疫苗的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明基于微生物可以被修飾從而表達(dá)在引起或產(chǎn)生宿主免疫應(yīng)答方面重要的某些因子的發(fā)現(xiàn)。尤其是,本發(fā)明提供被修飾的微生物，當(dāng)經(jīng)受將預(yù)期要抑制或降低某些因子的表達(dá)、功能和/或活性的條件時(shí),所述微生物呈現(xiàn)那些因子的增加的(經(jīng)常是顯著增加的)表達(dá)、功能和/或活性。本發(fā)明提供被修飾的微生物，所述被修飾的微生物能夠在相同微生物的野生型(或未修飾的)株呈現(xiàn)至少一種因子被抑制的表達(dá)的條件下表達(dá)至少一種因子。
【專利說明】疫苗 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明提供用于產(chǎn)生宿主免疫應(yīng)答的被修飾的微生物，以及包含所述被修飾的微 生物的疫苗和疫苗組合物。尤其是，本發(fā)明提供被修飾的鏈球菌（Streptococcus),所述 被修飾的鏈球菌可以形成用于治療和/或預(yù)防疾病的改進(jìn)疫苗的基礎(chǔ)。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 鏈球菌（Str印tococcus)屬的一些種是人和動(dòng)物中很多疾病的病因。在人中， 最經(jīng)常遇到的致病種是肺炎鏈球菌（S.pneumoniae)(肺炎球菌（pneumococcus)),其 引起鼻竇炎（sinusitis)和中耳炎（otitismedia),而且還引起致命病癥，包括肺炎 (pneumonia),胺毒癥（sepsis),骨髓炎（osteomyelitis),心內(nèi)膜炎（endocarditis),胺 毒性關(guān)節(jié)炎（septicarthritis)和腦膜炎（meningitis)等。在人中第二最常遇到的是A群 鏈球菌（Streptococcus) (GAS),化膿鏈球菌（S.pyogenes),其是造成咽炎（pharyngitis), 腎小球性腎炎（glomerulonephritis),急性風(fēng)濕熱（acuterheumaticfever),渥紅熱 (scarletfever)和有時(shí)，壞死性筋膜炎（necrotisingfasciitis)的原因。其它種，諸 如變異鏈球菌（S.mutans)，可以構(gòu)成正常人微生物群落的部分，但在合適的條件下可以造 成疾病風(fēng)險(xiǎn)。
[0004] 由鏈球菌（streptococci)引起的動(dòng)物疾病與在人中的那些相比一樣重要。例如， 豬鏈球菌（S.suis)在豬中引起呼吸道疾病，關(guān)節(jié)感染，皮膚病癥和腦膜炎（meningitis)。 此外，該生物是動(dòng)物傳染的，并且可以因職業(yè)而獲得，導(dǎo)致腦膜炎（meningitis),心內(nèi) 膜炎（endocarditis)和/或敗血癥（septicaemia)。另一種重要的動(dòng)物病原體是馬鏈球 菌（S.equi),其引起馬腺疫（strangles)。在乳品工業(yè)中，泌乳牛中乳腺炎（mastitis) 的一個(gè)主要原因是乳房鏈球菌（S.uberis),同時(shí)停乳鏈球菌停乳亞種（S.dysgalactiae subsp.dysgalactiae)也促進(jìn)此疾病的發(fā)生。同樣，無乳鏈球菌（S.agalactiae)也被認(rèn) 為是乳腺炎（mastitis)的原因，而且也是引起各種數(shù)目的物種（包括魚、水棲哺乳動(dòng)物和 人）中一系列其它疾病的原因。
[0005] 盡管存在針對(duì)一些主要鏈球菌（streptococci)病原體的疫苗，但是很多是不可 靠的，包括弱的、短暫的和/或無效的免疫應(yīng)答。因此，存在針對(duì)鏈球菌（streptococci) 的在人和動(dòng)物宿主中誘發(fā)免疫的新疫苗的需求。
[0006] 發(fā)明概沐
[0007] 本發(fā)明基于微生物可以被修飾從而表達(dá)在引起或產(chǎn)生宿主免疫應(yīng)答方面重要的 某些因子的發(fā)現(xiàn)。尤其是，本發(fā)明提供被修飾的微生物，所述被修飾的微生物當(dāng)經(jīng)歷將預(yù) 期抑制或降低某些因子的表達(dá)、功能和/或活性的條件時(shí)，呈現(xiàn)那些因子的增加的（經(jīng)常 是顯著增加的）表達(dá)、功能和/或活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述因子可以是毒力因子。
[0008] 本發(fā)明提供的被修飾的微生物可以用作用于引起或產(chǎn)生免疫應(yīng)答的藥劑和用作 疫苗或疫苗組合物，以保護(hù)免受多種疾病和/或病癥和/或阻止或降低由一種或多種病原 體導(dǎo)致的宿主建群/感染。
[0009] 在第一個(gè)方面，本發(fā)明提供被修飾的微生物，所述被修飾的微生物能夠在相同微 生物的野生型（或未修飾）株呈現(xiàn)至少一種因子被抑制的表達(dá)的條件下表達(dá)所述至少一種 因子。
[0010] 應(yīng)該理解，在本發(fā)明可以被描述為"包含"一種或多種特征時(shí)，術(shù)語"包含"包括 "基本上由"指出的特征"組成"或"由"指出的特征"組成"的方面和實(shí)施方案。
[0011] 因此，本發(fā)明可以提供被修飾的細(xì)菌，所述被修飾的細(xì)菌能夠在相同細(xì)菌的野生 型（或未修飾）株呈現(xiàn)至少一種因子被抑制的表達(dá)的條件下表達(dá)所述至少一種因子。
[0012] 被修飾的細(xì)菌可以是被修飾的鏈球菌（Streptococcus)種，其中，在相同鏈球 菌（Streptococcus)種的野生型或未修飾形式中禁止或抑制一種因子或多種因子的表達(dá) 的環(huán)境條件下，所述被修飾的鏈球菌（Streptococcus)種表達(dá)所述一種因子或多種因子。 應(yīng)該理解，提及"鏈球菌（Streptococcus)種"不僅包括特定種，豬鏈球菌（S.suis)和馬 鏈球菌（S.equi)，也包括其它種，諸如，例如，化膿鏈球菌（S.pyrogenes)，表皮鏈球菌 (S.epidermidis),肺炎鏈球菌（S.pneumoniae),格氏鏈球菌（S.gordonii)和/或變異鏈 球菌（S.mutans) 〇
[0013] 被修飾的鏈球菌（Streptococcus)種可以是被修飾的豬鏈球菌（Streptococcus suis)或被修飾的馬鏈球菌（Streptococcusequi)，其中，在野生型或未修飾的豬鏈球菌 (S.suis)或馬鏈球菌（S.equi)中禁止或抑制一種因子或多種因子表達(dá)的環(huán)境條件下，所 述被修飾的豬鏈球菌（S.suis)和馬鏈球菌（S.equi)表達(dá)所述一種因子或多種因子。
[0014] 術(shù)語"因子"應(yīng)該被理解為包括由微生物產(chǎn)生的蛋白質(zhì)類化合物（例如蛋白，肽， 氨基酸和/或糖蛋白以及小有機(jī)化合物，脂，核酸和/或碳水化合物。很多這些因子在內(nèi) 部表達(dá)-即在微生物的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；此種因子可以歸類為"內(nèi)部的"或"細(xì)胞質(zhì)的"。術(shù)語"因 子"還可以包括從細(xì)胞分泌和/或作為膜結(jié)合或跨膜因子靶向微生物細(xì)胞壁的微生物因子。 術(shù)語"因子"還可以包含引起或產(chǎn)生宿主免疫應(yīng)答的抗原性或免疫原性化合物。此種因子 可以包括共同被稱為"毒力決定因素/因子"和/或"病原性因子"的那些。技術(shù)人員將理 解，也是毒力決定因素/因子和/或病原性因子的微生物因子，可以包含，例如，促進(jìn)微 生物附著于宿主表面或細(xì)胞和/或宿主細(xì)胞侵入的那些以及參與毒素產(chǎn)生的那些和/或毒 素本身。鑒于上述情況，本文中使用的術(shù)語"因子"可以包含微生物細(xì)胞壁，膜和/或跨 膜結(jié)構(gòu)，諸如介導(dǎo)或促進(jìn)宿主粘著或建群的蛋白或化合物，纖毛和/或分泌的酶，化合物 和/或毒素。術(shù)語"因子"還可以包含參與金屬離子獲取的化合物。
[0015] 技術(shù)人員將理解，在野生型微生物，例如包括鏈球菌（Streptococcus)種（諸如， 例如，豬鏈球菌（S.suis)和/或馬鏈球菌（S.equi))的野生型細(xì)菌中，一種或多種因子 的表達(dá)、功能和/或活性可以直接或間接被一種或多種外源性和/或內(nèi)源性元件調(diào)節(jié)。
[0016] 內(nèi)源性元件可以直接或間接調(diào)節(jié)微生物因子的活性、表達(dá)和/或功能。"內(nèi)源性" 調(diào)控元件可以是調(diào)節(jié)一種或多種微生物因子的功能、表達(dá)和/或活性的微生物元件。相比 之下，"外源性"調(diào)控元件可以包含不由微生物產(chǎn)生或不是微生物的產(chǎn)物，但直接或間接 調(diào)節(jié)由該微生物表達(dá)的因子的表達(dá)、功能和/或活性的元件
[0017] 技術(shù)人員將理解，在一些情況中，本文中描述的類型的外源性和/或內(nèi)源性調(diào)控 元件，用作全局調(diào)控元件。全局調(diào)控元件可以調(diào)節(jié)和/或控制多種微生物因子的表達(dá)、功 能和/或活性。
[0018] 所述外源性調(diào)控元件可以包含環(huán)境元件。技術(shù)人員將理解，環(huán)境調(diào)控元件可以包 含特定營養(yǎng)物，化合物，維生素，代謝物，礦物質(zhì)，離子，電解質(zhì)和/或鹽。另外，或備 選地，環(huán)境調(diào)控元件可以采用物理?xiàng)l件的形式，諸如，例如，特定溫度，氣體比，摩爾滲透 壓濃度（osmolairty)和 / 或pH〇
[0019] 技術(shù)人員將容易理解，一種或多種（外源性）環(huán)境調(diào)控元件的存在和/或缺失可 以直接調(diào)節(jié)一種或多種微生物因子的表達(dá)、功能和/或活性。在其它情況中，一種或多種 環(huán)境調(diào)控元件的存在和/或缺失可以調(diào)節(jié)一種或多種內(nèi)源性微生物調(diào)控元件（例如內(nèi)源性 (微生物）全局調(diào)控元件）的表達(dá)、功能和/或活性，其又影響、一種或多種微生物因子的表 達(dá)、功能和/或活性。
[0020] 本發(fā)明提供的被修飾的微生物可以缺少一種或多種內(nèi)源性調(diào)控/控制元件。在一 個(gè)實(shí)施方案中，所述被修飾的微生物可以缺少一種或多種環(huán)境敏感性或響應(yīng)性調(diào)控/控制 元件。作為這些修飾的后果，本文中描述的被修飾的微生物的特征在于：在將通常（即在野 生型或未修飾株中）禁止或抑制所述因子的表達(dá)、功能和/或活性的環(huán)境中（或條件下）， 一種或多種因子的表達(dá)/功能和/或活性。
[0021] 由本文中描述的被修飾的微生物表達(dá)的因子可以包含這樣的因子，其表達(dá)、功能 和/或活性通常與金屬離子諸如，例如鐵（Fe2+)和/或錳（Mn2+)的存在和/或缺失相關(guān)， 由金屬離子諸如，例如鐵（Fe2+)和/或錳（Mn2+)的存在和/或缺失控制/調(diào)節(jié)，依賴于金 屬離子諸如，例如鐵（Fe2+)和/或錳（Mn2+)的存在和/或缺失，和/或?qū)饘匐x子諸如， 例如鐵（Fe2+)和/或錳（Mn2+)的存在和/或缺失敏感。
[0022] 有利地，并且當(dāng)本發(fā)明涉及例如被修飾的鏈球菌（Streptococcus)時(shí)，此種因子 可以包含一種或多種鏈球菌（Streptococcus)抗原/免疫原（毒力因子），所述抗原和/或 免疫原能夠引起，產(chǎn)生和/或誘導(dǎo)宿主免疫應(yīng)答。
[0023] 因此，本發(fā)明可以涉及鏈球菌（Streptococcus)屬的被修飾的種，所述被修飾的 種在以下條件下表達(dá)至少1種因子，所述條件包含抑制相同生物的野生型或未修飾株中所 述因子的表達(dá)的錳和/或鐵濃度。
[0024] 本發(fā)明提供的被修飾的微生物可以包含一種或多種遺傳修飾，所述一種或多種遺 傳修飾直接和/或間接影響一種或多種微生物調(diào)控元件（包括全局調(diào)控元件）的表達(dá)、活 性和/或功能。影響微生物調(diào)控元件的表達(dá)、功能和/或活性的遺傳修飾，可以包括編碼 所述調(diào)控元件的基因序列中的一個(gè)或多個(gè)突變。相比之下，間接影響微生物調(diào)控元件的表 達(dá)、功能和/或活性的遺傳修飾，可以包括編碼本身影響調(diào)控元件的活性、功能和/或表達(dá) 的因子的其它元件或因子的一種或多種基因的序列中的一個(gè)或多個(gè)突變。
[0025] 遺傳修飾可以包含核酸序列中的一種或多種改變。例如，核酸序列可以通過添 加、缺失、倒位和/或置換序列的一個(gè)或多個(gè)核苷酸而被修飾。技術(shù)人員將理解，遺傳修飾 可以影響包含所述修飾的核酸序列的表達(dá)、功能和/或活性和/或由此編碼的蛋白或肽的 表達(dá)、功能和/或活性。
[0026] 有利地，本發(fā)明提供的被修飾的微生物包含導(dǎo)致核酸序列的（"框內(nèi) (in-frame)"）缺失的遺傳損傷。此外，本發(fā)明的被修飾的微生物可以缺少外源性核酸-例如源自載體（例如質(zhì)粒等）的核酸。因此，當(dāng)與同基因的，野生型親本株比較時(shí)，被修 飾的微生物（例如本發(fā)明的被修飾的鏈球菌（Streptococcus))在除編碼一種或多種調(diào)控 元件的序列的突變或缺失以外，可以是相同的。
[0027] 在白喉棒狀桿菌（Corynebacteriumdiphtheriae)中，很多毒力因子（包括 白喉毒素（由tox基因編碼））由金屬離子激活的全局調(diào)控元件，DtxR(dtxR基因的 產(chǎn)物）調(diào)節(jié)。其它細(xì)菌物種（包括例如其它棒狀桿菌（Corynebacterium)和鏈球菌 (Streptococcus)種），包含全局調(diào)節(jié)子，所述全局調(diào)節(jié)子結(jié)構(gòu)上和/或功能上與白喉棒狀 桿菌（C.diphtheriae)的dtxR/DtxR基因/蛋白同源（和/或（基本上）相同）。
[0028] 不希望受理論限制，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，呈現(xiàn)與白喉棒狀桿菌（Corynebacterium diphtheriae)的dtxR基因和/或DtxR蛋白同源的基因和/或蛋白的被修飾的表達(dá)、功能 和/或活性的微生物（例如屬于鏈球菌（Streptococcus)屬的物種），代表示例性疫苗候 選物。
[0029] 鑒于上述情況，本發(fā)明可以提供被修飾的微生物，所述被修飾的微生物能夠在 相同微生物的野生型（或未修飾）株呈現(xiàn)至少一種因子被抑制的表達(dá)的條件下表達(dá)所述 至少一種因子，其中所述被修飾的微生物缺少（i)功能性dtxR同源物，（ii)功能上相 當(dāng)于dtxR的基因和/或（iii)為"dtxR樣"的基因或蛋白。為了方便起見，上述選項(xiàng) ⑴，（ii)和（iii)將在下文共同被稱為"dtxR同源物"。應(yīng)該理解，本發(fā)明包括的dtxR 同源物（包括為dtxR-樣的基因/蛋白）可以呈現(xiàn)與白喉棒狀桿菌（Corynebacterium diphtheriae)的dtxR基因/蛋白的可變的（可能低的）序列同源性/同一,性，但呈現(xiàn)高程 度的與dtxR的功能同源性/同一性-換句話說，本文中描述的dtxR同源物是金屬調(diào)節(jié) 子（metalo-regulators)，其通過結(jié)合金屬離子，對(duì)基因表達(dá)產(chǎn)生影響。
[0030] 應(yīng)該理解，描述為與白喉棒狀桿菌（C.diphtheriae)的dtxR和/或DtxR基 因/蛋白"功能上同源"的任意基因和/或蛋白，是呈現(xiàn)特征為，或類似于白喉棒狀桿菌 (C.diphtheriae)的dtxR/DtxR基因/蛋白的金屬調(diào)節(jié)子活性的金屬調(diào)節(jié)子活性的基因和 /或蛋白。
[0031] 提供編碼白喉棒狀桿菌（C.diphtheriae)dtxR基因的序列為SEQIDNo:1，如下。
[0032] SEQIDNO： 1
【權(quán)利要求】
1. 一種被修飾的微生物，所述被修飾的微生物能夠在相同微生物的野生型或未修飾株 呈現(xiàn)至少一種因子被抑制的表達(dá)的條件下表達(dá)所述至少一種因子。
2. 權(quán)利要求1所述的被修飾的微生物，其中所述的被修飾的微生物是鏈球菌 (Streptococcus)種。
3. 權(quán)利要求2所述的被修飾的微生物，其中所述鏈球菌種選自由以下組成的 組：豬鏈球菌（S. suis)，馬鏈球菌（S. equi)，化膿鏈球菌（S.pyrogenes)，表皮鏈球 菌（S.epidermidis),肺炎鏈球菌（S. pneumoniae),格氏鏈球菌（S.gordonii),變異 鏈球菌（S. mutans),乳房鏈球菌（S. uberis),海豚鏈球菌（S iniae),無乳鏈球菌 (S agalactiae),肺炎鏈球菌（S. pneumoniae), 口腔鏈球菌（S. oralis),停乳鏈球菌 (S.dysgalactiae)和易變（virdans)群的成員。
4. 任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物包含一種 或多種遺傳修飾，所述一種或多種遺傳修飾直接和/或間接影響一種或多種微生物調(diào)控元 件的表達(dá)、活性和/或功能。
5. 任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物，其中所述一種或多種微生物調(diào)控元件 包含環(huán)境敏感性或響應(yīng)性控制元件。
6. 任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物，其中所述至少一種因子是毒力因子。
7. 任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物呈現(xiàn)一種 或多種毒力因子的增加的表達(dá)。
8. 任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物： (i) 包含被修飾的dtxR/DtxR同源物 (ii) 缺少功能性DtxR同源物； (iii) 缺少功能上相當(dāng)于dtxR的基因；和/或 (iv) 缺少dtxR/DtxR樣的基因或蛋白。
9. 權(quán)利要求8所述的被修飾的微生物，其中dtxR/DtxR同源物、功能上相當(dāng)于dtxR的 基因和/或dtxR/DtxR樣的基因或蛋白相對(duì)于/與SEQ ID N0S :1或2或其片段呈現(xiàn)一定 程度的同源性或同一性。
10. -種鏈球菌屬的被修飾的微生物，所述被修飾的微生物包含被修飾的dtxR/DtxR 同源物，其中所述dtxR/DtxR同源物呈現(xiàn)一定程度的與SEQ ID NOS :1和2公開的序列的 同源性/同一性。
11. 權(quán)利要求9或10任一項(xiàng)所述的被修飾的微生物，其中所述dtxR/DtxR同源物、功 能上相當(dāng)于dtxR的基因和/或dtxR/DtxR樣的基因或蛋白呈現(xiàn)相對(duì)于/與SEQ ID N0S :1 或2的至少65%的同源性或同一性。
12. 權(quán)利要求10或11所述的被修飾的微生物，其中所述微生物是： (i) 缺少功能性scaR基因或產(chǎn)物的豬鏈球菌；或 (ii) scaR和/或ScaR缺陷型豬鏈球菌； 其中（i)和（ii)的豬鏈球菌以不依賴于scaR/ScaR的表達(dá)、功能和/或活性的方式表 達(dá)通常在scaR/ScaR的控制下的因子和/或毒力因子。
13. 權(quán)利要求10或11所述的被修飾的微生物，其中所述微生物是： (i)缺少功能性troR基因的馬鏈球菌；或 (ii) troR和/或TroR缺陷型馬鏈球菌； 其中（i)和（ii)的馬鏈球菌以不依賴于tr〇R/Tr〇R的表達(dá)、功能和/或活性的方式表 達(dá)通常在troR/TroR控制下的因子和/或毒力因子。
14. 權(quán)利要求10或11所述的被修飾的微生物，其中所述微生物選自由以下組成的組： (i) mtsR/MtsR-缺陷型化膿鏈球菌； (ii) 缺少功能性mtsR/MtsR基因和/或產(chǎn)物的化膿鏈球菌； (iii) sirR/SirR-缺陷型表皮鏈球菌； (iv) 缺少功能性sirR/SirR基因和/或產(chǎn)物的表皮鏈球菌； (v) psaR/PsaR_缺陷型肺炎鏈球菌； (vi) 缺少功能性psaR/PsaR基因和/或產(chǎn)物的肺炎鏈球菌； (vii) scaR/ScaR-缺陷型格氏鏈球菌； (viii) 缺少功能性scaR/ScaR基因和/或產(chǎn)物的格氏鏈球菌； (ix) sloR/SloR-缺陷型變異鏈球菌；和 (xi)缺少功能性sloR/SloR基因和/或產(chǎn)物的變異鏈球菌。
15. -種疫苗，所述疫苗包含根據(jù)任一項(xiàng)在前權(quán)利要求所述的被修飾的微生物。
16. -種疫苗，所述疫苗用于治療、預(yù)防和/或控制由鏈球菌種引起和/或促進(jìn)的疾 病，所述疫苗包含根據(jù)權(quán)利要求10-15任一項(xiàng)所述的被修飾的微生物。
17. 權(quán)利要求15所述的疫苗或權(quán)利要求16應(yīng)用的疫苗，其中所述疫苗或應(yīng)用的疫苗 包含滅活的被修飾的微生物和/或滅活的被修飾的鏈球菌。
18. 權(quán)利要求15-17任一項(xiàng)所述的疫苗或應(yīng)用的疫苗，其中所述疫苗或應(yīng)用的疫苗包 含佐劑，藥用載體，賦形劑和/或稀釋劑。
19. 權(quán)利要求15-18任一項(xiàng)所述的疫苗或應(yīng)用的疫苗，其中所述疫苗或應(yīng)用的疫苗包 含選自由以下組成的組的一種或多種另外的組分： (i) 未修飾的細(xì)菌或其組分； (ii) 病毒組分； (iii) 寄生蟲組分；
20. 本發(fā)明的被修飾的微生物，所述被修飾的微生物用于在動(dòng)物中產(chǎn)生免疫應(yīng)答。
21. -種制備本文中描述的任意疫苗的方法，所述方法包括培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求1-14任 一項(xiàng)所述的被修飾的微生物并由此制備疫苗組合物的步驟。
22. 權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物適于允許 在樣品中檢測(cè)。
23. 權(quán)利要求22所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物包含或表達(dá)可檢測(cè) 標(biāo)志物，一種或多種可檢測(cè)因子，編碼可檢測(cè)因子的基因和/或蛋白。
24. 權(quán)利要求20所述的被修飾的微生物，其中所述編碼可檢測(cè)因子的基因包含外源基 因。
25. 權(quán)利要求1-14或22-24任一項(xiàng)所述的被修飾的微生物，其中所述被修飾的微生物 被進(jìn)一步修飾，從而不包含、產(chǎn)生或表達(dá)至少一種可檢測(cè)因子，所述因子包括免疫原性蛋 白和/或形成標(biāo)準(zhǔn)診斷測(cè)定的基礎(chǔ)。
【文檔編號(hào)】A61K39/05GK104507494SQ201380038860
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2013年5月22日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月22日
【發(fā)明者】邁克爾·豐塔涅 申請(qǐng)人:莫登研究院