本發(fā)明屬于微生物學領域，涉及抑制口腔致病菌的益生菌，具體涉及一株植物乳桿菌slh及其對實驗性牙周炎的治療效果評價。

背景技術：

1、牙周炎是最常見的口腔疾病之一，是由牙周致病菌引起的牙周支持組織逐漸喪失的慢性炎癥，不僅引起牙周組織的炎癥，誘導牙槽骨吸收導致牙齒的脫落，嚴重還會影響全身健康。研究顯示，牙周炎與口腔菌群息息相關，這些微生物相互共生、互相制衡，共同維持口腔微生態(tài)的平衡，一旦發(fā)生紊亂，就會引發(fā)牙周炎。其中，具核梭桿菌(fusobacteriumnucleatum)和牙齦卟啉單胞菌(porphyromonas?gingivalis)是重要的牙周致病菌。具核梭桿菌是一種侵襲性革蘭氏陰性厭氧梭桿菌，是牙周炎齦上菌斑、齦下菌斑和牙周袋等感染部位豐度最高的梭桿菌。而牙齦卟啉單胞菌(p.gingivalis)是一種革蘭氏陰性口腔厭氧菌，是慢性牙周炎病變部位最主要的優(yōu)勢菌之一，參與牙周炎的發(fā)病機制，也是目前公認的牙周致病菌。

2、牙周炎的治療主要是為了控制菌斑、消除炎癥，恢復牙周組織功能，阻止疾病的發(fā)展并防止復發(fā)。目前最常用的方法為機械治療和藥物輔助治療，但這兩種治療均存在一定的問題。其中，單純的機械治療不能徹底清除根分叉區(qū)等特殊部位的菌斑，治療后會發(fā)生牙周致病菌的再定植，而且操作困難，因此往往采用藥物治療作為其輔助手段。而藥物治療常采用阿莫西林、頭孢氨芐、甲硝唑等抗生素類藥物消除牙周致病菌；但抗生素類藥物會減少共生細菌的定植，破壞正常的口腔菌群微生態(tài)，并導致細菌耐藥性的日益嚴重。更有甚者，在牙周組織中維持有效的藥物濃度需要大劑量的抗生素全身給藥，這可能導致微生物失衡、耐藥和肝腎毒性的風險。因此，開發(fā)一種安全高效的非侵入性和非抗生素治療的牙周炎治療策略，具有重要的意義。

3、益生菌(probiotic)是一類適量攝入補充后能對宿主身體健康起積極作用的微生物。作為“以菌治菌”的生物療法，益生菌療法安全性已得到廣泛認可。因此，人們對益生菌作為牙周炎的替代輔助治療及預防的研究興趣日益增長。植物乳酸桿菌屬于乳酸桿菌屬，革蘭氏陽性菌，可用于食品，最適生長溫度為30～37攝氏度，兼性厭氧，最適ph＝6.5左右。目前，乳桿菌已經(jīng)被添加到食品或日用品如牛奶、酸奶、含片、口香糖、牙膏、漱口水等產(chǎn)品中。但用于牙周炎治療的植物乳酸桿菌尚未見報道。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術中益生菌用于牙周炎治療的現(xiàn)狀，本發(fā)明提供了一株植物乳桿菌l.plantarum?slh。所述植物乳桿菌對牙周重要致病菌牙齦卟啉單胞菌和具核梭桿菌均具有抑制作用，且能夠耐受較高濃度的溶菌酶，在抑制牙周病致病菌和調(diào)節(jié)免疫反應方面具有重要的應用前景。

2、本發(fā)明的技術方案：

3、一株抑制牙周致病菌的植物乳桿菌，所述植物乳桿菌命名為植物乳桿菌(lactobacillus?plantarum)slh菌株，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為cctccno:m?20242817，保藏日期為2024年12月16日。發(fā)明人從健康嬰兒的糞便樣品中分離、純化，得到益生菌植物乳桿菌slh；并通過抑菌實驗及生物膜清除實驗檢測發(fā)現(xiàn)，所述植物乳桿菌slh對牙周重要致病菌牙齦卟啉單胞菌(p.gingivalis)和具核梭桿菌(f.nucleatum)具備顯著的抑制效果，填補了現(xiàn)有技術中植物乳酸桿菌應用于牙周炎治療的空白，技術效果顯著，應用前景廣闊。

4、一種植物乳桿菌的培養(yǎng)物，所述培養(yǎng)物為將如前所述的植物乳桿菌slh在微生物培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，由此得到的體系；或者由此進一步固液分離獲得的上清液。

5、一種菌劑，包括如前所述的植物乳桿菌slh或者培養(yǎng)物。

6、如前所述的植物乳桿菌slh或培養(yǎng)物在制備預防、緩解或治療牙周致病菌所致口腔疾病的產(chǎn)品中的應用。其中，所述牙周致病菌為牙齦卟啉單胞菌(p.gingivalis)和/或具核梭桿菌(f.nucleatum)；所述口腔疾病為牙周炎；所述產(chǎn)品包括藥物、口腔護理產(chǎn)品、飼料和微生態(tài)制劑。發(fā)明人通過動物模型實驗發(fā)現(xiàn)，所述植物乳桿菌slh能夠增加大鼠的體重，減少牙周探診深度、牙齦出血指數(shù)以及炎癥浸潤程度，micro-ct結果顯示減少了骨吸收的量。這說明，所述植物乳桿菌slh在抑制牙周病致病菌和調(diào)節(jié)免疫反應方面均顯示出良好的效果，能夠用于制備預防、緩解或治療牙周致病菌所致口腔疾病的產(chǎn)品，存在可觀的市場前景和經(jīng)濟價值。

7、優(yōu)選的是，所述產(chǎn)品可以是固體形式、液體形式、半固體形式、凝膠、氣霧形式等。

8、一種藥物組合物，包括如前所述的植物乳桿菌slh或者培養(yǎng)物以及藥學上可接受的載體。

9、優(yōu)選的是，所述藥物組合物采用各種藥學上可接受的劑型，所述劑型為片劑、膠囊、口服液、噴霧、膏劑或凍干粉等。

10、本發(fā)明的有益效果：

11、(1)本申請開創(chuàng)性的提供了一株能夠抑制牙周致病菌的植物乳桿菌slh，填補了現(xiàn)有技術中植物乳酸桿菌應用于牙周炎治療的空白，具備突出的實質(zhì)性特點，實現(xiàn)了顯著的進步。

12、(2)本申請所述的植物乳桿slh不但對牙周重要致病菌(牙齦卟啉單胞菌和具核梭桿菌)具有明顯的抑制作用，而且能夠耐受較高濃度(3mg/ml)的溶菌酶，能夠在口腔環(huán)境中定植和生存。

13、(3)本申請所述的植物乳桿菌slh，還能夠降低炎癥細胞模型中白細胞介素1β、腫瘤壞死因子α和白細胞介素6炎癥因子的表達，說明植物乳桿菌slh可能具有調(diào)節(jié)相關免疫反應，減少炎癥反應對牙周組織的破壞的效果。

技術特征：

1.一株抑制牙周致病菌的植物乳桿菌，其特征在于：所述植物乳桿菌命名為植物乳桿菌(lactobacillus?plantarum)slh菌株，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為cctcc?no:m?20242817，保藏日期為2024年12月16日。

2.一種植物乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)物，其特征在于：所述培養(yǎng)物為將權利要求1所述的植物乳桿菌在微生物培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，由此得到的體系；或者由此進一步固液分離得到的上清液。

3.一種菌劑，其特征在于：包括權利要求1所述的植物乳桿菌或者權利要求2所述的培養(yǎng)物。

4.如權利要求1所述的植物乳桿菌或權利要求2所述的培養(yǎng)物在制備預防、緩解或治療牙周重要致病菌所致口腔疾病的產(chǎn)品中的應用。

5.根據(jù)權利要求4所述的應用，其特征在于：所述牙周重要致病菌為牙齦卟啉單胞菌(porphyromonas?gingivalis)和/或具核梭桿菌(fusobacterium?nucleatum)。

6.根據(jù)權利要求4所述的應用，其特征在于：所述口腔疾病為牙周炎。

7.根據(jù)權利要求4-6中任意一項所述的應用，其特征在于：所述產(chǎn)品包括藥物、口腔護理產(chǎn)品、飼料和微生態(tài)制劑。

8.根據(jù)權利要求4-6中任意一項所述的應用，其特征在于：所述產(chǎn)品采用固體形式、液體形式、半固體形式、凝膠或者氣霧形式。

9.一種藥物組合物，其特征在于：包括權利要求1所述的植物乳桿菌或者權利要求2所述的培養(yǎng)物以及藥學上可接受的載體。

10.根據(jù)權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于：所述藥物組合物采用各種藥學上可接受的劑型，所述劑型為片劑、膠囊、口服液、噴霧、膏劑或凍干粉。

技術總結
本發(fā)明提供了一株植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum?SLH。所述植物乳桿菌命名為植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)SLH菌株，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO:M?20242817，保藏日期為2024年12月16日。所述植物乳桿菌SLH對牙周重要致病菌牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas?gingivalis)和具核梭桿菌(Fusobacterium?nucleatum)具備顯著的抑制效果，填補了現(xiàn)有技術中植物乳酸桿菌應用于牙周炎治療的空白，技術效果顯著，應用前景廣闊。不僅如此，本申請所述的植物乳桿能夠耐受較高濃度的溶菌酶，能夠在口腔環(huán)境中定植和生存。進一步的，通過動物模型實驗證實，所述植物乳桿菌SLH在抑制牙周病致病菌和調(diào)節(jié)免疫反應方面均顯示出良好的效果，能夠用于制備預防、緩解或治療牙周致病菌所致口腔疾病的產(chǎn)品，存在可觀的市場前景和經(jīng)濟價值。

技術研發(fā)人員：洪偉,廖健,舒路紅
受保護的技術使用者：貴州醫(yī)科大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/15