本發(fā)明涉及基因工程，尤其是一種與緩解生殖損傷相關(guān)的蛋白fdx1及其編碼基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、生殖健康是人類健康的重要組成部分，然而，現(xiàn)代社會中多種環(huán)境污染物的存在對生殖系統(tǒng)造成了顯著影響。十溴二苯醚(bde-209)是一種常見的環(huán)境污染物，已被證明具有生殖損傷效應(yīng)，包括激素水平失調(diào)和生殖功能下降。近年來，研究者們逐漸認識到，顆粒細胞在卵巢功能和生殖激素的分泌中起著至關(guān)重要的作用。顆粒細胞的損傷不僅影響卵泡的發(fā)育和成熟，還可能導(dǎo)致不孕不育等嚴重后果。

2、在此背景下，尋找能夠有效緩解生殖損傷的分子靶點和治療策略顯得尤為重要。鐵氧還蛋白1(fdx1)是一種參與類固醇生成、fe-s簇生物合成和硫辛?；木€粒體基質(zhì)酶，被鑒定為銅離子載體(es)的蛋白靶標。fdx1通過調(diào)節(jié)一價銅離子介導(dǎo)銅死亡在多種疾病中發(fā)揮作用。同時，鐵氧還蛋白1(fdx1)是一種參與細胞內(nèi)電子轉(zhuǎn)移和氧化還原反應(yīng)的關(guān)鍵酶，但是鐵氧還蛋白1(fdx1)在顆粒細胞中的具體作用及其對生殖健康的影響尚未得到充分研究。

3、本發(fā)明旨在通過構(gòu)建fdx1基因的rna干擾(rnai)序列，探索其在顆粒細胞中的表達調(diào)控及其對生殖損傷的作用，為改善生殖健康提供新的思路。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種與緩解生殖損傷相關(guān)的蛋白fdx1及其編碼基因與應(yīng)用。

2、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下。

3、用于緩解生殖損傷的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、用于緩解生殖損傷的重組載體，所述重組載體包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

5、進一步優(yōu)選的，所述重組載體為抑制或降低所述fdx1基因表達量的元件組合、和/或沉默所述fdx1基因表達的元件組合、和/或敲除所述fdx1基因表達的元件組合。

6、用于緩解生殖損傷的表達盒，所述表達盒包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

7、用于緩解生殖損傷的轉(zhuǎn)基因細胞系，所述轉(zhuǎn)基因細胞系包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

8、用于緩解生殖損傷的重組菌，所述重組菌包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

9、用于緩解生殖損傷的核苷酸序列、重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系、重組菌在制備治療和/或緩解哺乳動物生殖系統(tǒng)損傷疾病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

10、進一步優(yōu)選的，所述生殖系統(tǒng)為卵巢。

11、用于緩解生殖損傷的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq?id?no.3或seq?id?no.4所示。

12、用于pcr擴增如seq?id?no.1所示核苷酸序列的引物對，包括正向引物1f、反向引物1r；

13、所述正向引物1f的核苷酸序列如seq?id?no.5所示；

14、所述反向引物1r的核苷酸序列如seq?id?no.6所示。

15、采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：

16、通過轉(zhuǎn)染fdx1基因，顯著調(diào)節(jié)人卵巢顆粒細胞內(nèi)谷胱甘肽(gsh)的水平，增強顆粒細胞對氧化應(yīng)激的抵御能力，減輕bde-209引起的氧化損傷，緩解生殖損傷；

17、fdx1的轉(zhuǎn)染能夠顯著提升顆粒細胞中amh、e2、inhb和prog的分泌，幫助恢復(fù)激素水平的正常狀態(tài)，維持生殖內(nèi)分泌的平衡，緩解生殖損傷；

18、本發(fā)明公開的fdx1慢病毒序列是具有臨床應(yīng)用前景的靶向顆粒細胞功能完整性的前景藥物，這對用于生殖損傷的評價和治療具有重要價值。

技術(shù)特征：

1.用于緩解生殖損傷的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.用于緩解生殖損傷的重組載體，所述重組載體包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

3.如權(quán)利要求2所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體為抑制或降低fdx1基因表達量的元件組合、和/或沉默fdx1基因表達的元件組合、和/或敲除fdx1基因表達的元件組合。

4.用于緩解生殖損傷的表達盒，所述表達盒包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

5.用于緩解生殖損傷的轉(zhuǎn)基因細胞系，所述轉(zhuǎn)基因細胞系包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

6.用于緩解生殖損傷的重組菌，所述重組菌包括權(quán)利要求1所述的核苷酸序列。

7.權(quán)利要求1-6任一項所述的核苷酸序列、重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系、重組菌在制備治療和/或緩解哺乳動物生殖系統(tǒng)損傷疾病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述生殖系統(tǒng)為卵巢。

9.用于緩解生殖損傷的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq?id?no.3或seq?id?no.4所示。

10.用于pcr擴增權(quán)利要求1所述核苷酸序列的引物對，包括正向引物1f、反向引物1r；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種與緩解生殖損傷相關(guān)的蛋白FDX1及其編碼基因與應(yīng)用本發(fā)明提供了用于緩解生殖損傷的核苷酸序列，所述核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。通過轉(zhuǎn)染FDX1基因，顯著提高人卵巢顆粒細胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)的水平，增強顆粒細胞對氧化應(yīng)激的抵御能力，減輕BDE?209引起的氧化損傷，緩解生殖損傷；FDX1的轉(zhuǎn)染能夠顯著調(diào)節(jié)顆粒細胞中AMH、E2、INHB和PROG的分泌，幫助恢復(fù)激素水平的正常狀態(tài)，維持生殖內(nèi)分泌的平衡，緩解生殖損傷；本發(fā)明公開的FDX1慢病毒序列是具有臨床應(yīng)用前景的靶向顆粒細胞功能完整性的前景藥物，這對用于生殖損傷的評價和治療具有重要價值。

技術(shù)研發(fā)人員：張微,高艾,王子延
受保護的技術(shù)使用者：首都醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/7