一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，包括：S1：中華被毛孢菌絲體多糖的提?。阂灾腥A被毛孢菌絲體為原料，超微粉碎至粒徑為7～11μm的超細粉末，加入至水中，浸泡，再加熱至沸騰，保持微沸，離心，取上清液即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液；S2：濃縮得濃縮液；S3：沉淀：加入乙醇，邊加邊攪拌，靜置，離心，收集沉淀；S4：干燥：冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖。該方法是一種簡便、高效、成本低、多糖得率及含量高，且適合規(guī)?；a(chǎn)的方法。
【專利說明】一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生物領(lǐng)域中的一種菌絲體多糖，具體涉及一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]中華被毛孢發(fā)酵菌絲又稱為蟲草發(fā)酵菌絲Cs-C-QSO或蝙蝠蛾被毛孢菌絲體，為真正冬蟲夏草菌。其菌絲體含有較高含量的多糖，此多糖在保健食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域具有重要的作用，但目前對該蝙蝠蛾中華被毛孢菌絲體中的多糖提取方法存在不足使得多糖的提取率較低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，該方法是一種簡便、高效、成本低、多糖得率及含量高，且適合規(guī)?；a(chǎn)的方法，克服了現(xiàn)有技術(shù)中的一些不足。
[0004]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn):
[0005]一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
[0006]S1:中華被毛孢菌絲體多糖的提取:步驟SI中，中華被毛孢菌絲體多糖的提取的具體方法為:以中華被毛孢菌絲體為原料，超微粉碎為粉末，加入到15-20倍原料重量的水中，常溫浸泡30-60分鐘，再加熱至沸騰，保持微沸60-120分鐘后離心；分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復(fù)再提取I~2次，取每次離心分離后的上清液并合并，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液；
[0007]S2:濃縮:將步驟SI中中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液進行減壓蒸餾，濃縮至液體和原料的比例(質(zhì)量/體積)為4: I~2: I時為止，得到濃縮液；
[0008]S3:沉淀:向步驟S2中所述的濃縮液中緩慢加入乙醇，邊加邊攪拌，所述乙醇加至乙醇含量達到70% -80%時停止，然后室溫靜置12-18小時，離心，棄上清液，收集沉淀；
[0009]S4:干燥:向步驟S3中所述的沉淀中加水溶解，加熱除去乙醇，然后進行冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，得率大于20%。
[0010]進一步優(yōu)選地，步驟SI中，將所述中華被毛孢菌絲體超微粉碎至粒徑為ΙΟμπι的超細粉末。
[0011]進一步優(yōu)選地，步驟SI中，常溫浸泡后再加熱至沸騰，保持微沸90-105分鐘。
[0012]進一步優(yōu)選地,步驟SI中,所述離心的時間為20min。
[0013]進一步地，步驟S2中，將中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液濃縮至液體和原料的比例(質(zhì)量/體積)為2:1時為止。
[0014]進一步地，步驟S3中，所述乙醇為無水乙醇。
[0015]本發(fā)明提供了一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其主要具有的有益效果為:該制備方法通過超微粉碎來破壞細胞壁再經(jīng)過一些列的提取過程，得到的粗多糖得率高，且純多糖的得率超過20% ;該多糖對RAW264.7巨噬細胞株釋放NO有明顯的促進作用；此外，該方法是一種簡便、高效、成本低且適合規(guī)?；a(chǎn)的方法。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]下面根據(jù)附圖對本發(fā)明作進一步詳細說明。
[0017]圖1是本發(fā)明實施例所述的中華被毛孢菌絲體多糖的高效液相色譜圖。

【具體實施方式】
[0018]本發(fā)明實施例所述的一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，下面以具體實驗案例為例來說明【具體實施方式】，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明，此外，本發(fā)明所述的中華被毛孢菌絲體多糖均指蝙蝠蛾中華被毛孢菌絲體多糖。
[0019]實施例1
[0020]中華被毛孢菌絲體多糖的提取:以中華被毛孢菌絲體為原料，通過超微粉碎將顆粒細度粉碎為粒徑10 μ m的超細粉末，通過超微粉碎后，稱取50g超微粉碎后的粉末，再加入100mL蒸餾水，常溫浸泡60分鐘，加熱至沸騰，保持微沸120分鐘，8000g離心20min ；分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復(fù)再提取I次，即在該沉淀中加蒸餾水、常溫浸泡、加熱至沸騰，保持微沸后離心，取上清液，合并兩次離心所得的上清液，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液。
[0021]中華被毛孢菌絲體多糖粗提液的濃縮:將上述的中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮至10mL,得濃縮液。
[0022] 乙醇沉淀:向上述濃縮液中緩慢加入無水乙醇，邊加邊攪拌，至乙醇含量達到70%時，室溫靜置12小時，離心除去乙醇上清液，收集沉淀。
[0023]干燥:沉淀加70mL水溶解，水浴鍋上揮去乙醇，置于_20°C冰箱中凍存12h后放入冷凍干燥機中冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，該多糖為含有微量雜質(zhì)的粗多糖；中華被毛孢菌絲體多糖的得率為20.91%。
[0024]實施例2
[0025]中華被毛孢菌絲體多糖的提取:以中華被毛孢菌絲體為原料，通過超微粉碎將顆粒細度粉碎為粒徑9μπι的超細粉末，稱取50g超微粉碎后的粉末，再加入800mL蒸餾水，常溫浸泡40分鐘，加熱至沸騰，保持微沸100分鐘，SOOOg離心20min ;分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復(fù)再提取I次，即在該沉淀中加蒸餾水、常溫浸泡、加熱至沸騰，保持微沸后離心，取上清液，合并兩次離心所得的上清液，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液。中華被毛孢菌絲體多糖粗提液的濃縮:將上述的中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮至10mL,得濃縮液。乙醇沉淀:向上述濃縮液中緩慢加入無水乙醇，邊加邊攪拌，至乙醇含量達到75%時，室溫靜置15小時，離心除去乙醇上清液，收集沉淀。干燥:沉淀加70mL水溶解，水浴鍋上揮去乙醇，置于_20°C冰箱中凍存12h后放入冷凍干燥機中冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，該多糖為含有微量雜質(zhì)的粗多糖；中華被毛孢菌絲體多糖的得率為20.99%。
[0026]實施例3
[0027]

【權(quán)利要求】
1.一種中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:所述制備方法包括以下步驟: S1:中華被毛孢菌絲體多糖的提取:以中華被毛孢菌絲體為原料，超微粉碎為粒徑在7~11 μ m的超細粉末，加入到15-20倍原料重量的水中，常溫浸泡30-60分鐘，再加熱至沸騰，保持微沸60-120分鐘后離心；分離沉淀和上清液，取沉淀并按上述步驟重復(fù)再提取I~2次，取每次離心分離后的上清液并合并，即為中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液； 52:濃縮:將步驟SI中中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液進行減壓蒸餾，濃縮至液體和原料的比例為4:1~2:1時為止，得到濃縮液； 53:沉淀:向步驟S2中所述的濃縮液中緩慢加入乙醇，邊加邊攪拌，所述乙醇加至乙醇含量達到70% -80%時停止，然后室溫靜置12-18小時，離心，棄上清液，收集沉淀； 54:干燥:向步驟S3中所述的沉淀中加水溶解，加熱除去乙醇，然后進行冷凍干燥，即得中華被毛孢菌絲體多糖，得率大于20%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:步驟SI中，將所述中華被毛孢菌絲體超微粉碎至粒徑為10 μ m的超細粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:步驟SI中，常溫浸泡后再加熱至沸騰，保持微沸90-105分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:步驟SI中，所述離心的時間為 20min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:步驟S2中，將中華被毛孢菌絲體多糖的粗提液濃縮至液體和原料的比例為2: I時為止。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中華被毛孢菌絲體多糖的制備方法，其特征在于:步驟S3中，所述乙醇為無水乙醇。
【文檔編號】C08B37/00GK104177506SQ201410341978
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年7月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月18日
【發(fā)明者】龐小博, 史先敏 申請人:上海天嵩生物科技有限公司