本發(fā)明涉及獸用生物制品，具體涉及一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、st細(xì)胞(豬睪丸細(xì)胞)廣泛適用于豬傳染性胃腸炎病毒和豬偽狂犬病毒等病毒的增殖，是豬細(xì)小病毒的理想宿主。許多疫苗生產(chǎn)用宿主細(xì)胞都實(shí)現(xiàn)了大規(guī)模、無血清懸浮培養(yǎng)。采用懸浮培養(yǎng)st細(xì)胞，可縮短疫苗生產(chǎn)周期，降低企業(yè)生產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)，提高生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量；無血清懸浮培養(yǎng)細(xì)胞不僅降低了血清生產(chǎn)成本、能大量地提高細(xì)胞數(shù)量，也可保證疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。

2、豬細(xì)小病毒(ppv)屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬，為單股正鏈dna病毒，是使妊娠母豬感染母豬細(xì)小病毒的病原體。其主要特征是引起初產(chǎn)母豬發(fā)生流產(chǎn)，不孕、畸形胎、木乃伊胎及新生仔豬的死亡等。目前該病流行在我國(guó)絕大多數(shù)省市，并逐漸蔓延至更多的省市，給我國(guó)的養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來不可估量的災(zāi)難。

3、為此，本發(fā)明旨在提供一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，以解決上述問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了解決上述問題，提供一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，將貼壁培養(yǎng)的st細(xì)胞通過降血清適應(yīng)法，搖瓶-搖床體系馴化為st-xf細(xì)胞。st-xf細(xì)胞保持了對(duì)豬細(xì)小病毒的敏感性，可以提高病毒滴度，改進(jìn)生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本。

2、為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供了一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，所述st細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的方法為：

4、s1、通過低血清培養(yǎng)基馴化貼壁細(xì)胞；

5、s2、通過搖瓶-搖床體系用無血清培養(yǎng)基進(jìn)行懸浮馴化；

6、s3、將搖瓶-搖床體系馴化的st-xf懸浮細(xì)胞在攪拌式生物反應(yīng)器中擴(kuò)大培養(yǎng)，得到st-xf懸浮細(xì)胞。

7、st-xf懸浮細(xì)胞用于培養(yǎng)豬細(xì)小病毒。

8、st-xf懸浮細(xì)胞培養(yǎng)豬細(xì)小病毒的方法為：

9、s1、用無血清st懸浮細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)st-xf懸浮細(xì)胞在搖瓶中進(jìn)行復(fù)蘇，以0.75～1.5×106cells/ml接種密度接種至生物反應(yīng)器中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；

10、s2、當(dāng)st-xf懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)至3-5×106cells/ml時(shí)，用st懸浮細(xì)胞培養(yǎng)基將細(xì)胞密度調(diào)整為2×106cells/ml，接種豬細(xì)小病毒，培養(yǎng)48-72小時(shí)，得到豬細(xì)小病毒液。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本方案的有益效果：

12、本發(fā)明通過將貼壁培養(yǎng)的st細(xì)胞通過降血清適應(yīng)法，搖瓶-搖床體系馴化為st-xf細(xì)胞，使st-xf細(xì)胞保持了對(duì)豬細(xì)小病毒的敏感性，可以提高病毒滴度，改進(jìn)生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本。

技術(shù)特征：

1.一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，其特征是：所述st細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的方法為：

2.如權(quán)利要求1所述的一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，其特征是：所述st-xf懸浮細(xì)胞用于培養(yǎng)豬細(xì)小病毒。

3.如權(quán)利要求2所述的一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的st細(xì)胞及應(yīng)用，其特征是：所述st-xf懸浮細(xì)胞培養(yǎng)豬細(xì)小病毒的方法為：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一株適應(yīng)無血清培養(yǎng)基全懸浮培養(yǎng)的ST細(xì)胞及應(yīng)用，涉及獸用生物制品技術(shù)領(lǐng)域，其技術(shù)要點(diǎn)為：本發(fā)明公開了一株能夠適應(yīng)無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)的ST細(xì)胞，命名為ST?XF細(xì)胞；本發(fā)明將貼壁培養(yǎng)的ST細(xì)胞通過降血清適應(yīng)法，搖瓶?搖床體系馴化為ST?XF細(xì)胞；ST?XF細(xì)胞保持了對(duì)豬細(xì)小病毒的敏感性，可以提高病毒滴度，改進(jìn)生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本。

技術(shù)研發(fā)人員：林鷙,何錫忠,彭麗英,夏葉,李本強(qiáng)
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15