本發(fā)明涉及醫(yī)藥，具體涉及一種濕地蒿中的倍半萜化合物及制備方法和用途。

背景技術：

1、白癜風是一種獲得性慢性皮膚色素沉著障礙，影響全球1-4％的人口，包括成人和兒童。它的特點是皮膚和頭發(fā)中的黑色素細胞被選擇性破壞，主要表現(xiàn)為皮膚色素沉著的損害擴大。雖然確切的發(fā)病機制尚不清楚，但潛在的原因包括遺傳、免疫、氧化應激、炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生等。根據(jù)黑素形成的調(diào)控網(wǎng)絡，上調(diào)微體相關轉(zhuǎn)錄因子(mitf)的酪氨酸(tyr)、酪氨酸酶相關蛋白1(trp-1)和酪氨酸酶相關蛋白2(trp-2)基因的活性，最終促進黑素形成。倍半萜是高等植物中存在的次級代謝產(chǎn)物，是指分子中含有15個碳原子的天然萜類化合物，由三個異戊烯基單元組成。據(jù)報道，倍半萜類化合物具有抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗氧化、驅(qū)蟲等生物活性。濕地蒿(artemisia?tournefortiana?reichb.)為菊科蒿屬一年生草本植物，在我國主要分布于新疆和西藏等地。新疆野生濕地蒿資源豐富，具有芳香氣味，莖葉可提取芳香油。在新疆，濕地蒿是民間草藥，具有清熱、解毒、消炎和止血的功效。本發(fā)明旨在對濕地蒿中的倍半萜類化合物進行深入挖掘，并對抗白癜風作用進行研究，從而得到藥物先導化合物甚至藥物本身，進而為抗白癜風藥物的研發(fā)提供參考。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明目的在于，提供一種濕地蒿中的倍半萜化合物及制備方法和用途，所述倍半萜是從濕地蒿(artemisia?tournefortiana?reichb.)的地上部分中采用薄層層析法和分析型高效液相色譜法檢測分析，用有機溶劑提取，然后通過溶劑萃取法、硅膠柱層析、快速制備純化儀和半制備高效液相色譜進行分離，得到倍半萜單體化合物，通過高分辨質(zhì)譜、核磁共振波譜、單晶x-射線衍射等方法確定該單體為新的倍半萜類化合物。另外利用小鼠黑色素瘤b16f10細胞對這兩個化合物進行體外抗白癜風活性檢測和作用機制研究，結果表明：所述倍半萜化合物對促進酪氨酸酶活性和黑色素含量具有顯著效果，并且通過劑量依賴的方式促進tyr蛋白的表達從而發(fā)揮促進黑色素生成作用，可用于制備抗白癜風藥物。

2、本發(fā)明所述的一種濕地蒿中的倍半萜化合物，該化合物的結構式為：

3、

4、其中：化合物式(ⅰ)名稱為：濕地蒿內(nèi)酯n。

5、所述一種濕地蒿中的倍半萜化合物的制備方法，按下列步驟進行：

6、a、取濕地蒿干燥地上部分為原料，粉碎后用2-5倍量體積濃度為70-99％的乙醇水溶液進行室溫下的滲漉、冷浸提取3-5次，合并提取液，濃縮得到濕地蒿的粗提物；

7、b、將步驟a得到的粗提物，用水分散，依次加入與水相比體積比為1:1-1:2的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯分別萃取3-5次，將二氯甲烷萃取物濃縮，得到二氯甲烷萃取物浸膏；

8、c、將步驟b得到的二氯甲烷萃取物浸膏采用常壓硅膠柱層析，用體積比為100:0-0:100的石油醚-乙酸乙酯為流動相進行梯度洗脫，收集石油醚:乙酸乙酯3:1的洗脫液，濃縮后得到化合物(ⅰ)的組分fr.e；將組分fr.e采用硅膠柱層析，用體積比為100:0-0:100的二氯甲烷-乙酸乙酯為流動相進行梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮得到11個組分fr.e1-fr.e11；將組分fr.e3、fr.e4和fr.e5合并后，得到組分fr.ea；將fr.ea采用快速制備純化儀，濃度為5-80％甲醇水溶液，進行梯度洗脫，得到10個組分fr.ea-1-fr.ea-10；將組分fr.ea-6用半制備液相色譜分離，以濃度為10-99％的乙腈-水溶液或以濃度為20-99％的甲醇-水溶液梯度洗脫得到化合物式(ⅰ)化合物為濕地蒿內(nèi)酯n。

9、所述濕地蒿中的倍半萜化合物在制備抗白癜風藥物中的用途。

10、本發(fā)明所述一種濕地蒿中的倍半萜化合物及制備方法和用途，對所述化合物進行抗白癜風機制研究表明，濕地蒿內(nèi)酯n對促進酪氨酸酶活性和黑色素含量具有較好的濃度依賴性，通過劑量依賴的方式促進tyr蛋白的表達從而發(fā)揮促進黑色素生成作用，結果表明：濕地蒿內(nèi)酯n具有促進小鼠黑色素瘤b16f10細胞中黑色素生成作用。

11、本發(fā)明所述的一種濕地蒿中的倍半萜化合物及制備方法和用途，采用高分辨質(zhì)譜、一維和二維核磁共振譜、單晶x-射線衍射方法確定其結構，結構鑒定過程如下：

12、化合物式(ⅰ)：無色透明晶體；hresims[m+h]+265.1435m/z(計算值265.1434m/z，c15h21o4+)；[α]2d5+37.540(c?1.270,meoh)；1h和13c?nmr歸屬見表1；單晶x-射線衍射結果見圖3(ccdc?235611)。

13、表1化合物式(ⅰ)的1h和13c?nmr數(shù)據(jù)(1h-600mhz，13c-150mhz，cd3od)

14、

15、

16、注：s為單峰；d為雙重峰；dd為雙二重峰；m為多重峰；j為耦合常數(shù)。

技術特征：

1.一種濕地蒿中的倍半萜化合物，其特征在于該化合物的結構式為：

2.根據(jù)權利要求1所述的一種濕地蒿中的倍半萜化合物的制備方法，其特征在于按下列步驟進行：

3.根據(jù)權利要求1所述的濕地蒿中的倍半萜在制備抗白癜風藥物中的用途。

技術總結
本發(fā)明涉及一種濕地蒿中的倍半萜化合物及制備方法和用途，該方法以濕地蒿（Artemisia?tournefortiana?Reichb.）的干燥地上部分為原料，利用有機溶劑提取得到總提取物，提取物用石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯萃取，取二氯甲烷萃取物通過硅膠柱層析、快速制備純化儀、半制備高效液相色譜分離，從中分離得到一種新的倍半萜類化合物濕地蒿內(nèi)酯N。通過高分辨質(zhì)譜、核磁共振波譜、單晶X?射線衍射等方法對其結構進行鑒定。對濕地蒿內(nèi)酯N抗白癜風作用研究表明，濕地蒿內(nèi)酯N通過劑量依賴的方式促進酪氨酸酶蛋白的表達從而發(fā)揮促進黑色素生成作用。該研究結果表明：濕地蒿中的倍半萜類化合物濕地蒿內(nèi)酯N具有促進黑色素生成作用，可用于治療白癜風藥物的開發(fā)。

技術研發(fā)人員：趙江瑜,古孜麗阿依·庫爾班,阿不拉江·圖拉克,臧登,夏依旦·阿布力米提,阿吉艾克拜爾·艾薩
受保護的技術使用者：中國科學院新疆理化技術研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/15