本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)基，尤其涉及一種用于ecn培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、益生菌是對人體健康有益的活性微生物，通過調(diào)節(jié)腸道菌群平衡起作用。它們與有害微生物競爭，抑制其生長，有助于維持腸道微生物平衡，對防止腸道問題和維持整體健康至關(guān)重要。益生菌可促進(jìn)腸道蠕動，增加糞便水分含量，軟化糞便，緩解便秘；激活免疫細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體對病原微生物的免疫力；合成維生素和促進(jìn)礦物質(zhì)吸收，有助于維持身體正常功能。此外，益生菌還可減輕腸道和全身性炎癥反應(yīng)，降低膽固醇水平，減少心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)。保證足量的活菌數(shù)是益生菌產(chǎn)品發(fā)揮有效性的關(guān)鍵。

2、大腸桿菌是寄居在人體大腸中的一類普通的原核生物,因其能夠方便的易于培養(yǎng)和傳代且生長速度快，營養(yǎng)需求簡單等優(yōu)勢,并具備完善的基因組序列信息和清晰的遺傳學(xué)背景，目前被廣泛的基因工程、生物能源、微生物工業(yè)等研究中。因此，獲得高生物量和高活性的大腸桿菌是很多科研工作者們研究的一大熱點(diǎn)。

3、培養(yǎng)基是提供微生物生長繁殖和生物合成各種代謝產(chǎn)物所需要的、按一定比例配制的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基組成對菌體生長繁殖、產(chǎn)物的生物合成、產(chǎn)品的分離精制乃至產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量都有重要的影響。選擇合適的培養(yǎng)基，使之既能滿足微生物生長的需要，又能獲得高產(chǎn)的產(chǎn)品，同時(shí)也要符合節(jié)約、因地制宜的原則。

4、現(xiàn)有技術(shù)中，常使用lb(luria?broth)、sob(super?optimal?broth)、soc(superoptimalbrothwith?catabolite?repression)、tb(terrific?broth)等培養(yǎng)基用于大腸桿菌的擴(kuò)增培養(yǎng)，具有培養(yǎng)時(shí)間長、活菌濃度低等缺點(diǎn)。因此，開發(fā)新型培養(yǎng)基提高ecn的活性和存活率具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種用于ecn培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法，解決了常用大腸桿菌培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間長、活菌濃度低的問題。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供了一種用于ecn培養(yǎng)的培養(yǎng)基，包括以下濃度的組分：17～19g/l胰蛋白胨，15～17g/l酵母提取物，8～10g/lnacl，1.8～2.2g/l碳源，1～5g/l金屬離子，0.8～1.2g/l氨基酸，0.8～1.2％椰子水，余量為水。

4、優(yōu)選的，所述碳源為葡萄糖。

5、優(yōu)選的，所述金屬離子為mg2+。

6、優(yōu)選的，所述氨基酸為脯氨酸。

7、優(yōu)選的，所述培養(yǎng)基包括以下濃度的組分：18g/l胰蛋白胨，16g/l酵母提取物，9g/lnacl，2g/l葡萄糖，1g/lmg2+，1g/l脯氨酸，1％椰子水，余量為去離子水。

8、優(yōu)選的，所述培養(yǎng)基的ph值為7.0～7.5。

9、本發(fā)明還提供了所述的培養(yǎng)基在提高大腸桿菌的活性和存活率中的應(yīng)用。

10、本發(fā)明還提供了所述的培養(yǎng)基在提高大腸桿菌的活性和存活率中的應(yīng)用。

11、本發(fā)明還提供了所述培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

12、s1.將胰蛋白胨、酵母提取物、nacl和碳源與水混合，攪拌，然后在110～120℃滅菌18～22min，得到溶液1；

13、s2.將金屬離子、氨基酸加入去離子水中，攪拌，用濾膜過濾除菌，得到溶液2；

14、s3.將溶液1和溶液2混合，即得。

15、優(yōu)選的，溶液1在滅菌之前，調(diào)節(jié)ph值。

16、優(yōu)選的，所述濾膜的孔徑為0.22μm。

17、通過采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明具有如下有益效果：本發(fā)明用于ecn培養(yǎng)的培養(yǎng)基以下濃度的組分：17～19g/l胰蛋白胨，15～17g/l酵母提取物，8～10g/l?nacl，1.8～2.2g/l碳源，1～5g/l金屬離子，0.8～1.2g/l氨基酸，0.8～1.2％椰子水，余量為水。本發(fā)明培養(yǎng)基原料來源廣泛，成本低，培養(yǎng)周期短，容易獲得理想的高濃度大腸桿菌菌液，適合大范圍推廣應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.一種用于ecn培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下濃度的組分：17～19g/l胰蛋白胨，15～17g/l酵母提取物，8～10g/lnacl，1.8～2.2g/l碳源，1～5g/l金屬離子，0.8～1.2g/l氨基酸，0.8～1.2％椰子水，余量為水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述碳源為葡萄糖。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述金屬離子為mg2+。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述氨基酸為脯氨酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下濃度的組分：18g/l胰蛋白胨，16g/l酵母提取物，9g/lnacl，2g/l葡萄糖，1g/lmg2+，1g/l脯氨酸，1％椰子水，余量為去離子水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基的ph值為7.0～7.5。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基在提高大腸桿菌的活性和存活率中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1或2所述培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，溶液1在滅菌之前，調(diào)節(jié)ph值。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述濾膜的孔徑為0.22μm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種用于EcN培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法，屬于微生物培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明用于EcN培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括以下濃度的組分：17～19g/L胰蛋白胨，15～17g/L酵母提取物，8～10g/LNaCl，1.8～2.2g/L碳源，1～5g/L金屬離子，0.8～1.2g/L氨基酸，0.8～1.2％椰子水，余量為水。本發(fā)明培養(yǎng)基原料來源廣泛，成本低，培養(yǎng)周期短，容易獲得理想的高濃度大腸桿菌菌液，適合大范圍推廣應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：趙凌云,劉洪偉,張陽,孟繁婧,賀佳諾
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河北省科學(xué)院生物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15