本發(fā)明涉及化學(xué)分析，具體涉及一種可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、脂質(zhì)作為天然材料，具有優(yōu)異的生物相容性和低毒性，使其成為構(gòu)建藥物遞送系統(tǒng)中最常用的藥用輔料。常用的脂質(zhì)輔料包括脂肪酸、甾醇、甘油三酯、植物油和磷脂等。基于這些輔料，構(gòu)建了多種脂質(zhì)基制劑，包括脂質(zhì)基納米載體，以通過提高藥物的溶解性、穩(wěn)定性和跨膜滲透性，促進(jìn)難溶性藥物以及治療性多肽和蛋白質(zhì)的口服遞送。

2、例如，生物藥劑分類系統(tǒng)(biopharmaceutical?classification?system)中的ii類和iv類藥物由于其水溶性差，通常表現(xiàn)出有限的口服生物利用度。然而，通過將這些藥物載入脂質(zhì)載體(如納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln)中，其溶解性可以顯著提高，從而進(jìn)一步改善其口服吸收。此外，脂質(zhì)納米載體還可以改善生物活性大分子化合物(如多肽和蛋白質(zhì))的穩(wěn)定性和口服吸收，這些化合物常因酶穩(wěn)定性差、水解作用以及穿過胃腸道黏膜的滲透性有限而導(dǎo)致口服生物利用度低。

3、脂質(zhì)載體的吸收增強(qiáng)機(jī)制較為復(fù)雜，目前是該研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)話題。通常來說，脂質(zhì)載體在攝入后會經(jīng)歷脂解過程，其機(jī)制與食物中脂質(zhì)的消化過程相同。大部分脂解過程發(fā)生在小腸中，其中可消化脂質(zhì)的主要成分(如甘油三酯)在胰脂酶和輔酶的作用下分解為脂肪酸和單硬脂酸甘油酯。這些脂解產(chǎn)物隨后與膽鹽、膽固醇和磷脂形成高度分散的混合膠束(mm)，這種膠束具有很強(qiáng)的疏水性藥物溶解能力。此外，混合膠束還促進(jìn)藥物向腸道上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)，并通過膜融合或內(nèi)吞作用增強(qiáng)腸上皮細(xì)胞對藥物的攝取，從而提高藥物吸收。此外，尚未被消化的納米或微米級脂質(zhì)載體也被認(rèn)為能夠通過與上皮細(xì)胞膜融合或以完整顆粒形式通過跨細(xì)胞運(yùn)輸增強(qiáng)藥物的吸收。為了闡明這些機(jī)制以及脂質(zhì)載體的體內(nèi)命運(yùn)，全面了解其在胃腸道(git)中的脂解過程是必要且具有挑戰(zhàn)性的。然而，由于脂質(zhì)納米載體的尺寸較小且其組成與內(nèi)源性物質(zhì)相似，在胃腸道中識別它們的存在一直是一個(gè)難題。

4、熒光標(biāo)記和放射性標(biāo)記被廣泛用于實(shí)時(shí)提供脂質(zhì)納米載體在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)信息，但在解析其在胃腸道中的脂解過程方面仍然面臨困難。傳統(tǒng)標(biāo)記的信號“始終開啟”阻礙了對脂質(zhì)納米載體與脂解后游離標(biāo)記物的區(qū)分，導(dǎo)致難以識別脂質(zhì)納米載體在脂解過程中的轉(zhuǎn)化。為克服這一障礙，此前開發(fā)出一系列聚集導(dǎo)致熒光淬滅(acq)探針，用于標(biāo)記各種納米載體。這些探針分子在納米載體中分散時(shí)會發(fā)出強(qiáng)烈且穩(wěn)定的熒光，但在釋放并聚集到水環(huán)境(比如胃腸道環(huán)境)中時(shí)，由于分子間的π–π相互作用聚集，熒光完全淬滅。然而，在脂解過程中產(chǎn)生的大量混合膠束可能重新溶解這些聚集的探針，從而導(dǎo)致即使在脂解完成后仍保持較高的熒光信號，致使無法實(shí)現(xiàn)脂解過程的精確監(jiān)測。此外，與其他商業(yè)熒光探針類似，這些acq探針的發(fā)射波長位于第一近紅外區(qū)(nir-i，650-900nm)，較高的組織自發(fā)熒光會對acq探針發(fā)出的熒光形成干擾，使熒光辨別能力差，并且由于發(fā)射波長較短，難以對深層組織(尤其是胃腸道)的納米載體進(jìn)行監(jiān)測。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、(一)要解決的技術(shù)問題

2、鑒于上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針及應(yīng)用，能夠?qū)崿F(xiàn)脂解過程的精確監(jiān)測，并且熒光辨別能力強(qiáng)，能夠?qū)ι顚咏M織(尤其是胃腸道)的脂質(zhì)納米載體進(jìn)行監(jiān)測。

3、(二)技術(shù)方案

4、為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的主要技術(shù)方案包括：

5、第一方面，本發(fā)明提供一種可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針，熒光探針的結(jié)構(gòu)通式為：

6、

7、其中，r基的結(jié)構(gòu)式為以下中的任意一種：

8、

9、n為5～23中的任一正整數(shù)。

10、可選地，r基的結(jié)構(gòu)式為：

11、

12、第二方面，本發(fā)明提供一種如上所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)遞藥系統(tǒng)。

13、可選地，脂質(zhì)遞藥系統(tǒng)為脂質(zhì)載體，熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)載體。

14、可選地，脂質(zhì)載體為脂質(zhì)納米載體。

15、可選地，脂質(zhì)納米載體包括納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln。

16、可選地，脂質(zhì)載體的油相為單甘油酯、硬脂酸甘油酯、魚油、大豆油、花生油、甘油三酯和橄欖油中的一種或幾種的混合。

17、可選地，脂質(zhì)載體的油相為甘油三酯和硬脂酸甘油酯中的一種或兩種的混合。

18、可選地，脂質(zhì)載體包括脂質(zhì)片劑、膠囊劑和自微乳。

19、可選地，納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln為油相和熒光探針通過乳化-高壓均質(zhì)法制備形成。

20、可選地，納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln制劑中，探針的終濃度為1.5×10-4～0.375mm，探針與油相質(zhì)量比為0.0002％～0.5％。

21、(三)有益效果

22、本發(fā)明提供的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針，基于供體-受體-供體(d-a-d)結(jié)構(gòu)的熒光探針，賦予了acq熒光探針強(qiáng)極性敏感特性并使其在紅外二區(qū)(nir-ii，900-1700nm)發(fā)射長波長熒光。本發(fā)明提供的熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)納米載體，可以消除來自游離探針和混合膠束的干擾，從而實(shí)現(xiàn)對脂質(zhì)納米載體的精確示蹤和脂解過程的監(jiān)測，同時(shí)熒光辨別能力強(qiáng)，能夠?qū)ι顚咏M織(尤其是胃腸道)的脂質(zhì)納米載體進(jìn)行監(jiān)測。

技術(shù)特征：

1.一種可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針，其特征在于，熒光探針的結(jié)構(gòu)通式為：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針，其特征在于，r基的結(jié)構(gòu)式為：

3.一種如權(quán)利要求1或2所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)遞藥系統(tǒng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)遞藥系統(tǒng)為脂質(zhì)載體，熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)載體為脂質(zhì)納米載體。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)納米載體包括納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)載體的油相為單甘油酯、硬脂酸甘油酯、魚油、大豆油、花生油、甘油三酯和橄欖油中的一種或幾種的混合。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)載體的油相為甘油三酯和硬脂酸甘油酯中的一種或兩種的混合。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，脂質(zhì)載體包括脂質(zhì)片劑、膠囊劑和自微乳。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln為油相和熒光探針通過乳化-高壓均質(zhì)法制備形成；納米乳ne和固體脂質(zhì)納米粒sln中，探針的終濃度為1.5×10-4～0.375mm，探針與油相質(zhì)量比為0.0002％～0.5％。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域，提供一種可視化脂質(zhì)載體脂解的熒光探針及應(yīng)用，其中熒光探針基于供體?受體?供體(D?A?D)結(jié)構(gòu)，具備ACQ效應(yīng)的同時(shí)具備強(qiáng)極性敏感特性，并且熒光探針在紅外二區(qū)(NIR?II，900?1700nm)發(fā)射長波長熒光。本發(fā)明提供的熒光探針用于標(biāo)記脂質(zhì)藥物載體，可以消除來自游離探針和混合膠束的干擾，從而實(shí)現(xiàn)對包括納米乳與脂質(zhì)納米粒在內(nèi)的多種脂質(zhì)載體的精確示蹤和脂解過程的監(jiān)測，同時(shí)熒光辨別能力強(qiáng)，能夠?qū)ι顚咏M織(尤其是胃腸道)的脂質(zhì)載體進(jìn)行監(jiān)測。

技術(shù)研發(fā)人員：何海生,吳偉,常智朝
受保護(hù)的技術(shù)使用者：復(fù)旦大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15