所述極性溶劑是水。
62.權(quán)利要求50的方法，其中步驟(c)在溶劑中、在0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N， N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)和三乙胺的存在下或在溶劑中在丙基膦酸環(huán)酐 (T3P )和吡啶的存在下進(jìn)行。
63.權(quán)利要求62的方法，其中步驟(c)中的溶劑包括N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯或2-甲基四氫呋喃。
64.權(quán)利要求62的方法，其中Ra是氫或TBDMS。
65.權(quán)利要求64的方法，其中Ra是TBDMS。
66.權(quán)利要求50的方法，所述方法還包括脫保護(hù)反應(yīng)，此時環(huán)A是
67.化合物，所述化合物為
68.化合物，所述化合物為
69.式(IA)的化合物
70.式⑴的化合物
71.選自如下的化合物
全文摘要
本發(fā)明涉及囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(“CFTR”)的調(diào)節(jié)劑、其組合物及其方法。本發(fā)明還涉及使用CFTR的調(diào)節(jié)劑(I)或其藥學(xué)上可接受的鹽治療疾病的方法其中，環(huán)A選自
文檔編號C07D451/02GK102227424SQ200980147862
公開日2011年10月26日 申請日期2009年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月23日
發(fā)明者A·斯利納, D·赫利, F·范古爾, H·賓奇, L·T·D·范寧, M·M·D·努馬, M·波特費爾德, P·D·J·格魯特紐易斯, U·謝斯, X·楊 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司