本發(fā)明涉及生物化工,具體為一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法。
背景技術(shù):
1、l-酪氨酸屬于芳香族氨基酸,可以用來(lái)制備多肽類激素、抗生素、l-多巴等藥物,常作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑單獨(dú)使用或與其他氨基酸形成寡肽使用,醫(yī)藥上用于治療甲狀腺功能亢進(jìn)的藥物,也作飲料添加劑和動(dòng)物飼料添加劑,國(guó)內(nèi)外l-酪氨酸的制備方法主要有提取法、酶轉(zhuǎn)化法、直接發(fā)酵法、有機(jī)合成法。酶轉(zhuǎn)化法以丙酮酸、苯酚、氨水和酪氨酸酚分解酶進(jìn)行轉(zhuǎn)化,該法步驟簡(jiǎn)單污染少,具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景。
2、針對(duì)酶轉(zhuǎn)化法的l-酪氨酸提取工藝各不相同,目前主要分酸溶堿析和堿溶酸析兩種技術(shù)路線,所用的酸有鹽酸、硫酸、醋酸等,堿有氫氧化鈉、氨水、碳酸氫銨等,cn114560783a中使用堿溶陶瓷膜過(guò)濾酸析,雖然收率較高,但透光率較低。cn111018731a采用兩次精制提取l-酪氨酸,但收率較低且生產(chǎn)成本較高無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。因此,本發(fā)明提出一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法以解決上述問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供了一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,解決了上述背景技術(shù)提到的問(wèn)題。
2、為實(shí)現(xiàn)以上目的,本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,包括以下步驟:
3、步驟一、轉(zhuǎn)化液洗滌,制得含蛋白的l-酪氨酸粗品;
4、步驟二、向l-酪氨酸粗品中加入稀鹽酸,并升溫?cái)嚢柚疗渫耆芙猓?/p>
5、步驟三、加入活性炭與硅藻土的混合物,混勻后進(jìn)行一次過(guò)濾,再向?yàn)V液中加入活性炭保溫脫色后,進(jìn)行二次過(guò)濾;
6、步驟四、向?yàn)V液中滴加稀氨水進(jìn)行結(jié)晶,直至濾液的ph值為5-6;
7、步驟五、將析晶母液降溫至20-30℃后離心,再采用純化水洗滌,然后置于干燥箱中烘干,即得精品l-酪氨酸。
8、優(yōu)選的,所述步驟一中,轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸含量為20-80g/l,蛋白含量為2-20g/l,洗滌用純化水的量為轉(zhuǎn)化液體積的0.1-0.5倍。
9、優(yōu)選的,所述步驟二中,稀鹽酸的質(zhì)量濃度為1-8%,所述稀鹽酸加入量為l-酪氨酸粗品的2-6倍質(zhì)量體積,所述溶解溫度為50-65℃。
10、優(yōu)選的,所述步驟三中,活性炭與硅藻土的質(zhì)量比為2:1-1:2,活性炭與硅藻土混合物加入量為l-酪氨酸粗品的0.02-0.04倍質(zhì)量體積,所述活性炭加入量為l-酪氨酸粗品的0.01-0.03倍質(zhì)量體積,所述保溫脫色溫度為50-65℃,所述脫色時(shí)間為0.5-2h。
11、優(yōu)選的,所述步驟三中,一次過(guò)濾采用砂芯過(guò)濾器,二次過(guò)濾依次經(jīng)砂芯過(guò)濾器和精密過(guò)濾器過(guò)濾,所述精密過(guò)濾器規(guī)格為0.22μm。
12、優(yōu)選的,所述步驟四中,稀氨水的滴加完成時(shí)間為3-4h;所述稀氨水的質(zhì)量濃度為3-6%,析晶溫度50-65℃,所述稀氨水加入量為l-酪氨酸粗品的1.0-1.5倍質(zhì)量體積。
13、優(yōu)選的,所述步驟五中,離心轉(zhuǎn)速500-2000rpm,所述淋洗純化水用量為l-酪氨酸粗品的1-3倍質(zhì)量體積。
14、優(yōu)選的,所述步驟五中,烘干溫度為50-75℃,烘干時(shí)間為8-12h。
15、本發(fā)明提供了一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法。與現(xiàn)有技術(shù)相比,具備以下有益效果:本發(fā)明采用純化水洗滌l-酪氨酸粗品濾餅,洗去粗品中殘留的苯酚、丙酮酸、可溶性蛋白,苯酚殘留會(huì)氧化變紅,降低產(chǎn)品透過(guò)率,洗滌濾餅可以簡(jiǎn)化提取工藝;
16、通過(guò)加入活性炭硅藻土混合物吸附蛋白后再次加入活性炭吸附脫色,兩種分開(kāi)吸附效果優(yōu)于混合吸附;
17、通過(guò)采用稀氨水和控制氨水流加速度有利于獲得形狀規(guī)則、粒徑大的晶體,后續(xù)洗滌用水量少,甩料烘干省時(shí);用純化水邊甩料邊沖洗,效率較高。
1.一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟一中,轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸含量為20-80g/l,蛋白含量為2-20g/l,洗滌用純化水的量為轉(zhuǎn)化液體積的0.1-0.5倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟二中,稀鹽酸的質(zhì)量濃度為1-8%,所述稀鹽酸加入量為l-酪氨酸粗品的2-6倍質(zhì)量體積,所述溶解溫度為50-65℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟三中,活性炭與硅藻土的質(zhì)量比為2:1-1:2,活性炭與硅藻土混合物加入量為l-酪氨酸粗品的0.02-0.04倍質(zhì)量體積,所述活性炭加入量為l-酪氨酸粗品的0.01-0.03倍質(zhì)量體積,所述保溫脫色溫度為50-65℃,所述脫色時(shí)間為0.5-2h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟三中,一次過(guò)濾采用砂芯過(guò)濾器,二次過(guò)濾依次經(jīng)砂芯過(guò)濾器和精密過(guò)濾器過(guò)濾,所述精密過(guò)濾器規(guī)格為0.22μm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟四中,稀氨水的滴加完成時(shí)間為3-4h;所述稀氨水的質(zhì)量濃度為3-6%,析晶溫度50-65℃,所述稀氨水加入量為l-酪氨酸粗品的1.0-1.5倍質(zhì)量體積。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟五中,離心轉(zhuǎn)速500-2000rpm,所述淋洗純化水用量為l-酪氨酸粗品的1-3倍質(zhì)量體積。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一步法提取轉(zhuǎn)化液中l(wèi)-酪氨酸的方法,其特征在于:所述步驟五中,烘干溫度為50-75℃,烘干時(shí)間為8-12h。